Elisa-სა და Elispot-ს შორის მთავარი განსხვავება ისაა, რომ Elisa არის ფერმენტთან დაკავშირებული იმუნოსორბენტი, რომელიც განსაზღვრავს სეკრეტირებული სასიგნალო ცილების მთლიან კონცენტრაციას, ხოლო Elispot არის ფერმენტთან დაკავშირებული იმუნოსორბენტული ანალიზი, რომელიც ამოიცნობს ციტოკინის სეკრეტორ ცალკეულ უჯრედებს.
Elisa და Elispot არის ორი ფერმენტთან დაკავშირებული იმუნოსორბენტი, რომელიც ფართოდ გამოიყენება მედიცინაში, მცენარეთა პათოლოგიაში, ბიოტექნოლოგიასა და სხვადასხვა ფარმაცევტულ ინდუსტრიაში. ამ ტექნიკით, ცილის ანალიტი გამოვლენილია მის წინააღმდეგ მიმართული ანტისხეულით. Elisa არის ყველაზე პოპულარული ფერმენტთან დაკავშირებული იმუნოსორბენტი, რომელიც გამოიყენება ლაბორატორიებში. მეორეს მხრივ, Elispot არის ფერმენტთან დაკავშირებული იმუნოსორბენტი, რომელიც არ გამოიყენება Elisa-ს ნაცვლად, არამედ გამოიყენება Elisa-ს დამატებით ლაბორატორიებში.
რა არის Elisa Assay?
Elisa არის ფერმენტთან დაკავშირებული იმუნოსორბენტი, რომელიც განსაზღვრავს სეკრეციული სასიგნალო ცილების მთლიან კონცენტრაციას. ეს არის ფართოდ გამოყენებული ანალიტიკური ბიოქიმიური ანალიზი, რომელიც პირველად აღწერა ენგვალმა და პერლმანმა 1971 წელს. ეს ტექნიკა იყენებს მყარი ფაზის ტიპის ფერმენტის იმუნოანალიზს თხევად ნიმუშში სპეციფიკური ცილის არსებობის დასადგენად ამ სპეციფიკური ცილის წინააღმდეგ მიმართული ანტისხეულების გამოყენებით. ეს ანალიზი არის საყოველთაოდ გამოყენებული დიაგნოსტიკური საშუალება მედიცინაში, მცენარეთა პათოლოგიასა და ბიოტექნოლოგიაში.
ELISA ტესტის მექანიზმი
ELISA ტესტის უმეტესობაში, ანტიგენის უცნობი რაოდენობა იმობილირდება მყარ საყრდენზე (მიკროლიტრიანი ფირფიტა) დასაწყისში. შემდეგ შესატყვისი პირველადი ანტისხეული გამოიყენება მყარ საყრდენ ზედაპირზე. ეს ანტისხეული ქმნის კომპლექსს ანტიგენთან (ანტიგენ-ანტისხეულის კომპლექსი). ანტიგენთან დაკავშირებული პირველადი ანტისხეული შეიძლება გამოვლინდეს მეორადი ანტისხეულით, რომელიც დაკავშირებულია ფერმენტთან ბიოკონიუგაციის გზით. Elisa ტესტის ბოლო ეტაპზე ემატება ნივთიერება, რომელიც შეიცავს ფერმენტის სუბსტრატს. თუ არსებობს პირველადი ანტისხეულის სათანადო შეკავშირება ანტიგენთან, სუბსტრატის მიერ წარმოიქმნება შესამჩნევი ფერის ცვლილება. საბოლოო ჯამში, ეს განსაზღვრავს ანტიგენს ნიმუშში.
სურათი 01: Elisa-ს სხვადასხვა ტიპები
უფრო მეტიც, არსებობს ელიზას მიმართ განსხვავებული მიდგომები, როგორიცაა პირდაპირი ელისა და არაპირდაპირი ელისა. ამჟამად, ელიზას სხვადასხვა ტესტები გამოიყენება ადამიანის პათოგენების გამოსავლენად, როგორიცაა Mycobacterium tuberculosis, როტავირუსი, B ჰეპატიტის ვირუსი, C ჰეპატიტის ვირუსი, ენტეროტოქსინის გამომწვევი E.coli, აივ და SARS-CoV-2.
რა არის Elispot Assay?
Elispot არის ფერმენტთან დაკავშირებული იმუნოსორბენტი, რომელიც აღმოაჩენს ცალკეულ ციტოკინის სეკრეტორ უჯრედებს. სესილ ჩერკინსკიმ პირველად აღწერა ELISpot 1983 წელს.ეს არის ანალიზის ტიპი, რომელიც ფოკუსირებულია ციტოკინის სეკრეციის სიხშირის რაოდენობრივად გაზომვაზე ერთი უჯრედისთვის. იგი ასევე კლასიფიცირებულია, როგორც ტექნიკა, რომელიც იყენებს ანტისხეულებს ბიოლოგიური ან ქიმიური ცილის ანალიზისთვის. Fluorospot assay არის Elispot-ის ანალიზის ვარიაცია, რომელიც იყენებს ფლუორესცენციას მრავალი ანალიზის (უფრო საიდუმლო ცილების) გასაანალიზებლად.
ელისპოტის ტესტის მექანიზმი
ამ მექანიზმში, ციტოკინის სპეციფიკური მონოკლონური ანტისხეულები თავდაპირველად ემატება მიკროლიტრიანი ფირფიტების ჭებს. შემდეგ სასურველ უჯრედებს ემატება ჭაბურღილები. მოგვიანებით ხდება უჯრედების ინკუბაცია. უჯრედის ინკუბაციის დროს უჯრედებს ეძლევათ საშუალება რეაგირება მოახდინონ ნებისმიერ სტიმულზე და გამოყოფენ ციტოკინს. ციტოკინები, რომლებიც გამოიყოფა ინკუბირებული უჯრედების მიერ, მიემაგრება ანტისხეულებს, ვინაიდან უჯრედები გარშემორტყმულია ციტოკინის სპეციფიკური მონოკლონური ანტისხეულებით.
სურათი 02: Elispot Assay
ამ ციტოკინის სპეციფიკური მონოკლონური ანტისხეულების გამოსავლენად ჭაბურღილს ემატება ბიოტინილირებული სპეციფიური გამოვლენის ანტისხეულები. ბიოტინილირებული სპეციფიური გამოვლენის ანტისხეულები იჭერენ ციტოკინის სპეციფიკურ მონოკლონურ ანტისხეულებს ჭაბურღილებში. გარდა ამისა, ჭაბურღილებს ემატება სტრეპტავიდინ-ფერმენტის კონიუგატები, რათა დაუკავშირდეს აღმოჩენის ანტისხეულებს. საბოლოო ეტაპზე, ჭებს ემატება კონკრეტული სუბსტრატები. ფერმენტების კონიუგატების და სუბსტრატების რეაქციები წარმოქმნის მკაფიო ლაქებს ჭაბურღილებში. ეს განსხვავებული ლაქები იკითხება ავტომატურ ELISpot მკითხველზე. საბოლოო ჯამში, ეს კიდევ უფრო გამოთვლის ციტოკინის სეკრეციის სიხშირეს.
რა მსგავსებაა Elisa-სა და Elispot-ს შორის?
- ისინი ორივე ფერმენტთან დაკავშირებული იმუნოსორბენტია.
- ორივე ანალიზი აღმოაჩენს სპეციფიკურ ცილის ანალიზებს.
- ეს ანალიზები იყენებენ სპეციფიკურ ანტისხეულებს ცილის ანალიზების იდენტიფიცირებისთვის.
- ორივე ანალიზი იყენებს ფერმენტებს და სუბსტრატებს.
- ისინი გამოიყენება როგორც სადიაგნოსტიკო საშუალება სამედიცინო ლაბორატორიებში.
რა განსხვავებაა ელისასა და ელისპოტს შორის?
Elisa არის ფერმენტთან დაკავშირებული იმუნოსორბენტი, რომელიც განსაზღვრავს სეკრეციული სასიგნალო ცილების მთლიან კონცენტრაციას. მეორეს მხრივ, Elispot არის ფერმენტთან დაკავშირებული იმუნოსორბენტი, რომელიც ზომავს ცალკეულ ციტოკინის სეკრეციულ უჯრედებს. ასე რომ, ეს არის მთავარი განსხვავება ელისასა და ელისპოტს შორის. უფრო მეტიც, ელიზას ტესტში ანტიგენი პირველ რიგში იმობილირდება მიკროლიტრიან ჭაბურღილზე. ამის საპირისპიროდ, ელისპოტის ტესტში, ანტისხეული პირველ რიგში იმობილირდება მიკროლიტრიან ჭაბურღილზე. ამრიგად, ეს არის კიდევ ერთი განსხვავება ელისასა და ელისპოტს შორის.
ქვემოთ მოცემული ინფოგრაფიკა წარმოადგენს ელიზასა და ელისპოტს შორის განსხვავების დეტალურ ანალიზს ცხრილის სახით.
შეჯამება - ელისა vs Elispot
Elisa და Elispot არის ორი ფერმენტთან დაკავშირებული იმუნოსორბენტი, რომელიც ფართოდ გამოიყენება მედიცინაში, მცენარეთა პათოლოგიაში, ბიოტექნოლოგიასა და სხვადასხვა ფარმაცევტულ ინდუსტრიაში. Elisa აღმოაჩენს ლიგანდის (ცილის) არსებობას თხევად ნიმუშში ანტისხეულების გამოყენებით, რომლებიც მიმართულია გასაზომი ლიგანდის წინააღმდეგ. ელისპოტის ანალიზი არის ფართოდ გამოყენებული მეთოდი იმუნური რეაქციების მონიტორინგისთვის. ის აღმოაჩენს ცალკეულ ციტოკინის გამომყოფ უჯრედებს ანტისხეულების გამოყენებით. ეს არის როგორც იმუნოანალიზის, ასევე ბიოანალიზის ტექნიკა. ამრიგად, ეს არის განსხვავების შეჯამება ელისასა და ელისპოტს შორის.
