ძირითადი განსხვავება - RNASE A vs RNASE H
რიბონუკლეაზები არის ნუკლეაზები, რომლებიც სპეციალურად ანადგურებენ რნმ-ს მცირე ერთეულებად. ისინი შეიძლება დაიყოს ორ კატეგორიად; ენდორიბონუკლეაზები და ეგზორიბონუკლეაზები. ენდორიბონუკლეაზა არის ენდონუკლეაზა, რომელსაც შეუძლია დაშალოს ერთჯაჭვიანი ან ორჯაჭვიანი რნმ. ის წყვეტს ფოსფოდიესტერულ კავშირებს რნმ-ის პოლინუკლეოტიდურ ჯაჭვში. მაგალითებია RNase A, RNase III, RNase T1, RNase P და RNase H. ეგზორიბონუკლეაზა არის ეგზონუკლეაზა, რომელიც ანადგურებს რნმ-ს ტერმინალური ნუკლეოტიდების ამოღებით რნმ-ის მოლეკულის მე-5 ბოლოდან ან მე-3 ბოლოდან. მაგალითებია RNase R, RNase II, RNase D და RNase PH.მთავარი განსხვავება RNASE A-სა და RNASE H-ს შორის არის ის, რომ RNase A არის პანკრეასის რიბონუკლეაზა, რომელიც სპეციალურად ანადგურებს ერთჯაჭვიან რნმ-ს უფრო მცირე კომპონენტებად, ხოლო RNase H არის არასპეციფიკური ფერმენტი, რომელიც ანაწილებს რნმ-ს რნმ-დნმ-ის ჰიბრიდში უფრო მცირე ერთეულებად. ჰიდროლიზური მექანიზმი.
რა არის RNASE A?
RNase A არის პანკრეასის რიბონუკლეაზა, რომელიც სპეციალურად წყვეტს დაუწყვილებელ ციტოზინისა და ურაცილის ნარჩენებს ერთჯაჭვიანი რნმ-ის 3' ბოლოს. RNase H მუშაობს მარილის უფრო მაღალ კონცენტრაციაზე (0.3M ან მეტი NaCl კონცენტრაცია). ჰიდროლიზური რეაქცია ორი საფეხურია. იგი ქმნის 3' ფოსფორილირებულ პროდუქტს 2', 3' ციკლური მონოფოსფატის შუალედური საშუალებით. მიუხედავად იმისა, რომ იგი სპეციფიკურია ერთჯაჭვიანი რნმ-ისთვის მარილის უფრო მაღალი კონცენტრაციით, მას ასევე შეუძლია ორჯაჭვიანი რნმ და რნმ-ის დაშლა რნმ-დნმ-ის ჰიბრიდში NaCl-ის დაბალ კონცენტრაციაზე (ნაკლები 0,3M NaCl).
ბრიუს მერიფილდმა პირველად მოახდინა ამ ფერმენტის სინთეზირება. RNase A არის ძალიან პოპულარული ფერმენტი მოლეკულურ კვლევაში.მსხვილფეხა რქოსანი პანკრეასის RNase A არის RNase A-ს მაგალითი. და ეს არის ერთ-ერთი ყველაზე მყარი ფერმენტი, რომელიც გამოიყენება ლაბორატორიაში. ამ ფერმენტს არ სჭირდება კოფაქტორი თავისი აქტივობისთვის. ეს არის ძალიან თერმოსტაბილური ფერმენტი. RNase A არის პირველი ფერმენტი და მესამე ცილა, რომლისთვისაც გამოვლინდა სწორი ამინომჟავების თანმიმდევრობა. ეს ფერმენტი ძალიან მცირეა 124 ამინომჟავით და მოლეკულური მასით 12600 da. და მას აქვს ჰისტიდინის ოთხი ნარჩენი (His 12 და His 119, რომლებიც მონაწილეობენ კატალიზურ რეაქციაში).
სურათი 01: RNase A
RNase A შეიძლება იზოლირებული იყოს ნედლი ნიმუშის ადუღებით. როდესაც ადუღდება, ყველა სხვა ფერმენტი ანადგურებს დარჩენილ RNase A-ს. RNase A არის საოცრად სტაბილური ფერმენტი. ეს ფერმენტი აინჰიბირებს რიბონუკლეაზას ინჰიბიტორ ცილას, მძიმე მეტალებს და ურიდინის ვანადატის კომპლექსებს.
რა არის RNase H?
RNase H არის არასპეციფიკური რიბონუკლეაზას ფერმენტი, რომელსაც შეუძლია რნმ-ის დაშლა რნმ-დნმ ჰიბრიდში ჰიდროლიზური რეაქციის გზით. RNase H წყვეტს რნმ-ის 3'- O-P კავშირს რნმ-დნმ ჰიბრიდში. საბოლოო ჯამში ის აწარმოებს 3'OH და 5' ფოსფატით დამთავრებულ პროდუქტებს. დნმ-ის რეპლიკაციაში ის გადამწყვეტ როლს თამაშობს რნმ პრაიმერის ამოღებით დნმ-ის ახალი ჯაჭვების წარმოქმნის შემდეგ. ლაბორატორიულ პირობებში ის კონკრეტულად ანადგურებს რნმ-ს რნმ-დნმ ჰიბრიდში, მაგრამ არა დნმ-სა და არაჰიბრიდულ რნმ-ში. და ეს ფერმენტი ჩვეულებრივ გამოიყენება რნმ-ის შაბლონის განადგურების შემდეგ cDNA-ს სინთეზის დროს პირველი დამატებითი დნმ ჯაჭვის წარმოქმნის შემდეგ.
სურათი 02: RNase H
RNase H ასევე გამოიყენება ნუკლეაზას დაცვის ანალიზებში. ის ასევე შეიძლება ჩართული იყოს mRNA-დან პოლი A კუდის ამოღებაში. RNase H-ს აქვს უნარი გაანადგუროს არაკოდიციური რნმ უჯრედის შიგნით და გარეთ.ლითონის იონები საჭიროა როგორც კოფაქტორები ამ ცილის აქტივობისთვის. ქელატორი (EDTA) შეიძლება გამოყენებულ იქნას RNase H ფერმენტის ინჰიბირებისთვის.
რა მსგავსებაა RNASE A-სა და RNASE H-ს შორის?
- ორივე ბუნებით ცილოვანია.
- ორივე ენდორიბონუკლეაზაა
- ორივეს შეუძლია რნმ-ის დაშლა.
- ორივე ახორციელებს ჰიდროლიზურ რეაქციას.
- მოლეკულური ლაბორატორიები იყენებენ ორივეს.
რა განსხვავებაა RNASE A-სა და RNASE H-ს შორის?
RNASE A vs RNASE H |
|
| RNase A არის პანკრეასის რიბონუკლეაზა, რომელიც სპეციალურად არღვევს ცალჯაჭვიანი რნმ-ის დაუწყვილებელი ციტოზინისა და ურაცილის ნარჩენების 3' ბოლოს მარილის უფრო მაღალ კონცენტრაციაზე. | RNase H არის არასპეციფიკური რიბონუკლეაზას ფერმენტი, რომელსაც შეუძლია რნმ-ის დაშლა რნმ-დნმ ჰიბრიდში ჰიდროლიზური რეაქციის გზით. |
| რნმ-ის დაშლის ბუნება | |
| RNase A სპეციალურად წყვეტს ერთჯაჭვიან რნმ-ს მარილის მაღალი კონცენტრაციით. | RNase H ყოფს რნმ-ს რნმ-დნმ-ის ჰიბრიდში. |
| აქტივობის თანაფაქტორების საჭიროება | |
| RNase A არ საჭიროებს კოფაქტორებს მისი აქტივობისთვის. | RNase H საჭიროებს მეტალის იონებს, როგორც კოფაქტორებს მისი აქტივობისთვის. |
| ცილოვანი აქტივობის ინჰიბიტორები | |
| რიბონუკლეაზას ინჰიბიტორი ცილა, მძიმე მეტალები და ურიდინის ვანადატი აინჰიბირებს რნმ-აზა A აქტივობას. | შელატორი (EDTA) აინჰიბირებს RNase H აქტივობას. |
| RNA პრაიმერის მოცილება დნმ-ის რეპლიკაციაში | |
| RNase A არ გამოიყენება რნმ პრაიმერის მოსაშორებლად დნმ-ის რეპლიკაციაში. | RNase H გამოიყენება რნმ პრაიმერის მოსაშორებლად დნმ-ის რეპლიკაციაში |
| დნმ-ის შაბლონის ამოღება დამატებითი დნმ-ის (C-DNA) სინთეზში | |
| RNase A არ გამოიყენება რნმ-ის შაბლონის მოსაშორებლად დამატებითი დნმ-ის (C-DNA) სინთეზის დროს. | RNase H გამოიყენება რნმ-ის შაბლონის მოსაშორებლად დამატებითი დნმ-ის (C-DNA) სინთეზის დროს. |
| პოლი-A-კუდის მოცილება mRNA-ში ჰიბრიდირებული ოლიგოზე (dt) | |
| RNase A არ გამოიყენება "პოლი-A კუდის" მოსაშორებლად mRNA-დან, რომელიც ჰიბრიდირებულია ოლიგოსთან (dt). | RNase H გამოიყენება "პოლი-A კუდის" მოსაშორებლად mRNA-დან, რომელიც ჰიბრიდირებულია ოლიგოსთან (dt) |
შეჯამება - RNASE A vs RNASE H
რიბონუკლეაზები არის ნუკლეაზას ფერმენტები, რომლებსაც აქვთ უნარი დაშალონ რნმ მცირე ერთეულებად. ისინი ორი ტიპისაა; ენდორიბონუკლეაზები და ეგზორიბონუკლეაზები. ენდორიბონუკლეაზა არის ენდონუკლეაზა, რომელსაც აქვს ერთჯაჭვიანი ან ორჯაჭვიანი რნმ-ის დეგრადაციის უნარი. და ის წყვეტს ფოსფოდიესტერულ კავშირს რნმ პოლინუკლეოტიდის ჯაჭვში. RNase A და RNase H არის ორი ენდორიბონუკლეაზა. RNase A არის პანკრეასის რიბონუკლეაზა, რომელიც სპეციალურად წყვეტს დაუწყვილებელ ციტოზინისა და ურაცილის ნარჩენებს ერთჯაჭვიანი რნმ-ის 3' ბოლოს მარილის მაღალი კონცენტრაციით. RNase H არის არასპეციფიკური რიბონუკლეაზას ფერმენტი, რომელსაც შეუძლია რნმ-ის დაშლა რნმ-დნმ ჰიბრიდში ჰიდროლიზური რეაქციის გზით. ეს არის განსხვავება RNase A-სა და RNase H-ს შორის.
ჩამოტვირთეთ PDF RNASE A vs RNASE H
შეგიძლიათ ჩამოტვირთოთ ამ სტატიის PDF ვერსია და გამოიყენოთ იგი ოფლაინ მიზნებისთვის ციტირების შენიშვნის მიხედვით. გთხოვთ გადმოწეროთ PDF ვერსია აქ სხვაობა RNASE A-სა და RNASE H შორის
