ძირითადი განსხვავება RP HPLC-სა და HIC-ს შორის არის ის, რომ RP HPLC იყენებს უფრო პოლარულ მობილურ ფაზას და ნაკლებად პოლარულ სტაციონალურ ფაზას. მაშინ როცა, HIC იყენებს ჰიდროფობიურ სტაციონარულ ფაზას, რომელიც საშუალებას აძლევს ჰიდროფობიურ მოლეკულებს დაერთოს მას.
ქრომატოგრაფია არის ანალიტიკური ტექნიკა, რომელიც ეხმარება ნარევის კომპონენტებად გამოყოფას. ჯერ უნდა გავხსნათ ხსნარში გამოსაყოფი ნიმუში. ამ ხსნარ-ნივთიერების ნარევს მობილური ფაზა ეწოდება. შემდეგ მობილური ფაზა გადის სხვა მასალაში, რომელსაც სტაციონარული ფაზა ეწოდება. სტაციონარული ფაზა განსაზღვრავს კომპონენტების გამოყოფას. გამოყოფა ხდება მობილურ ფაზასა და სტაციონარულ ფაზას შორის მასალის დაყოფის გამო.
რა არის RP HPLC?
ტერმინი RP HPLC ნიშნავს საპირისპირო ფაზის მაღალი ხარისხის თხევადი ქრომატოგრაფიას. იგი მოიცავს კომპონენტების გამოყოფას ნარევში, ჰიდროფობიურობის მიხედვით. მობილურ ფაზაში ჰიდროფობიური კომპონენტები უკავშირდებიან სტაციონარულ ფაზაზე იმობილიზებულ ჰიდროფობიურ ლიგანდებს, ხოლო ჰიდროფილური კომპონენტები სტაციონარული ფაზის გავლით იშლება სტაციონარული ფაზის ზედაპირზე მიმაგრების გარეშე.
სურათი 01: HPLC აპარატი
უფრო მეტიც, ამ მეთოდს აქვს უფრო მეტი განმეორებადობა სხვა ქრომატოგრაფიულ ტექნიკასთან შედარებით და ასევე ავლენს ფართო გამოყენებადობას. ამიტომ, ჩვენ ვიყენებთ ამ მეთოდს ლაბორატორიებში ყველა HPLC მეთოდის 75%-ზე მეტს. უმეტეს შემთხვევაში, ჩვენ ვიყენებთ წყლის წყლიან ნარევს შერევით პოლარული ორგანული გამხსნელით, როგორც მობილური ფაზა.ამრიგად, ის უზრუნველყოფს ხსნარში ჰიდროფობიური კომპონენტების მიმაგრებას სტაციონარული ფაზის ზედაპირზე.
რა არის HIC?
ტერმინი HIC ნიშნავს ჰიდროფობიურ ურთიერთქმედების ქრომატოგრაფიას. ეს არის საპირისპირო ფაზის HPLC-ის ტიპი და ეს მეთოდი ძირითადად გამოიყენება დიდი ბიომოლეკულების, როგორიცაა ცილები, გამოყოფისთვის. ამ მეთოდით, ჩვენ უნდა გამოვიყენოთ წყალხსნარი ბიომოლეკულის ნიმუშის გასაკეთებლად. ეს იმიტომ ხდება, რომ ორგანულმა გამხსნელებმა შეიძლება გამოიწვიოს ცილების დენატურაცია. უფრო მეტიც, ეს ტექნიკა იყენებს ურთიერთქმედებას დიდ მოლეკულებს შორის სტაციონარული ფაზის ოდნავ ჰიდროფობიურ ზედაპირთან. გარდა ამისა, ჩვენ უნდა გამოვიყენოთ მარილის მაღალი კონცენტრაცია ნიმუშში, რადგან ეს ხელს უწყობს ცილის შეფუთვას შენახვას; ამ პროცესს მარილის ამოღება ეწოდება. მარილის კონცენტრაციის თანდათანობით შემცირებით, შეგვიძლია ბიომოლეკულები ცალკე გამოვყოთ მათი ჰიდროფობიურობის მიხედვით.
ჩვეულებრივ, ეს მეთოდი იყენებს იონგაცვლის ქრომატოგრაფიის საპირისპირო პირობებს.ამ ტექნიკით, პირველ რიგში, ჩვენ უნდა გავატაროთ ბუფერული ხსნარი სვეტში, რათა შევამციროთ ხსნარის ხსნარი ნიმუშში. ეს აიძულებს ცილის ჰიდროფობიურ რეგიონებს გამოაშკარავდეს. თუმცა, როდესაც მოლეკულა უფრო ჰიდროფობიურია, ნაკლები მარილია საჭირო, რომ ხელი შეუწყოს შეკავშირებას. აქ პირველ რიგში გამოირეცხება ნაკლებად ჰიდროფობიური ხსნარი, ხოლო მარილის კონცენტრაციის ცვლილების მიხედვით, ბოლოს გამოიყოფა მეტი ჰიდროფობიური ხსნარი.
რა განსხვავებაა RP HPLC-სა და HIC-ს შორის?
ქრომატოგრაფია არის ნარევში კომპონენტების გამოყოფის ანალიზური ტექნიკა. RP HPLC და HIC არის ორი სპეციალიზებული ქრომატოგრაფიული ტექნიკა. RP HPLC-სა და HIC-ს შორის მთავარი განსხვავება ისაა, რომ RP HPLC იყენებს უფრო პოლარულ მობილურ ფაზას და ნაკლებად პოლარულ სტაციონარულ ფაზას, ხოლო HIC იყენებს ჰიდროფობიურ სტაციონარულ ფაზას, რომელიც საშუალებას აძლევს ჰიდროფობიურ მოლეკულებს მიმაგრდეს მასზე.
ქვემოთ მოცემული ინფოგრაფიკა აჯამებს განსხვავებას RP HPLC-სა და HIC-ს შორის.
შეჯამება – RP HPLC წინააღმდეგ HIC
ქრომატოგრაფია არის ნარევში კომპონენტების გამოყოფის ანალიზური ტექნიკა. RP HPLC და HIC არის ორი სპეციალიზებული ქრომატოგრაფიული ტექნიკა. RP HPLC-სა და HIC-ს შორის მთავარი განსხვავება ისაა, რომ RP HPLC იყენებს უფრო პოლარულ მობილურ ფაზას და ნაკლებად პოლარულ სტაციონარულ ფაზას, ხოლო HIC იყენებს ჰიდროფობიურ სტაციონარულ ფაზას, რომელიც საშუალებას აძლევს ჰიდროფობიურ მოლეკულებს მიმაგრდეს მას.
