ძირითადი განსხვავება – CFU vs MPN
კოლონიის ფორმირების ერთეული (CFU) და ყველაზე სავარაუდო რიცხვი (MPN) არის ორი მეთოდი, რომელიც გამოიყენება ნიმუშებში მიკროორგანიზმების დასათვლელად. ორივე პარამეტრი გამოიყენება წყლის ხარისხისა და ფეკალური ინდიკატორი ბაქტერიების გამოსავლენად წყლის ნიმუშებში. კოლონიის ფორმირების ერთეული არის საზომი, რომელიც გამოიყენება სიცოცხლისუნარიანი ბაქტერიული უჯრედების ან სოკოვანი უჯრედების რაოდენობის დასადგენად მოცემული ნიმუშის სპეციფიკურ მოცულობაში ან წონაში. ამ პარამეტრის სტანდარტული ერთეულია CFU/ml ან CFU/g. ყველაზე სავარაუდო რიცხვი არის კიდევ ერთი ერთეული, რომელიც გამოიყენება თხევადი ნიმუშის სიცოცხლისუნარიანი ბაქტერიული უჯრედების რაოდენობის გასაზომად. CFU-სა და MPN-ს შორის მთავარი განსხვავებაა ის, რომ CFU გამოითვლება ბაქტერიული და სოკოვანი კოლონიებიდან, რომლებიც იზრდება მყარ აგარის ფირფიტაზე, ხოლო MPN გამოითვლება სიცოცხლისუნარიანი ბაქტერიებისგან, რომლებიც იზრდება თხევად გარემოში.
რა არის CFU?
კოლონიის ფორმირების ერთეული (CFU) არის პარამეტრი, რომელიც ზომავს სიცოცხლისუნარიანი ბაქტერიული ან სოკოვანი უჯრედების რაოდენობას მოცემულ ნიმუშში. მეთოდი, რომელიც ითვლის კოლონიების ფორმირების ერთეულებს, მოიხსენიება, როგორც სტანდარტული ფირფიტების რაოდენობა. სიცოცხლისუნარიანი კოლონიები, რომლებიც ჩნდება აგარის ფირფიტებზე, გამოხატულია როგორც CFU 1 მლ (კოლონიის წარმომქმნელი ერთეული თითო მილილიტრზე) ნიმუშისთვის სითხეებისთვის ან CFU 1 გ (კოლონიის ფორმირების ერთეული ერთ გრამზე) ნიმუშის მყარი ნივთიერებებისთვის.
არსებობს ორი გავრცელებული მეთოდი, რომელიც გამოიყენება ნიმუშში CFU-ს გასაზომად. ისინი გავრცელდა ფირფიტის მეთოდით და დაასხით ფირფიტის მეთოდით. ეს ორი მეთოდი მხარდაჭერილია ტექნიკით, რომელსაც ეწოდება სერიული განზავება. სერიულად განზავებული ნიმუშები იძლევა აგარის ზედაპირზე კოლონიების დათვლადი რაოდენობის მიღებას. ნიმუშის ცნობილი მოცულობა შეიძლება გავრცელდეს აგარის ფირფიტის ზედაპირზე, ან შეურიოთ აგარს და დაასხით თეფშზე. შემდეგ ფირფიტა ინკუბირებულია და წარმოქმნილი კოლონიების დათვლა ხდება. კოლონიების რაოდენობა დაკავშირებულია ორიგინალური ნიმუშის მიკროორგანიზმების რაოდენობასთან.ფირფიტები, რომლებიც აჩვენებს ძალიან ბევრ კოლონიას ან ძალიან ცოტა კოლონიას, გამორიცხულია დათვლა, რადგან შედეგები შეიძლება სტატისტიკურად არ იყოს ზუსტი ამ ფირფიტებზე. სტატისტიკურად, საუკეთესო დიაპაზონი არის 30-300 კოლონია აგარის ფირფიტაზე. აქედან გამომდინარე, სწორი ფირფიტები უნდა შეირჩეს ზუსტი აღრიცხვისთვის. ზემოაღნიშნული ფუნქციისთვის შესრულებულია სერიული განზავება.
როგორც კი ითვლით სიცოცხლისუნარიან კოლონიების რაოდენობას ფირფიტებზე, CFU/ml შეიძლება გამოითვალოს შემდეგი განტოლების გამოყენებით.
CFU ორიგინალური ნიმუშის მლ-ზე=კოლონიების რაოდენობა ფირფიტაზე X განზავების ფაქტორი
განზავების ფაქტორი=(1/ ფირფიტის განზავება)
მაგალითად, თუ თქვენ მიიღებთ 149 კოლონიას 10-4 განზავების ფირფიტაზე, მაშინ ბაქტერიების რაოდენობა ორიგინალური ნიმუშის 1 მლ-ში შეიძლება გამოითვალოს შემდეგნაირად.:
CFU/მლ=(149) x (1/10-4)
=149 × 104 ან 1490000
=1. 49 x 106
სურათი 01: კოლონიის ფორმირების ერთეული
რა არის MPN?
ყველაზე სავარაუდო რიცხვი არის CFU/ml-ის ალტერნატიული საზომი. MPN ასევე აფასებს სიცოცხლისუნარიან უჯრედებს თხევადი ნიმუშში. ის ითვლის თხევად კულტურაში მზარდ ორგანიზმებს და არის უპირატესად ბაქტერიოლოგიური ტექნიკა. ეს მეთოდი განსაკუთრებით სასარგებლოა ნიმუშებისთვის, რომლებიც შეიცავს ბაქტერიული უჯრედების დაბალ კონცენტრაციას; მაგალითად, რძე, სასმელი წყალი და ა.შ. MPN მნიშვნელობა გამოხატულია 100 მლ მოცულობისთვის. MPN ეყრდნობა სტატისტიკურ მეთოდს, რომელიც დაფუძნებულია ალბათობის თეორიაზე. არსებობს სტატისტიკური ცხრილები, რომლებიც შექმნილია MPN მნიშვნელობების მოსაძებნად 100 მლ ნიმუშის მიხედვით. ეს ცხრილები აჩვენებს შედეგებს 95% ნდობის ლიმიტებზე.
MPN მნიშვნელობა გამოითვლება ტექნიკის შესრულების შემდეგ, რომელსაც ეწოდება მრავალი მილის დუღილის მეთოდი. მილების სამი კომპლექტი, რომლებიც შეიცავს შესაფერის კულტურას, ინოკულირებულია ნიმუშის სამი განსხვავებული მოცულობით, როგორიცაა 10 მლ, 1 მლ და 0.1 მლ და ინკუბირებული ზრდისთვის. ინკუბაციური პერიოდის შემდეგ მილები ფასდება + (დადებითი) ან - (უარყოფითი) ზრდის არსებობის ან არარსებობისთვის. შემდეგ დადებითი და უარყოფითი შედეგების ნიმუში შედარებულია სტატისტიკური ალბათობების MPN ცხრილთან მიკროორგანიზმების რაოდენობის შესაფასებლად. შემდეგ MPN მნიშვნელობა მოცემულია 100 მლ ნიმუშისთვის. MPN ფართოდ გამოიყენება წყლის ნიმუშებში არსებული კოლიფორმული ბაქტერიების გამოსავლენად.
სურათი 02: MPN ცხრილი
რა განსხვავებაა CFU-სა და MPN-ს შორის?
CFU vs MPN |
|
| CFU არის საზომი, რომელიც გამოიყენება მოცემულ ნიმუშში სიცოცხლისუნარიანი ბაქტერიების ან სოკოების კოლონიების რაოდენობის გამოსასახად. | MPN არის CFU-ის ალტერნატიული საზომი და ზომავს სიცოცხლისუნარიანი ბაქტერიული უჯრედების რაოდენობას თხევად ნიმუშში. |
| ერთეული | |
| CFU/ml ან CFU/g | MPN/100 მლ |
| გაანგარიშება | |
| CFU გამოითვლება აგარის ფირფიტებზე გაზრდილი კოლონიების რაოდენობის დათვლით. | MPN გამოითვლება მილების დადებითი და უარყოფითი შაბლონების MPN სტატისტიკურ ცხრილთან შედარებით. |
| სერიული განზავების ტექნიკა | |
| სერიული განზავება ტარდება ნიმუშების აგარის ფირფიტებზე მოთავსებამდე. | სერიული განზავება ჩვეულებრივ არ ხორციელდება MPN-ის გამოთვლისას |
| მეთოდები | |
| გაშლილი ფირფიტის მეთოდი და დაასხით ფირფიტის მეთოდი არის ორი ტიპის მეთოდი, რომელიც გამოიყენება CFU-ს მისაღებად. | მრავალჯერადი მილის დუღილი არის მეთოდი, რომელიც ხორციელდება MPN მნიშვნელობის მისაღებად. |
შეჯამება – CFU vs MPN
მიკრობული ზრდის გაზომვა საჭიროა მრავალი მიზეზის გამო. საკვების გადამამუშავებელ ქარხნებში აუცილებელია საკვებში მიკროორგანიზმების დონისა და ტიპის გაზომვა. კვების მრეწველობასა და მედიცინაში აუცილებელია სტერილიზაციის პროცედურების ეფექტურად გამოყენება. კანალიზაციის გამწმენდ ნაგებობებში საჭიროა მიკრობების რეგულარულად დათვლა. მოლეკულურ ბიოლოგიაში პროცედურის ოპტიმიზაციისას საჭიროა ფირფიტებზე კოლონიების რაოდენობის გაზომვა. აქედან გამომდინარე, არსებობს სხვადასხვა ჩამოთვლისა და ზრდის გაზომვის მეთოდები. CFU და MPN არის ორი ასეთი მეთოდი, რომელიც ფართოდ გამოიყენება სხვადასხვა სფეროში. CFU არის მოცემულ ნიმუშში არსებული სიცოცხლისუნარიანი ბაქტერიული და სოკოვანი კოლონიების რაოდენობის საზომი. იგი გამოითვლება სტანდარტული ფირფიტების დათვლის მეთოდის ან სიცოცხლისუნარიანი ფირფიტების დათვლის მეთოდის გამოყენებით. MPN არის კიდევ ერთი საზომი, რომელიც გამოხატავს ბაქტერიული უჯრედების რაოდენობას თხევადი ნიმუშის მოცემულ მოცულობაში.იგი გამოითვლება მრავალი მილის დუღილის მეთოდისა და MPN ცხრილის გამოყენებით. ეს არის განსხვავება CFU-სა და MPN-ს შორის.
ჩამოტვირთეთ CFU-ის PDF ვერსია MPN-ის წინააღმდეგ
შეგიძლიათ ჩამოტვირთოთ ამ სტატიის PDF ვერსია და გამოიყენოთ იგი ოფლაინ მიზნებისთვის ციტირების შენიშვნების მიხედვით. გთხოვთ ჩამოტვირთოთ PDF ვერსია აქ სხვაობა CFU-სა და MPN-ს შორის.
