საპირისპირო ფაზასა და ნორმალურ ფაზას HPLC-ს შორის მთავარი განსხვავება ისაა, რომ საპირისპირო ფაზა HPLC იყენებს არაპოლარულ სტაციონალურ ფაზას და პოლარულ მობილურ ფაზას, ხოლო ნორმალური ფაზა HPLC იყენებს პოლარულ სტაციონალურ ფაზას და ნაკლებად პოლარულ მობილურ ფაზას.
ნორმალური ფაზის HPLC არის HPLC-ის უძველესი ტექნიკა, რომელსაც ცვეტი იყენებდა მცენარეული ექსტრაქტების გამოყოფისას; მან გამოიყენა ცარცი მინის სვეტში. ეს იყო ქრომატოგრაფიის კლასიკური მეთოდი, რამაც განაპირობა მისი დასახელება, როგორც "ნორმალური" ტექნიკა. შებრუნებული ფაზის HPLC, მეორე მხრივ, ჩვეულებრივი ტექნიკის საპირისპიროა, რომელიც მეცნიერებმა ბოლო დროს შეიმუშავეს.
რა არის საპირისპირო ფაზის HPLC?
უკუ ფაზა HPLC არის ქრომატოგრაფიული ტექნიკა, რომელშიც ჩვენ ვიყენებთ ჰიდროფობიურ სტაციონარულ ფაზას. ყველა HPLC მეთოდს შორის, ჩვენ ვიყენებთ ამ მეთოდს დაახლოებით 70%-ით, მისი ფართო გამოყენებადობისა და რეპროდუქციულობის გამო. სტაციონარული ფაზა არაპოლარულია, ხოლო მობილური ფაზა პოლარული.
უმეტესად, მეცნიერები იყენებენ წყლის წყალხსნარს შერევადი, პოლარული ორგანული გამხსნელით, როგორიცაა აცეტონიტრილი ან მეთანოლი, როგორც მობილური ფაზა. ამრიგად, ანალიზები ურთიერთქმედებენ არაპოლარულ სტაციონარულ ფაზასთან.
რა არის ნორმალური ფაზის HPLC?
ნორმალური ფაზა HPLC არის ქრომატოგრაფიული ტექნიკა, რომელშიც ვიყენებთ ჰიდროფილურ სტაციონარულ ფაზას. ეს არის HPLC-ის ტრადიციული მეთოდი, თუმცა ჩვენ მას არც ისე ხშირად ვიყენებთ. სტაციონარული ფაზა არის პოლარული, ხოლო მობილური ფაზა არის არაპოლარული. რაც მთავარია, ამ ტექნიკის მობილური ფაზა 100% ორგანულია. ეს ნიშნავს, რომ ამისთვის წყალი არ გამოიყენება.
სურათი 01: ნიმუშის პროფილი ნორმალური ფაზის და საპირისპირო ფაზის HPLC ქრომატოგრამებისთვის ანალიზში კომპონენტების პოლარობის მიხედვით.
როგორც წესი, სტაციონარული ფაზა შეიცავს სილიციუმს, ციანო, დიოლს, ამინოკავშირის ფაზებს და ა.შ. მობილური ფაზები მოიცავს ორგანულ გამხსნელებს, როგორიცაა ჰექსანი, ეთილის აცეტატი და ა.შ. პოლარული სტაციონარული ფაზა.
რა განსხვავებაა საპირისპირო ფაზასა და ნორმალურ ფაზას HPLC-ს შორის?
უკუ ფაზა HPLC არის ქრომატოგრაფიული ტექნიკა, რომელშიც ჩვენ ვიყენებთ ჰიდროფობიურ სტაციონარულ ფაზას. ამ ტექნიკის სტაციონარული ფაზა არის არაპოლარული, ხოლო მობილური ფაზა პოლარული. გარდა ამისა, მეცნიერები იყენებენ წყლის წყალხსნარს შერევით, პოლარული ორგანული გამხსნელით, როგორიცაა აცეტონიტრილი ან მეთანოლი, როგორც მობილური ფაზა HPLC-ის საპირისპირო ფაზაში.ამის საპირისპიროდ, ნორმალური ფაზის HPLC არის ქრომატოგრაფიული ტექნიკა, რომელშიც ჩვენ ვიყენებთ ჰიდროფილურ სტაციონალურ ფაზას. ამ ტექნიკის სტაციონარული ფაზა არის პოლარული, ხოლო მობილური ფაზა არის არაპოლარული. გარდა ამისა, მეცნიერები იყენებენ ორგანულ გამხსნელებს, როგორიცაა ჰექსანი, ეთილის აცეტატი და ა.შ., როგორც ნორმალური ფაზის HPLC-ის მობილური ფაზა. ქვემოთ მოცემულ ინფოგრაფიკაში წარმოდგენილია განსხვავება საპირისპირო ფაზასა და ნორმალურ ფაზას HPLC-ს შორის ცხრილის სახით.
რეზიუმე – საპირისპირო ფაზა ნორმალური ფაზის HPLC
უკუ ფაზის და ნორმალური ფაზის HPLC ტექნიკა არის ორი თხევადი ქრომატოგრაფიული ტექნიკა. საპირისპირო ფაზასა და ნორმალურ ფაზას HPLC-ს შორის მთავარი განსხვავებაა ის, რომ საპირისპირო ფაზა HPLC იყენებს არაპოლარულ სტაციონარულ ფაზას და პოლარულ მობილურ ფაზას, ხოლო ნორმალური ფაზის HPLC იყენებს პოლარულ სტაციონარულ ფაზას და ნაკლებად პოლარულ მობილურ ფაზას.
