მთავარი განსხვავება pBR322-სა და pUC19-ს შორის არის ის, რომ pBR322 არის პლაზმიდური ვექტორი, რომლის სიგრძეა 4361 ბაზის წყვილი, ხოლო pUC19 არის პლაზმიდური ვექტორი, რომლის სიგრძეა 2686 ბაზის წყვილი.
კლონირების ვექტორი არის დნმ-ის პატარა ნაწილი, რომელიც შეიძლება შენარჩუნდეს ორგანიზმში სტაბილურად. ეს არის ასევე დნმ-ის პატარა ნაჭერი, რომელშიც უცხო დნმ-ის ფრაგმენტის ჩასმა შესაძლებელია კლონირების მიზნით. ვექტორი შეიცავს მნიშვნელოვან მახასიათებლებს, რომლებიც საშუალებას იძლევა უცხო დნმ-ის ფრაგმენტის მოსახერხებელი ჩასმა ვექტორებში, როგორიცაა შეზღუდვის ადგილები, არჩევადი მარკერი, რეპორტიორი გენი და ექსპრესიის ელემენტი. კლონირება პირველად განხორციელდა ე.coli. E. coli-ს კლონირების ვექტორები მოიცავს პლაზმიდებს, ბაქტერიოფაგებს, კოსმიდებს და ბაქტერიულ ხელოვნურ ქრომოსომებს (BAC). ყველაზე ხშირად გამოყენებული ვექტორები არის გენეტიკურად ინჟინერიული პლაზმიდები. pBR322 და pUC19 არის ორი ტიპის პლაზმიდური ვექტორი.
რა არის pBR322?
pBR322 არის პლაზმიდური ვექტორი. ეს არის ერთ-ერთი პირველი ფართოდ გამოყენებული კლონირების ვექტორი E. coli-სთვის. ეს ვექტორი პირველად შეიქმნა 1977 წელს ჰერბერტ ბოიერის ლაბორატორიაში კალიფორნიის უნივერსიტეტში, სან ფრანცისკოში. ეს არის წრიული ორჯაჭვიანი დნმ, რომლის სიგრძეა 4361 ბაზის წყვილი.
სურათი 01: pBR322
ამ პლაზმიდურ ვექტორს აქვს განსაკუთრებული თვისებები. ჩვეულებრივ, მას აქვს ანტიბიოტიკებისადმი რეზისტენტობის ორი გენი: გენი bla, რომელიც აკოდირებს ამპიცილინის რეზისტენტობას (AmpR) პროტეინს და გენი tetA, რომელიც აკოდირებს ტეტრაციკლინის რეზისტენტობას (TetR.) ცილა.უფრო მეტიც, ის შეიცავს pMB1-ის რეპლიკაციის საწყისს. ამ პლაზმიდურ ვექტორს ასევე აქვს rop გენი, რომელიც აკოდირებს პლაზმიდური ასლის ნომრის შემზღუდველს. გარდა ამისა, ამ ვექტორს აქვს უნიკალური შეზღუდვის ადგილი 40-ზე მეტი შეზღუდვის ფერმენტისთვის. ამ ორმოცი შეზღუდვის ადგილიდან თერთმეტი დევს TetR გენში. არსებობს ორი შეზღუდვის ადგილი შეზღუდვის ფერმენტებისთვის HindIII და ClaI TetR გენის პრომოტორში. გარდა ამისა, არსებობს ექვსი ძალიან მნიშვნელოვანი შეზღუდვის ადგილი AmpR გენში. pBR322 არის დაბალი ასლის რაოდენობის კლონირების ვექტორი. ის უზრუნველყოფს დაახლოებით 20 პლაზმიდურ ასლს თითო ბაქტერიულ უჯრედზე. ვექტორის მოლეკულური წონაა 2,83×106 დალტონი.
რა არის pUC19?
pUC19 არის პლაზმიდური ვექტორი, რომლის სიგრძეა 2686 ბაზის წყვილი. ეს არის იოაჰიმ მესინგისა და თანამშრომლების მიერ შექმნილი პლაზმიდური ვექტორების ერთ-ერთი სერია. ამ პლაზმიდების სერიაზე ადრეული სამუშაოები ჩატარდა კალიფორნიის უნივერსიტეტში. ეს არის წრიული ორჯაჭვიანი დნმ.
სურათი 02: pUC19
ეს პლაზმიდური ვექტორი ასევე შეიცავს მნიშვნელოვან მახასიათებლებს. მას აქვს β გლაქტოზიდაზას (lacz) გენის N ტერმინალური ფრაგმენტი. მას ასევე აქვს მრავალი კლონირების ადგილი (MCS). ეს რეგიონი იყოფა lacz გენის მე-6 და მე-7 კოდონებად. MCS რეგიონი უზრუნველყოფს ბევრ შეზღუდვის ენდონუკლეაზას შეზღუდვის ადგილს. β გლაქტოზიდაზას გენის გარდა, pUC19 ასევე კოდირებს ამპიცილინის რეზისტენტობის გენს (AmpR). უფრო მეტიც, რეპლიკაციის წარმოშობა მომდინარეობს პლაზმიდ pMB1-დან. მიუხედავად იმისა, რომ pUC19 მცირე ზომისაა, მას აქვს ასლების მაღალი რაოდენობა (500-700 ასლი ბაქტერიულ უჯრედზე). ამ პლაზმიდური ვექტორის მოლეკულური წონაა 1,75×106 დალტონი.
რა მსგავსებაა pBR322-სა და pUC19-ს შორის?
- pBR322 და pUC19 არის ორი ტიპის პლაზმიდური ვექტორი.
- ისინი პოპულარული კლონირების ვექტორებია კოლისთვის.
- ორივე პლაზმიდურ ვექტორს აქვს პლაზმიდის pMB1-ის რეპლიკაციის ერთი და იგივე საწყისი ფორმა.
- ამ ვექტორებს აქვთ მრავალი შეზღუდვის ადგილი.
- ორივე პლაზმიდურ ვექტორს აქვს ამპიცილინის რეზისტენტობის გენი, როგორც შესარჩევი მარკერი.
რა განსხვავებაა pBR322-სა და pUC19-ს შორის?
pBR322 არის პლაზმიდური ვექტორი, რომლის სიგრძეა 4361 ბაზის წყვილი, ხოლო pUC19 არის პლაზმიდური ვექტორი, რომლის სიგრძეა 2686 ბაზის წყვილი. ამრიგად, ეს არის მთავარი განსხვავება pBR322-სა და pUC19-ს შორის. გარდა ამისა, pBR322 არის დაბალი ასლის რაოდენობის პლაზმიდური ვექტორი, ხოლო pUC19 არის მაღალი ასლის რაოდენობის პლაზმიდური ვექტორი.
ქვემოთ მოცემული ინფოგრაფიკა წარმოგიდგენთ განსხვავებებს pBR322-სა და pUC19-ს შორის ცხრილის სახით გვერდიგვერდ შედარებისთვის.
რეზიუმე – pBR322 vs pUC19
ყველაზე ხშირად გამოყენებული კლონირების ვექტორები E.coli-სთვის არის გენეტიკურად ინჟინერიული პლაზმიდები.pBR322 და pUC19 არის ორი ტიპის პლაზმიდური ვექტორი. pBR322 არის პლაზმიდური ვექტორი, რომლის სიგრძეა 4361 ბაზის წყვილი, ხოლო pUC19 არის პლაზმიდური ვექტორი, რომლის სიგრძეა 2686 ბაზის წყვილი. ასე რომ, ეს არის მთავარი განსხვავება pBR322-სა და pUC19-ს შორის.
