ძირითადი განსხვავება – RPMI vs DMEM
კვლევითი კვლევების უმეტესობა მოიცავს ცხოველთა უჯრედების კულტივირებას და, შესაბამისად, ეს კვლევები საჭიროებს ცხოველთა უჯრედების ხაზების შენარჩუნებას სპეციალური ზრდის პირობებში. ცხოველური უჯრედების კულტივირება ფართოდ ხორციელდება ფარმაკოლოგიურ კვლევებში წამლების მეტაბოლიზმის იდენტიფიცირებისთვის, დაავადების დიაგნოსტიკაში და კიბოს კვლევაში. უჯრედის კულტურის მედია არის ცხოველური უჯრედების კულტურის მნიშვნელოვანი ასპექტი. Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) და Roswell Park Memorial Institute Medium (RPMI) არის ორი კულტურის მედია, რომელიც გამოიყენება ცხოველთა უჯრედების კულტივირებაში. RPMI არის საშუალება, რომელიც ფართოდ გამოიყენება ძუძუმწოვრების უჯრედების დასამუშავებლად სუსპენზიურ კულტურაში. DMEM არის ბაზალური გარემოს მოდიფიცირებული ტიპი, ამინომჟავისა და ვიტამინის კონცენტრაციით ოთხჯერ გაზრდილი. DMEM გამოიყენება უჯრედების კულტივირებისთვის ადჰერენტულ კულტურებში. ამ ორ მედიას შორის მთავარი განსხვავებაა მედიის კულტურის ტიპი. RPMI გამოიყენება სუსპენზიის კულტურებზე, ხოლო DMEM გამოიყენება ადჰენირებული უჯრედების დასამუშავებლად.
რა არის RPMI?
RPMI ან Roswell Park Memorial Institute Medium ასევე მოიხსენიება, როგორც RPMI 1640. მედიის სახელწოდება მომდინარეობს ინსტიტუტის მიერ, რომელშიც მედია აღმოაჩინეს. ეს მედია ჩვეულებრივ გამოიყენება ცხოველთა უჯრედების კულტურაში, განსაკუთრებით ძუძუმწოვრების უჯრედების ზრდისთვის. ისინი თავდაპირველად შეიქმნა ადამიანის ლიმფოციტების გასაშენებლად.
შემდეგი ინგრედიენტები შედის RPMI-ში.
- გლუკოზა
- pH მაჩვენებელი (ფენოლის წითელი)\
- მარილები (ნატრიუმის ქლორიდი, ნატრიუმის ბიკარბონატი, დინატრიუმის ფოსფატი, კალიუმის ქლორიდი, მაგნიუმის სულფატი და კალციუმის ნიტრატი)
- ამინომჟავები
- ვიტამინები (ი-ინოზიტოლი, ქოლინის ქლორიდი, პარაამინობენზოის მჟავა, ფოლიუმის მჟავა, ნიკოტინამიდი, პირიდოქსინის ჰიდროქლორიდი, თიამინის ჰიდროქლორიდი, კალციუმის პანტოტენატი, ბიოტინი და რიბოფლავინი, ციანოკობალამინი)
RPMI-ის განსაკუთრებული მახასიათებელია გარემოში ფოსფატის გაზრდილი კონცენტრაცია. RPMI გამოიყენება 5% ნახშირორჟანგის ატმოსფეროში. ეს უზრუნველყოფს უჯრედების ზრდის მაქსიმალურ და ოპტიმალურ პირობებს. ბიკარბონატის ბუფერული სისტემით მედიის pH შენარჩუნებულია 8.0-ზე.
სურათი 01: უჯრედების კულტურა პეტრის ჭურჭელზე
RPMI-ს გამოყენება უჯრედების კულტივირებაში
- ადამიანის T და B ლიმფოციტების, ძვლის ტვინის უჯრედების და ჰიბრიდომის კულტივაცია.
- გამოიყენება ადამიანის სიმსივნური უჯრედების შესასწავლად.
რა არის DMEM?
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) არის შეცვლილი საშუალება, რომელიც მზადდება კომერციულად. საშუალო ფხვნილის ორიგინალური ტექსტურა ყვითელია. DMEM-ში ვიტამინის კონცენტრაცია იზრდება ოთხჯერ, რითაც იზრდება საკვები ნივთიერებების შემცველობა გარემოში.
DMEM ასევე შეცვლილია მეტი მარილის დამატებით, როგორიცაა რკინის ნიტრატი, ნატრიუმის პირუვატი და ზოგიერთი არაარსებითი ამინომჟავა, როგორიცაა სერინი და გლიცინი. ასევე იცვლება გლუკოზის ფორმულირება მედიაში. ორიგინალური ფორმულირება შედგება 1000 მგ/ლ გლუკოზისგან, ხოლო DMEM-ში კონცენტრაცია გაიზარდა 4500 მგ/ლ-მდე. DMEM ასევე მოითხოვს შრატის საშუალების დამატებას, რადგან ის არ არის სრული საშუალება. ყველაზე ხშირად, DMEM-ს ავსებენ ნაყოფის მსხვილფეხა რქოსანი შრატით (FBS). FBS უზრუნველყოფს საჭირო ცილებს და ზრდის ფაქტორებს კულტივირების პროცესისთვის.
საშუალების pH იცვლება ნატრიუმის ბიკარბონატის დამატებისას. ნატრიუმის ბიკარბონატის დამატებამდე გარემოს pH არის დაახლოებით 6.80 – 7.40, ხოლო pH ნატრიუმის ბიკარბონატის დამატების შემდეგ არის 7.60 – 8.20 დიაპაზონში. საშუალო შენახვის ტემპერატურაა 2 – 8 0C.
სურათი 02: DMEM
DMEM-ის აპლიკაციები
- თაგვის ემბრიონულ უჯრედებში პოლიომავირუსის დაფების წარმოქმნის უნარის შესასწავლად.
- კონტაქტური ინჰიბიციის კვლევებში.
- ქათმის უჯრედების კულტურების კვლევასა და ანალიზში.
რა მსგავსებაა RPMI-სა და DMEM-ს შორის?
- როგორც RPMI და DMEM გამოიყენება ცხოველთა უჯრედების კულტურაში.
- ორივე RPMI და DMEM მედია არის თხევადი ფორმულირებები.
- როგორც RPMI და DMEM მედია შეიცავს აუცილებელ ამინომჟავებს, ვიტამინებს და არაორგანულ მარილებს, რომლებიც აუცილებელია ზრდისთვის.
- როგორც RPMI და DMEM მედია არასრულია. ამიტომ შრატი უნდა დაემატოს.
- როგორც RPMI და DMEM მედია იყენებს გლუკოზას ნახშირბადის წყაროდ.
- როგორც RPMI და DMEM მედიას აქვთ უფრო მაღალი pH.
რა განსხვავებაა RPMI-სა და DMEM-ს შორის?
RPMI vs DMEM |
|
| RPMI არის გარემო, რომელიც ფართოდ გამოიყენება ძუძუმწოვრების უჯრედების დასამუშავებლად სუსპენზიურ კულტურაში. | DMEM არის ბაზალური გარემოს მოდიფიცირებული ტიპი გაზრდილი ამინომჟავისა და ვიტამინის კონცენტრაციით. |
| დამატებითი ფოსფატების არსებობა | |
| პრეზენტაცია RPMI-ში. | არ არის DMEM-ში. |
| გამოიყენეთ | |
|
გამოიყენება უჯრედების გასაშენებლად ადჰენტურ კულტურებში. იგი გამოიყენება,
|
| კულტურების ტიპები | |
| RPMI გამოიყენება სუსპენზიის კულტურებისთვის. | DMEM გამოიყენება კულტურებისთვის, რომლებსაც უჯრედები აქვთ მიმაგრებული. |
შეჯამება – RPMI vs DMEM
როგორც RPMI, ასევე DMEM ფართოდ გამოიყენება ცხოველთა უჯრედების კულტივირებაში, განსაკუთრებით ცხოველური უჯრედების ხაზების დასამუშავებლად, ლიმფოციტების ჩათვლით in vitro. DMEM არის მოდიფიცირებული ბაზალური გარემო, სადაც არის გაზრდილი საკვები ნივთიერებების კონცენტრაცია. RPMI შემუშავებული Roswell Park Memorial Institute-ის მიერ და ის ასევე არის საშუალება, რომელიც გამოიყენება ცხოველთა უჯრედების კულტივირებაში, განსაკუთრებით ძუძუმწოვრების ლიმფოციტებისთვის.ორივე მედია კომერციულად ხელმისაწვდომია. ეს არის განსხვავება RPMI-სა და DMEM-ს შორის.
