ძირითადი განსხვავება – პირდაპირი და არაპირდაპირი ELISA
ფერმენტთან დაკავშირებული იმუნოანალიზი (ELISA), ასევე ცნობილი როგორც ფერმენტული იმუნოანალიზი, არის სეროლოგიური ტესტი, რომელიც აღმოაჩენს ანტისხეულებს სისხლში. იგი გამოიყენება, როგორც სადიაგნოსტიკო საშუალება იმის გასარკვევად, მოხვდა თუ არა პაციენტს კონკრეტული ტიპის ვირუსი ან სხვა ინფექციური აგენტი (ანტიგენი) და გამოიმუშავა თუ არა ორგანიზმმა ინფექციის საწინააღმდეგო ანტისხეულები. ELISA-ს ასევე შეუძლია წარსული და მიმდინარე ინფექციების იდენტიფიცირება. აქედან გამომდინარე, ELISA ხშირად გამოიყენება როგორც წინასწარი სკრინინგის ტესტი ექიმების მიერ დაავადების სიღრმისეული ანალიზის წინ. ეს ტესტი შეიძლება ჩატარდეს ლაბორატორიაში პაციენტისგან სისხლის ნიმუშის აღებით.არსებობს ELISA ტესტის ორი ტიპი: პირდაპირი ELISA და არაპირდაპირი ELISA. პირდაპირი და არაპირდაპირი ELISA-ს მთავარი განსხვავება ისაა, რომ არაპირდაპირი ELISA უფრო მგრძნობიარეა და მოითხოვს მეორადი ანტისხეულის დამატებას, ხოლო პირდაპირი ELISA ნაკლებად მგრძნობიარეა და იყენებს მხოლოდ პირველად ანტისხეულს.
რა არის პირდაპირი ELISA?
ELISA არის დაავადების დიაგნოსტიკური ტესტი, რომელიც ტარდება სისხლში კონკრეტული ანტიგენების ან ანტისხეულების არსებობის დასადგენად. იგი კეთდება როგორც ფირფიტის ანალიზი. იგი იყენებს ანტისხეულებს, რომლებიც დაკავშირებულია ადვილად შესამოწმებელ ფერმენტებთან. ანტიგენების არსებობა შრატის ნიმუშში უკავშირდება სპეციფიკურ ანტისხეულებს, რომლებიც დაკავშირებულია ფერმენტებთან. საბოლოო საფეხურზე ემატება სპეციფიური სუბსტრატი ფერმენტთან საპასუხოდ. ფერმენტი გარდაქმნის სუბსტრატს ფერად ან სიგნალის წარმომქმნელ პროდუქტად. ქიმიურ სუბსტრატში ფერის ცვლილება ავლენს შრატის ნიმუშში კონკრეტული ანტისხეულების არსებობას. პირდაპირი ELISA ტესტი იყენებს მხოლოდ პირველადი ანტისხეულს, რომელიც დაკავშირებულია ფერმენტთან. ანტიგენთან შეკავშირებისას ის სწრაფად იცვლის ფერს, რაც მიუთითებს სისხლში ინფექციური აგენტის არსებობაზე.თუმცა, სიგნალების ინტენსივობა უფრო სუსტია პირდაპირი ELISA-ში, ვინაიდან ეპიტოპები შემოიფარგლება ანტიგენების შეკავშირებით. აქედან გამომდინარე, პირდაპირი ELISA ნაკლებად მგრძნობიარეა არაპირდაპირი ELISA-სთან შედარებით.
სურათი 01: პირდაპირი ELISA ტესტი
რა არის არაპირდაპირი ELISA?
ELISA შეიძლება ჩატარდეს ორი ტიპის ანტისხეულების გამოყენებით, კერძოდ; პირველადი ანტისხეულები და მეორადი ანტისხეულები. არაპირდაპირი ELISA ინსტრუმენტი იყენებს ორივე ტიპის ანტისხეულებს სიგნალების გასაძლიერებლად უკეთესი გამოვლენისთვის. არაპირდაპირი ELISA ტექნიკა ხორციელდება შემდეგნაირად.
- ფილები ინკუბირებულია ანტიგენებით და გარეცხილია არასპეციფიკური შეკავშირების დასაბლოკად.
- შემდეგ ემატება პირველადი ანტისხეულები და ირეცხება.
- ფერმენტთან დაკავშირებული მეორადი ანტისხეულები ემატება და ირეცხება.
- ემატება სუბსტრატი და ნებადართულია რეაგირება ფერმენტებთან.
- გამოვლენილია სიგნალები და იდენტიფიცირებულია სპეციფიკური ანტიგენის არსებობა ან არარსებობა ნიმუშში.
არაპირდაპირი ELISA ტესტის დროს რამდენიმე მეორადი ანტისხეული შეიძლება დაუკავშირდეს ერთ პირველად ანტისხეულს. მეორადი ანტისხეულები დაკავშირებულია ადვილად შესამოწმებელ ფერმენტებთან. მაშასადამე, ერთ დაკავშირებას შეუძლია ძლიერი სიგნალის მიღება ერთზე მეტი ურთიერთქმედების გამო. ამრიგად, არაპირდაპირი ELISA უფრო მგრძნობიარეა, ვიდრე პირდაპირი ELISA. თუმცა, არაპირდაპირი ELISA-ს შეუძლია მიიღოს არასპეციფიკური სიგნალები მეორადი ანტისხეულების ჯვარედინი რეაქციების გამო.
სურათი 02: არაპირდაპირი ELISA ტესტი
რა განსხვავებაა პირდაპირ და არაპირდაპირ ELISA-ს შორის?
პირდაპირი vs არაპირდაპირი ELISA |
|
| პირდაპირი ELISA ნაკლებად მგრძნობიარეა არაპირდაპირი ELISA-სთან შედარებით. | არაპირდაპირი ELISA უფრო მგრძნობიარეა. |
| მიღებული დრო | |
| პირდაპირი ELISA ტესტი სწრაფი პროცესია. | არაპირდაპირი ELISA შრომატევადია. |
| ანტისხეულების გამოყენება | |
| მხოლოდ ერთი ტიპის ანტისხეულები (პირველადი ანტისხეულები) გამოიყენება პირდაპირი ELISA-ს დროს. | პირველადი და მეორადი ანტისხეულები გამოიყენება არაპირდაპირი ELISA-სთვის. |
| კავშირი ფერმენტებთან | |
| პირველადი ანტისხეულები დაკავშირებულია ფერმენტებთან. | მეორადი ანტისხეულები დაკავშირებულია ფერმენტებთან. |
| მეორე ანტისხეულების ჯვარედინი რეაქტიულობა | |
| პირდაპირი ELISA გამორიცხავს მეორე ანტისხეულების ჯვარედინი რეაქტიულობას. | არაპირდაპირი ELISA გავლენას ახდენს მეორე ანტისხეულების ჯვარედინი რეაქტიულობით. |
| სიგნალები | |
| სიგნალები სუსტია არაპირდაპირი ELISA-სთან შედარებით. | სიგნალები გაძლიერებულია არაპირდაპირი ELISA-ში. ამიტომ მისი აღმოჩენა ადვილია. |
რეზიუმე – პირდაპირი vs არაპირდაპირი ELISA
ELISA არის ბიოქიმიური ტექნიკა, რომელიც ძირითადად გამოიყენება იმუნოლოგიაში პაციენტის სისხლის ნიმუშში ანტისხეულების ან ანტიგენის არსებობის გამოსავლენად. ის შეიძლება განხორციელდეს ორი პროცესის საშუალებით, რომლებიც ცნობილია როგორც პირდაპირი ან არაპირდაპირი ELISA. პირდაპირი ELISA ტესტი იყენებს მხოლოდ პირველად ანტისხეულებს ანტიგენის გამოსავლენად, ხოლო არაპირდაპირი ELISA იყენებს პირველად და მეორად ანტისხეულებს.პირდაპირი ELISA-ში პირველადი ანტისხეულები იარლიყება, ხოლო არაპირდაპირი ELISA-ში მეორადი ანტისხეულები ეტიკეტირებულია. ეს არის განსხვავება პირდაპირ და არაპირდაპირ ELISA-ს შორის.
