ძირითადი განსხვავება - ნიტროცელულოზა ნეილონის მემბრანის წინააღმდეგ
ბლოტირება მნიშვნელოვანი ტექნიკაა მოლეკულურ ბიოლოგიაში დნმ-ის, რნმ-ის და ცილების სპეციფიკური თანმიმდევრობის გამოსავლენად მათი ნარევებიდან. იგი კეთდება მემბრანის გამოყენებით, რომელსაც ბლოტი ეწოდება. არსებობს სხვადასხვა ბლოტირების ტექნიკა, როგორიცაა ჩრდილოეთი, სამხრეთი და დასავლური ბლოტი. ბლოტირების პროცესისთვის სათანადო მემბრანის შერჩევა ფრთხილად უნდა მოხდეს, რათა თავიდან იქნას აცილებული არასპეციფიკური შეკვრა და არასწორი გამოვლენა. ნიტროცელულოზა, ნეილონი და PVDF ჩვეულებრივ გამოიყენება მემბრანები ბლოტირების ტექნიკაში. მათ აქვთ განსხვავებული მახასიათებლები. ნიტროცელულოზასა და ნეილონის მემბრანას შორის მთავარი განსხვავებაა ის, რომ ნიტროცელულოზის მემბრანებს აქვთ ცილის იმობილიზაციის მაღალი პოტენციალი, ხოლო ნეილონის მემბრანებს აქვთ ნუკლეინის მჟავის იმობილიზაციის მაღალი პოტენციალი.თუმცა, ორივე ტიპის მემბრანა ხშირად გამოიყენება ბლოტირების ტექნიკაში.
რა არის ნიტროცელულოზის მემბრანა?
ნიტროცელულოზის მემბრანა არის ჩვეულებრივ გამოყენებული მემბრანული ფილტრი ნუკლეინის მჟავისა და ცილის ბლოტირების ტექნიკაში. მას აქვს ცილებთან შეკავშირების მაღალი პოტენციალი. აქედან გამომდინარე, ნიტროცელულოზის მემბრანები ფართოდ გამოიყენება Western blotting ტექნიკაში. ნიტროცელულოზის მემბრანები თავსებადია ჰიბრიდიზაციის ყველა ტექნიკასთან და ავლენენ უმაღლესი შემაკავშირებელ შესაძლებლობებს ჩარევის გარეშე. ნიტროცელულოზის გარსები ბუნებრივად ჰიდროფილურია. ისინი ახდენენ ჰიდროფილურ ურთიერთქმედებას მოლეკულებთან და ეფექტურად ახდენენ მათ მემბრანაზე იმობილიზაციას. კომერციული ნიტროცელულოზის მემბრანები ხელმისაწვდომია ორი პორების ზომით: 0.45 და 0.2 მკმ.
სურათი 01: ნიტროცელულოზის მემბრანა, რომელიც გამოიყენება ვესტერნ ბლოტინგში
რა არის ნეილონის მემბრანა?
ნეილონის მემბრანა არის კომერციული მემბრანის კიდევ ერთი ტიპი, რომელიც გამოიყენება ბლოტირების ტექნიკაში. იგი ალტერნატიულად გამოიყენება ნიტროცელულოზის მემბრანებთან ერთად სამხრეთ და ჩრდილოეთ blotting. ნეილონის მემბრანები იდეალურია სამხრეთის ბლოტისთვის, ვიდრე ნიტროცელულოზა, დნმ-თან შეკავშირების მაღალი აფინურობის გამო. ნეილონის მემბრანების რამდენიმე უნიკალური მახასიათებლის გამო, მკვლევარები ჩვეულებრივ იყენებენ ნეილონის მემბრანებს სამხრეთ და ჩრდილოეთ blotting ნაცვლად ნიტროცელულოზის მემბრანაზე. ნეილონის მემბრანები ასევე რეკომენდირებულია გაშიშვლებისა და გამოსაცდელად, ნიტროცელულოზისგან განსხვავებით.
სურათი 02: ნეილონის მემბრანა, რომელიც გამოიყენება სამხრეთის ბლატისთვის
რა განსხვავებაა ნიტროცელულოზასა და ნეილონის მემბრანას შორის?
ნიტროცელულოზა ნეილონის მემბრანის წინააღმდეგ |
|
| ნიტროცელულოზის გარსები მყიფეა. | ნეილონის გარსები ნაკლებად მყიფეა. |
| გატარება | |
| მათთან გამკლავება რთულია. | მათი ადვილად უმკლავდება. |
| გადამოწმება | |
| მხარდაჭერილი ნიტროცელულოზის მემბრანები ძნელად შესამოწმებელია. | გადასინჯვა მარტივია ნეილონის მემბრანებით. |
| თავსებადობა შენახვის სხვადასხვა პირობებთან | |
| ნიტროცელულოზის მემბრანებს ნაკლები სიმტკიცე აქვთ შენახვის სხვადასხვა პირობებში. | ნეილონის მემბრანები უფრო მყარად რეაგირებენ შენახვის სხვადასხვა პირობებზე. |
| გამოიყენე | |
| საჭიროა წინასწარი დაყენება. | წინასწარი დასველება არ არის საჭირო ნეილონის მემბრანებისთვის. |
| ჰიდროფილური ბუნება | |
| ნიტროცელულოზის მემბრანები ბუნებით ჰიდროფილურია, მაგრამ ნაკლებად ჰიდროფილურია ვიდრე ნეილონის მემბრანები. | ისინი ბუნებით ძალიან ჰიდროფილურია. |
| იმობილიზაციის პოტენციალი | |
| ნიტროცელულოზის მემბრანებს ნაკლები აფინურობა აქვთ ნუკლეინის მჟავების მიმართ. მაგრამ მას აქვს მაღალი მიდრეკილება ცილებთან. | ნეილონის მემბრანებს აქვთ მაღალი შეკავშირების პოტენციალი ნუკლეინის მჟავებთან, ვიდრე ნიტროცელულოზის მემბრანები. |
რეზიუმე - ნიტროცელულოზა ნეილონის მემბრანის წინააღმდეგ
ნიტროცელულოზის და ნეილონის მემბრანები არის სპეციალური ფურცლები, რომლებიც გამოიყენება ბლოტის ტექნიკაში გელზე ზოლის ნიმუშის რეპროდუცირებისთვის.ისინი შესაძლებელს ხდის ნარევებიდან კონკრეტული თანმიმდევრობის ან ცილის გამოვლენის შესაძლებლობას მემბრანაზე მათი იმობილიზაციის გზით. მემბრანაზე მოლეკულების იმობილიზაციის შემდეგ, ის შეიძლება გამოყენებულ იქნას როგორც სუბსტრატი ჰიბრიდიზაციის ანალიზისთვის ეტიკეტირებული ზონდებით. ნიტროცელულოზის მემბრანა ჩვეულებრივ გამოიყენება პროტეინის გამოსავლენად ვესტერნ ბლოტირების ტექნიკაში ცილებთან მისი მაღალი შეკავშირების გამო. ნეილონის მემბრანები ხშირად გამოიყენება სამხრეთ და ჩრდილოეთ blotting. ეს არის განსხვავება ნიტროცელულოზასა და ნეილონის მემბრანას შორის.
