ძირითადი განსხვავება - კაპილარული ელექტროფორეზი და გელის ელექტროფორეზი
ელექტროფორეზი არის ტექნიკა, რომელიც გამოიყენება ბიომოლეკულების გამოსაყოფად ნაწილაკების მუხტის, ნაწილაკების ზომისა და ნაწილაკების ფორმის მიხედვით. მოლეკულის მიგრაცია, რომელიც ცნობილია როგორც ელექტროფორეზული მობილურობა, დამოკიდებულია გამოყენებული პოლიმერის/გელის ტიპზე, მის ფორების ზომაზე, მიწოდებულ ძაბვაზე, მუშაობის დროს და ზედაპირისა და მოცულობის თანაფარდობაზე. არსებობს სხვადასხვა ტიპის ელექტროფორეზის ტექნიკა გამოყენებული ბიომოლეკულის ტიპზე დაყრდნობით. ელექტროფორეზის პირველი ტიპი, რომელიც გამოიგონეს, იყო ქაღალდის ელექტროფორეზი, სადაც ნიტროცელულოზის ქაღალდი გამოიყენებოდა ბიომოლეკულების გამოყოფის საშუალებად.გელის ელექტროფორეზის პრინციპი, სადაც სხვადასხვა ფორების ზომის გელები გამოიყენებოდა ბიომოლეკულების გამოსაყოფად, მოგვიანებით გამოიგონეს. გელის ელექტროფორეზის ტექნიკა შემდგომში შეიცვალა ტექნიკის სიზუსტის გასაუმჯობესებლად და ერთ-ერთი ასეთი მოდიფიკაციაა კაპილარული ელექტროფორეზი. კაპილარული ელექტროფორეზისა და გელის ელექტროფორეზის მთავარი განსხვავება ისაა, რომ გელის ელექტროფორეზი ტარდება ვერტიკალურ ან ჰორიზონტალურ სიბრტყეში სტანდარტული ფორების ზომის პოლიმერული გელის გამოყენებით, ხოლო კაპილარული ელექტროფორეზი ტარდება კაპილარულ მილში პოლიმერული სითხით ან გელით.
რა არის გელის ელექტროფორეზი?
გელის ელექტროფორეზი არის ტექნიკა, რომელიც გამოიყენება ძირითადად ნუკლეინის მჟავების, ცილების ან ამინომჟავების გამოსაყოფად მისი მუხტის, ზომისა და ფორმის მიხედვით. ეს ტექნიკა იყენებს ფიზიკურ გელს, რომელიც არის პოლიმერული ნივთიერება, როგორც გამოყოფის საშუალება. ყველაზე ხშირად გამოყენებული გელებია აგაროზა (ნუკლეინის მჟავების გამოყოფისთვის) და პოლიაკრილამიდი (ცილის გამოყოფისთვის). გელის ელექტროფორეზული აპარატი შეიცავს გელის ჩამოსხმის უჯრას გელის მოსამზადებლად, ჩამოსხმის სავარცხლებს ჭაბურღილების მოსამზადებლად, ბუფერულ ავზს, ელექტროდებს - პოზიტიურ (ანოდი) და უარყოფით (კათოდი) და ძაბვის მიწოდების ერთეულს.მოლეკულები, როგორიცაა დნმ ან რნმ, რომლებიც უარყოფითად დამუხტულია, კათოდიდან ანოდში გადადიან და დადებითად დამუხტული მოლეკულები პირიქით. გელის მომზადება ხდება მოთხოვნის მიხედვით. თუ საჭიროა მოლეკულების მაღალი გარჩევადობა ან განცალკევება, უნდა მომზადდეს მაღალი კონცენტრაციის გელი მცირე ფორების ზომით. გელის მატრიცაზე გამოყოფილი მოლეკულები შეინიშნება შეღებვის ტექნიკის შემდეგ. გამოყოფილი მოლეკულები გელის მატრიცაზე ზოლების სახით გამოჩნდება.
სურათი 01: გელის ელექტროფორეზი
გელის ელექტროფორეზი გამოიყენება მოლეკულურ დიაგნოსტიკაში, როგორიცაა დნმ-ის თითის ანაბეჭდი კონკრეტული დნმ/რნმ ფრაგმენტის ან ცილის არსებობის დასადგენად. გელის ელექტროფორეზი ასევე განსაზღვრავს ამოღებული ბიომოლეკულის ნიმუშის სისუფთავეს.გელის ელექტროფორეზი ტარდება როგორც წინასწარი ეტაპი და ჰიბრიდიზაციისთვის და როგორც დამადასტურებელი ანალიზი თანმიმდევრობის შემდეგ.
რა არის კაპილარული ელექტროფორეზი?
კაპილარული ელექტროფორეზი არის გელის ელექტროფორეზის მოდიფიკაცია, რომელიც იყენებს განცალკევების იმავე პრინციპს დაფუძნებული მუხტის, მოლეკულის ზომაზე, მაგრამ ტარდება კაპილარულ მილში გელის ნივთიერებით ან თხევადი პოლიმერით. კაპილარები მზადდება მდნარი სილიციუმისგან და თითოეული კაპილარული მილის აქვს შიდა დიამეტრი 50-100μm და სიგრძე 25-100 სმ. ნიმუშები შეჰყავთ კაპილარულ მილში, რომელიც შეიცავს პოლიმერულ მასალას და გამოიყოფა ბევრად სწრაფად, ვიდრე ჩვეულებრივი გელის ელექტროფორეზი. კაპილარული სისტემა კარგად არის დაცული საიზოლაციო ქურთუკის შიგნით, რომელიც იცავს ნიმუშს ნებისმიერი დაბინძურებისგან. კაპილარები შეიძლება შეივსოს თხევადი პოლიმერებით, როგორიცაა ჰიდროქსიეთილის ცელულოზა ან მაღალი რეზოლუციის გელები, როგორიცაა პოლიაკრილამიდი. კაპილარული ელექტროფორეზი უზრუნველყოფს უფრო დიდ გარჩევადობას; ამიტომ გამოყოფა უფრო ზუსტია.კაპილარული ელექტროფორეზი იყენებს ავტომატური დეტექტორის სისტემას სპექტროფოტომეტრიული ანალიზის საშუალებით. ეს გამოწვეულია ზედაპირის ფართობის უფრო მაღალი თანაფარდობით მოცულობასთან.
სურათი 02: კაპილარული ელექტროფორეზი
კაპილარული ელექტროფორეზი გამოიყენება ისეთ სიტუაციებში, როგორიცაა სასამართლო ექსპერტიზა, სადაც უფრო მაღალი სიზუსტეა საჭირო და ხშირად არ გამოიყენება, რადგან ეს ძვირადღირებული ტექნიკაა.
რა მსგავსებაა კაპილარული ელექტროფორეზისა და გელის ელექტროფორეზის შორის?
- მოლეკულების გამოყოფა ორივე ტექნიკაში ეფუძნება მოლეკულის მუხტსა და ზომას.
- ორივე ტექნიკა შეიძლება გამოყენებულ იქნას როგორც ნუკლეინის მჟავების, ასევე ცილების გამოსაყოფად.
- ორივე ტექნიკის ნიმუშის მოცულობა იგივეა.
- ორივე ტექნიკა იყენებს ბუფერს გამოყოფის გასაადვილებლად.
რა განსხვავებაა კაპილარულ ელექტროფორეზსა და გელის ელექტროფორეზს შორის?
კაპილარული ელექტროფორეზი vs გელის ელექტროფორეზი |
|
| კაპილარული ელექტროფორეზი არის ტექნიკა, რომელიც გამოყოფს ბიომოლეკულებს კაპილარულ მილზე თხევადი ან გელის პოლიმერული საშუალების გამოყენებით. | გელის ელექტროფორეზი არის ტექნიკა, რომელიც გამოყოფს ბიომოლეკულებს ვერტიკალურ ან ჰორიზონტალურ სიბრტყეზე პოლიმერული გელის საშუალებით. |
| განშორება | |
| კაპილარული ელექტროფორეზის დროს გამოყოფა ხდება კაპილარული მილის შიგნით. | გელის ელექტროფორეზის დროს გამოყოფა ხდება ვერტიკალურ ან ჰორიზონტალურ სიბრტყეზე. |
| გამოყოფის საშუალო | |
| თხევადი პოლიმერები, როგორიცაა ჰიდროქსიეთილცელულოზა, გამოიყენება კაპილარული ელექტროფორეზისთვის. | გელები, ან აგაროზა ან პოლიაკრილამიდი, გამოიყენება როგორც საშუალება გელის ელექტროფორეზისთვის. |
| ჯვარედინი კავშირი | |
| მაღალი გარჩევადობის მიღება შესაძლებელია კაპილარული ელექტროფორეზისგან. | გელექტროფორეზის რეზოლუცია დაბალია. |
| ზედაპირის ფართობის თანაფარდობა მოცულობასთან | |
| ზედაპირისა და მოცულობის თანაფარდობა მაღალია კაპილარული ელექტროფორეზის დროს. | ზედაპირისა და მოცულობის თანაფარდობა დაბალია გელის ელექტროფორეზის დროს. |
| გამოვლენის ტექნიკა | |
| გამოვლენა ხდება სპექტროფოტომეტრიული ავტომატური დეტექტორებით კაპილარული ელექტროფორეზის დროს. | შეღებვა და დაკვირვება ულტრაიისფერი ტრანსილუმინატორით კეთდება, როგორც გამოვლენის ტექნიკა გელის ელექტროფორეზის დროს. |
რეზიუმე - კაპილარული ელექტროფორეზი vs გელის ელექტროფორეზი
მოლეკულური დიაგნოსტიკა დიდ როლს თამაშობს სამეცნიერო სამყაროში. დნმ-ის, რნმ-ის და ცილების იდენტიფიკაცია და გაწმენდა სადიაგნოსტიკო პროცედურების კრიტიკული ეტაპია. ელექტროფორეზი არის ტექნიკა, რომელიც გამოყოფს და ახდენს ბიომოლეკულების იდენტიფიცირებას როგორც გელის ელექტროფორეზის, ასევე ბევრად მოწინავე კაპილარული გელის ელექტროფორეზის დროს. გელის ელექტროფორეზი ტარდება ვერტიკალურ ან ჰორიზონტალურ სიბრტყეში სტანდარტული ფორების ზომის პოლიმერული გელის გამოყენებით, ხოლო კაპილარული ელექტროფორეზი ტარდება კაპილარულ მილში პოლიმერული სითხით ან გელით. ეს არის განსხვავება კაპილარული ელექტროფორეზისა და გელის ელექტროფორეზის შორის. ელექტროფორეზის ტექნიკის დასრულების შემდეგ, ბიომოლეკულები შემდგომში მუშავდება უფრო მაღალი დონის ინფორმაციის მისაღებად ჰიბრიდიზაციის ან ისეთი ტექნიკის საშუალებით, როგორიცაა თითის ანაბეჭდი.
ჩამოტვირთეთ კაპილარული ელექტროფორეზის PDF ვერსია გელ ელექტროფორეზის წინააღმდეგ
შეგიძლიათ ჩამოტვირთოთ ამ სტატიის PDF ვერსია და გამოიყენოთ იგი ოფლაინ მიზნებისთვის ციტირების შენიშვნის მიხედვით. გთხოვთ გადმოწეროთ PDF ვერსია აქ განსხვავება გელის ელექტროფორეზსა და კაპილარულ ელექტროფორეზს შორის.
