პირდაპირ და არაპირდაპირ იმუნოფლუორესცენციას შორის მთავარი განსხვავება ისაა, რომ პირდაპირი იმუნოფლუორესცენცია იყენებს ერთ ანტისხეულს, რომელიც მუშაობს ინტერესის სამიზნის წინააღმდეგ, ხოლო არაპირდაპირი იმუნოფლუორესცენცია იყენებს ორ ანტისხეულს ინტერესის სამიზნის დასანიშნად.
იმუნოფლუორესცენცია ან უჯრედის ვიზუალიზაცია არის ტექნიკა, რომელიც გამოიყენება კონკრეტული სამიზნე ანტიგენის ფტორფორით მარკირებისთვის. აქ, ფტორფორი არის ფლუორესცენტური ქიმიური ნაერთი, რომელსაც შეუძლია ხელახლა ასხივოს შუქი სინათლის აგზნებისას. როდესაც ფტორფორი აკავშირებს სამიზნე ანტიგენს, ის იძლევა ნიმუშში სამიზნე მოლეკულის გამოვლენის საშუალებას. მისი შემდგომი აღწერისთვის, როდესაც ანტიგენი აკავშირებს სპეციფიკურ ანტისხეულს, ის შეიძლება კონიუგირებული იყოს ფტორფორებთან.აქედან გამომდინარე, ადვილია ნიმუშში სამიზნე ანტიგენის არსებობის დადგენა ფლუორესცენციული მიკროსკოპით დაკვირვებისას.
გარდა ამისა, არსებობს იმუნოფლუორესცენციის ორი ტიპი; პირდაპირი და არაპირდაპირი იმუნოფლუორესცენცია. განსხვავება პირდაპირ და არაპირდაპირ იმუნოფლუორესცენციას შორის ძირითადად მდგომარეობს გამოყენებული ანტისხეულების რაოდენობასა და ფტორფორის კონიუგაციაში. ანუ, პირდაპირი იმუნოფლუორესცენციის დროს, ფტორფორი პირდაპირ კონიუგარდება პირველად ანტისხეულთან, ხოლო არაპირდაპირი იმუნოფლუორესცენციის დროს, ფლუოროფორი კონიუგატირდება მეორად ანტისხეულთან..
რა არის პირდაპირი იმუნოფლუორესცენცია?
იმუნოფლუორესცენცია იყენებს ანტისხეულებს კონკრეტული სამიზნე ანტიგენების გამოსავლენად. პირდაპირი იმუნოფლუორესცენცია არის იმუნოფლუორესცენციის ორი ტიპიდან ერთ-ერთი. პირდაპირი იმუნოფლუორესცენციის დროს, ერთი ანტისხეული (პირველადი ანტისხეული) ჩართულია და ფტორფორი პირდაპირ კონიუგირდება პირველად ანტისხეულთან. ანტისხეულის სამიზნე ანტიგენთან შეერთებისას, ფტორფორი ასხივებს ფლუორესცენციას, რომელიც შეიძლება გამოვლინდეს ფლუორესცენციული მიკროსკოპით.
სურათი 01: პირდაპირი იმუნოფლუორესცენცია
თუმცა, პირდაპირი იმუნოფლუორესცენცია ძვირადღირებული მეთოდია, რადგან პირველადი კონიუგირებული ანტისხეულები ძვირია მეორად ანტისხეულებთან შედარებით. მიუხედავად ამისა, ის არ მოიცავს დამატებით ნაბიჯს, შესაბამისად, უფრო მოკლე ტექნიკას. გარდა ამისა, არასპეციფიკური შეკავშირებები მცირდება პირდაპირი იმუნოფლუორესცენციის დროს. აქედან გამომდინარე, სახეობების ჯვარედინი რეაქტიულობა დაბალია. მაგრამ გამოვლენისას, პირდაპირი იმუნოფლუორესცენციის მგრძნობელობა სუსტია არაპირდაპირი იმუნოფლუორესცენციასთან შედარებით.
რა არის არაპირდაპირი იმუნოფლუორესცენცია?
არაპირდაპირი იმუნოფლუორესცენცია არის იმუნოფლუორესცენციის მეორე ტიპი, რომელიც მოიცავს ორ ტიპის ანტისხეულებს, როგორიცაა პირველადი და მეორადი ანტისხეულები სამიზნე ანტიგენის მარკირებაში.ამ მეთოდით, ფტორფორი კონიუგირდება მეორად ანტისხეულთან. აქედან გამომდინარე, ეს ტექნიკა მოიცავს დამატებით ნაბიჯს.
სურათი 02: იმუნოფლუორესცენცია
თუმცა, ამ მეთოდის მგრძნობელობა მაღალია, რადგან რამდენიმე ფტორფორი შეიძლება იყოს კონიუგირებული მეორად ანტისხეულებთან და ეს აადვილებს გამოვლენას. გარდა ამისა, არაპირდაპირი იმუნოფლუორესცენცია ნაკლებად ძვირია იმის გამო, რომ მეორადი ანტისხეულების კონიუგაცია ნაკლებად ძვირი და ადვილია. პირდაპირ იმუნოფლუორესცენტასთან შედარებით, სახეობების ჯვარედინი რეაქტიულობა მაღალია არაპირდაპირი მეთოდით.
რა მსგავსებაა პირდაპირ და არაპირდაპირ იმუნოფლუორესცენციას შორის?
- ეს არის ორი ტიპის იმუნოფლუორესცენციის ტექნიკა.
- პირველადი ანტისხეულები და ფტოროფორი ჩართულია ორივე მეთოდში.
- ასევე, ანტიგენ-ანტისხეულის რეაქცია ხდება ორივე მეთოდით.
- გარდა ამისა, როგორც პირდაპირი, ასევე არაპირდაპირი იმუნოფლუორესცენცია იყენებს ფლუორესცენტულ მიკროსკოპს ანტიგენის გამოსავლენად.
რა განსხვავებაა პირდაპირ და არაპირდაპირ იმუნოფლუორესცენციას შორის?
იმუნოფლუორესცენცია შეიძლება იყოს პირდაპირი ან არაპირდაპირი გამოყენებული ანტისხეულებთან ფტორფორის კონიუგაციის საფუძველზე. პირდაპირი იმუნოფლუორესცენციის დროს, ფტორფორი კონიუგირდება პირველად ანტისხეულთან, რომელიც არის ერთი ანტისხეული, რომელიც მონაწილეობს ამ ტექნიკაში. ამის საპირისპიროდ, არაპირდაპირი იმუნოფლუორესცენციის დროს, ფტორფორი კონიუგირდება მეორად ანტისხეულთან, რომელიც არის ორი ტიპის ანტისხეულებიდან ერთ-ერთი, რომელიც ჩართულია ტექნიკაში. აქედან გამომდინარე, მთავარი განსხვავება პირდაპირ და არაპირდაპირ იმუნოფლუორესცენციას შორის არის ანტისხეულების ტიპი, რომელიც კონიუგირდება ფტორფორთან.
შემდეგი ინფოგრაფიკა გთავაზობთ გვერდიგვერდ შედარებას სხვაობის პირდაპირ და არაპირდაპირ იმუნოფლუორესცენციას შორის.
რეზიუმე – პირდაპირი vs არაპირდაპირი იმუნოფლუორესცენცია
იმუნოფლუორესცენცია არის ტექნიკა, რომელიც გამოიყენება ნიმუშში სპეციფიკური ანტიგენების არსებობის დასადგენად. ეს ტექნიკა იყენებს სპეციფიკურ ანტისხეულებს. ამიტომ, ამ შემთხვევაში, ანტისხეულები კონიუგირდება ფტორფორებთან, რათა აღმოაჩინონ ისინი ფლუორესცენტური მიკროსკოპის გამოყენებით. უფრო მეტიც, არსებობს იმუნოფლუორესცენციის ორი ტიპი, კერძოდ, პირდაპირი და არაპირდაპირი იმუნოფლუორესცენცია. პირდაპირი იმუნოფლუორესცენცია მოიცავს ერთ ანტისხეულს და ამ ანტისხეულთან პირდაპირ კონიუგირებულ ფტორფორს. არაპირდაპირი იმუნოფლუორესცენცია მოიცავს ორ ანტისხეულს; პირველადი და მეორადი და ფტორფორი კონიუგირებული მეორად ანტისხეულთან.ვინაიდან რამდენიმე მეორადი ანტისხეული შეიძლება დაუკავშირდეს პირველად ანტისხეულს და რამდენიმე ფტორფორს შეუძლია კონიუგირდეს მეორად ანტისხეულებთან, არაპირდაპირი იმუნოფლუორესცენცია უფრო მგრძნობიარე მეთოდია, ვიდრე პირდაპირი მეთოდი. გარდა ამისა, არაპირდაპირი მეთოდი უფრო იაფია, ვიდრე პირდაპირი მეთოდი. ამრიგად, ეს არის განსხვავება პირდაპირ და არაპირდაპირ იმუნოფლუორესცენციას შორის.
