FPLC და HPLC მთავარი განსხვავება ისაა, რომ FPLC არის თხევადი ქრომატოგრაფიის ტიპი, რომელიც ასუფთავებს დიდ ბიომოლეკულებს, როგორიცაა ცილები, ნუკლეოტიდები და პეპტიდები, ხოლო HPLC არის თხევადი ქრომატოგრაფიის ტიპი, რომელიც გამოყოფს მცირე მოლეკულური წონის ნაერთებს.
თხევადი ქრომატოგრაფია არის ტექნიკა, რომელიც გამოიყენება ნიმუშის ცალკეულ კომპონენტებად გამოსაყოფად. ეს გამოყოფა ხდება კონკრეტული ნიმუშების მობილურ და სტაციონალურ ფაზებთან ურთიერთქმედების გამო. ნიმუშში კომპონენტები გამოყოფილია თხევადი ქრომატოგრაფიაში მოძრავი ფაზისადმი თითოეული კომპონენტის აფინურობის მიხედვით. როდესაც მობილური ფაზა და ნიმუში გადის სვეტში, ნიმუშის კომპონენტები იწყებენ გამოყოფას ზოლებად, რომლებიც შეიძლება გამოვლინდეს UV-VIS სპექტროსკოპიით.ამიტომ, FPLC და HPLC არის თხევადი ქრომატოგრაფიის ორი ტიპი.
რა არის FPLC?
FPLC არის თხევადი ქრომატოგრაფიის ტიპი, რომელიც ასუფთავებს დიდ ბიომოლეკულებს, როგორიცაა ცილები, ნუკლეოტიდები და პეპტიდები. სწრაფი პროტეინის თხევადი ქრომატოგრაფია (FPLC) პირველად შეიქმნა და გამოქვეყნდა შვედეთში კომპანიის Pharmacia-ს მიერ 1982 წელს. მას ხშირად იყენებენ ცილოვანი ნარევების ანალიზისათვის ან გასაწმენდად. ეს ხდება ნიმუშის კომპონენტების მიახლოების პრინციპზე დაყრდნობით მოძრავი სითხის (მობილური ფაზა) და ფოროვანი მყარი მასალის (სტაციონარული ფაზა). FPLC-ში მობილური ფაზა არის ბუფერი, ხოლო სტაციონარული ფაზა არის ფისი, რომელიც შედგება მძივებისგან. ის ჩვეულებრივ შედგება ჯვარედინი აგაროზისგან, რომელიც შეფუთულია ცილინდრული მინის ან პლასტმასის სვეტში.
სურათი 01: FLPC (სწრაფი პროტეინის თხევადი ქრომატოგრაფია) აპარატი
FLPC სტრატეგიის უმეტესობაში იონგამცვლელი ფისი გამოიყენება. მაშასადამე, საინტერესო ცილა ფისს დაუკავშირდება მუხტის ურთიერთქმედებით. FLPC ტექნიკა ასევე იყენებს ორ ბუფერს: ბუფერს 1 (გაშვებული ბუფერი) და ბუფერს 2 (გამორეცხვის ბუფერს). თავდაპირველად, როდესაც ბუფერი და ნიმუშის ნარევი გადის სვეტში, ნარევში საინტერესო ცილა დაუკავშირდება ფისს მუხტის ურთიერთქმედებით. მაგრამ ინტერესის ცილა დისოცირდება და უბრუნდება ხსნარს ელუციის ბუფერში, როდესაც გამორეცხვის ბუფერი გადის სვეტში პროცესის ბოლოს. მოგვიანებით, ხსნარი (ელუანტი, რომელიც შეიცავს ინტერესის პროტეინს) გადის ორ დეტექტორში, რომლებიც ზომავენ მარილის კონცენტრაციას და ცილის კონცენტრაციას. როდესაც თითოეული ცილა გამოირეცხება, ის აღმოჩენის დროს ჩნდება როგორც „პიკი“და შეიძლება შეგროვდეს შემდგომი გამოყენებისთვის.
რა არის HPLC?
HPLC არის თხევადი ქრომატოგრაფიის ტიპი, რომელიც გამოყოფს მცირე მოლეკულური წონის ნაერთებს. 1969 წელს პირველი HPLC კომერციულად წარმოებული იქნა Waters Corporation-ის მიერ, აშშ.მაღალი ხარისხის თხევადი ქრომატოგრაფიაში (HPLC), ნიმუშის ნარევი (ანალიზი) გამხსნელში (მობილურ ფაზაში) იტუმბება სვეტში ქრომატოგრაფიული შესაფუთი მასალით (სტაციონარული ფაზა) მაღალი წნევით. სინჯის ნარევი გადატანილია ჰელიუმის ან აზოტის მოძრავი გადამზიდავი აირის ნაკადით.
სურათი 02: HPLC (მაღალი ეფექტურობის თხევადი ქრომატოგრაფია)
ნიმუშების ნარევის კომპონენტები, რომლებსაც აქვთ ყველაზე ნაკლები ურთიერთქმედება სტაციონარულ ფაზასთან ან ყველაზე მეტი ურთიერთქმედება მობილურ ფაზასთან, უფრო სწრაფად გამოდიან სვეტიდან. მეორეს მხრივ, ნიმუშების ნარევის კომპონენტები, რომლებსაც აქვთ ყველაზე მეტი ურთიერთქმედება სტაციონარულ ფაზასთან ან ყველაზე ნაკლები ურთიერთქმედება მობილურ ფაზასთან, უფრო ნელა გამოდიან სვეტიდან. ზემოაღნიშნული ურთიერთქმედების პრინციპიდან გამომდინარე, ნიმუშის ნარევის კომპონენტები შეიძლება გამოიყოს.უფრო მეტიც, ინსტრუმენტის დეტექტორი განსაზღვრავს ნიმუშის ნარევის თითოეულ კომპონენტს, რომელიც გამოდის სვეტიდან. HPLC გამოიყენება გარემო და ბიოლოგიური ნიმუშების შესამოწმებლად ცნობილი ნაერთების არსებობის ან არარსებობის მიზნით, როგორიცაა წამლები, ტოქსინები ან პესტიციდები. იგი გამოიყენება სხვადასხვა ინდუსტრიაში, როგორიცაა ფარმაცევტული, გარემოსდაცვითი, სასამართლო ექსპერტიზა და ქიმიკატები.
რა მსგავსებაა FPLC-სა და HPLC-ს შორის?
- FPLC და HPLC არის თხევადი ქრომატოგრაფიის ტიპები.
- ორივე გამოიყენება ბიოლოგიური ნიმუშების გამოსაყოფად და იდენტიფიცირებისთვის.
- მათ აქვთ თხევადი მოძრავი ფაზა და მყარი სტაციონარული ფაზა.
- ორივე ტექნიკა იყენებს სვეტს ნიმუშის გასავლელად.
- ეს ტექნიკა იყენებს ტუმბოებს, დეტექტორებს, სარქველებს და პროგრამულ უზრუნველყოფას ნიმუშების გამოყოფისა და აღმოჩენისთვის.
რა განსხვავებაა FPLC-სა და HPLC-ს შორის?
FPLC არის თხევადი ქრომატოგრაფიის ტიპი, რომელიც გამოიყენება დიდი ბიომოლეკულების გასაწმენდად, როგორიცაა ცილები, ნუკლეოტიდები და პეპტიდები. HPLC არის თხევადი ქრომატოგრაფიის ტიპი, რომელიც გამოიყენება მცირე მოლეკულური წონის ნაერთების გამოსაყოფად. ასე რომ, ეს არის მთავარი განსხვავება FPLC-სა და HPLC-ს შორის. უფრო მეტიც, FPLC იყენებს pH და გამტარობის მონიტორებს, ისევე როგორც ფრაქციების კოლექტორებს. ამის საპირისპიროდ, HPLC არ იყენებს pH-ის და გამტარობის მონიტორებს და ფრაქციების კოლექტორებს.
ქვემოთ მოცემულ ინფოგრაფიკაში მოცემულია მეტი განსხვავება FPLC-სა და HPLC-ს შორის ცხრილის სახით.
რეზიუმე – FPLC vs HPLC
ქრომატოგრაფია არის ლაბორატორიული ანალიტიკური ტექნიკა, რომელიც გამოიყენება ნარევიდან კომპონენტების გამოყოფისთვის. იგი იყოფა რამდენიმე ტიპად, როგორიცაა სვეტის ქრომატოგრაფია, გაზის ქრომატოგრაფია, თხევადი ქრომატოგრაფია, იონგაცვლის ქრომატოგრაფია და ა.შ. FPLC და HPLC არის თხევადი ქრომატოგრაფიის ორი ტიპი. FPLC არის თხევადი ქრომატოგრაფიის ტიპი, რომელიც გამოიყენება დიდი ბიომოლეკულების გასაწმენდად, როგორიცაა ცილები, ნუკლეოტიდები და პეპტიდები. მეორეს მხრივ, HPLC არის თხევადი ქრომატოგრაფიის ტიპი, რომელიც გამოიყენება მცირე მოლეკულური წონის ნაერთების გამოსაყოფად.ამრიგად, ეს არის შეჯამება იმისა, თუ რა განსხვავებაა FPLC-სა და HPLC-ს შორის.
