აფინურობასა და იონგაცვლის ქრომატოგრაფიას შორის მთავარი განსხვავება ისაა, რომ ჩვენ შეგვიძლია გამოვიყენოთ აფინურობის ქრომატოგრაფია ნარევში დამუხტული ან დაუმუხტი კომპონენტების გამოსაყოფად, მაშინ როდესაც შეგვიძლია გამოვიყენოთ იონგაცვლის ქრომატოგრაფია ნარევში დამუხტული კომპონენტების გამოსაყოფად.
ქრომატოგრაფია არის ტექნიკა, რომელიც შეგვიძლია გამოვიყენოთ ნარევში სასურველი კომპონენტების გამოსაყოფად. არსებობს სხვადასხვა ტიპები, როგორიცაა თხევადი ქრომატოგრაფია, გაზის ქრომატოგრაფია და ა.შ. აფინური ქრომატოგრაფია და იონგაცვლის ქრომატოგრაფია არის თხევადი ქრომატოგრაფიის ორი ქვეკატეგორია. ასევე, ამ ტექნიკაში არის ორი ეტაპი. კერძოდ, ეს არის სტაციონარული და მობილური ფაზა.ამ ტექნიკის მიზანია კომპონენტების გამოყოფა, კომპონენტების შეკვრის მიხედვით, მოძრავ ფაზაში სტაციონარული ფაზის ზედაპირზე.
რა არის აფინური ქრომატოგრაფია?
აფინური ქრომატოგრაფია არის ბიოქიმიური ტექნიკა, რომელსაც ვიყენებთ კომპონენტების გამოყოფისთვის ნარევში, ამ კომპონენტებს შორის ურთიერთქმედების მიხედვით.
ურთიერთქმედებები, რომლებსაც ამ შემთხვევაში ვიყენებთ, მოიცავს შემდეგს:
- ანტიგენ-ანტისხეულის ურთიერთქმედება
- ფერმენტ-სუბსტრატის ურთიერთქმედება
- რეცეპტორ-ლიგანდის ურთიერთქმედება
- ცილა-ნუკლეინის მჟავის ურთიერთქმედება
ამ ტექნიკაში ჩვენ ვიყენებთ მოლეკულების მოლეკულურ თვისებებს ამ გამოყოფის ტექნიკისთვის. აქ ჩვენ ვაძლევთ სასურველ ნაერთს სტაციონარულ ფაზასთან ურთიერთქმედების საშუალებას წყალბადის კავშირის, იონური ურთიერთქმედების, დისულფიდური ხიდების, ჰიდროფობიური ურთიერთქმედების და ა.შ.მოლეკულები, რომლებიც არ ურთიერთქმედებენ სტაციონარულ ფაზასთან, პირველ რიგში გამოირეცხებიან. ამრიგად, ჩვენ შეგვიძლია გამოვყოთ იგი ნარევიდან. სასურველი ნაერთი დარჩება მიმაგრებული სტაციონარულ ფაზაზე. აქედან გამომდინარე, ჩვენ შეგვიძლია გამოვყოთ იგი გამხსნელი გამხსნელის გამოყენებით და გამოვყოთ ის, რომ ასევე გამოვყოთ.
სურათი 01: ქრომატოგრაფიული სვეტი
აფინური ქრომატოგრაფია სასარგებლოა ნარევიდან ნივთიერების გასაწმენდად და კონცენტრირებისთვის ბუფერული ხსნარის გამოყენებით. ასევე, ის სასარგებლოა ნარევში არასასურველი ნივთიერებების შესამცირებლად. როდესაც განვიხილავთ აპარატს, რომელსაც ვიყენებთ ამ პროცესისთვის, უნდა გამოვიყენოთ ჩვენი სტაციონარული ფაზით სავსე სვეტი. შემდეგ, ჩვენ უნდა ჩავტვირთოთ მობილური ფაზა, რომელიც შეიცავს ბიომოლეკულებს, რომელთა გამოყოფასაც ვაპირებთ.შემდეგი, მიეცით საშუალება მათ დაუკავშირდნენ სტაციონარულ ფაზას. ამის შემდეგ, სარეცხი ბუფერის გამოყენებით, ჩვენ შეგვიძლია გამოვყოთ არასამიზნე ბიომოლეკულები, მაგრამ სამიზნე მოლეკულებს უნდა ჰქონდეთ მაღალი მიდრეკილება სტაციონარულ ფაზასთან, რათა განცალკევება წარმატებით განხორციელდეს.
რა არის იონის გაცვლის ქრომატოგრაფია?
იონური ქრომატოგრაფია არის თხევადი ქრომატოგრაფიის ფორმა, რომელშიც შეგვიძლია გავაანალიზოთ იონური ნივთიერებები. ხშირად მას ვიყენებთ არაორგანული ანიონებისა და კატიონების (ანუ ქლორიდისა და ნიტრატის ანიონებისა და კალიუმის, ნატრიუმის კათიონების) გასაანალიზებლად. თუმცა ნაკლებად გავრცელებულია, ჩვენ შეგვიძლია გავაანალიზოთ ორგანული იონებიც. უფრო მეტიც, ჩვენ შეგვიძლია გამოვიყენოთ ეს ტექნიკა ცილების გასაწმენდად, რადგან ცილები არიან დამუხტული მოლეკულები გარკვეული pH მნიშვნელობებით. აქ ჩვენ ვიყენებთ მყარ სტაციონალურ ფაზას, რომელსაც შეუძლია დამუხტული ნაწილაკები მიმაგრდეს. მაგალითად, ჩვენ შეგვიძლია გამოვიყენოთ ფისოვანი პოლისტიროლის-დივინილბენზოლის კოპოლიმერები, როგორც მყარი საყრდენი.
სურათი 02: იონგაცვლის ქრომატოგრაფიის ფაზები
ამის შემდგომი ასახსნელად, სტაციონარულ ფაზას აქვს ფიქსირებული იონები, როგორიცაა სულფატური ანიონები ან მეოთხეული ამინის კათიონები. თითოეულ მათგანს უნდა უკავშირდებოდეს კონტრაიონი (იონი საპირისპირო მუხტით), თუ ჩვენ გვინდა ამ სისტემის ნეიტრალიტეტის შენარჩუნება. ამ შემთხვევაში, თუ კონტრაიონი არის კატიონი, მაშინ სისტემას ვუწოდებთ კატიონგამცვლელ ფისს. მაგრამ, თუ კონტრ-იონი არის ანიონი, სისტემა არის ანიონგაცვლის ფისოვანი.
იონგაცვლის პროცესში ხუთი ძირითადი ფაზაა;
- საწყისი ეტაპი
- მიზნის ადსორბცია
- ელუციის დაწყება
- ელუციის დასასრული
- რეგენერაცია
რა განსხვავებაა აფინურობასა და იონგაცვლის ქრომატოგრაფიას შორის?
აფინური ქრომატოგრაფია არის ბიოქიმიური ტექნიკა, რომელსაც ვიყენებთ კომპონენტების განცალკევებისთვის ნარევში, ამ კომპონენტებს შორის ურთიერთქმედების მიხედვით, ხოლო იონური ქრომატოგრაფია არის თხევადი ქრომატოგრაფია, რომელშიც შეგვიძლია გავაანალიზოთ იონური ნივთიერებები. მაშასადამე, აფინურობასა და იონგაცვლის ქრომატოგრაფიას შორის მთავარი განსხვავებაა ის, რომ ჩვენ შეგვიძლია გამოვიყენოთ იონური გაცვლის ქრომატოგრაფია მხოლოდ იონური ნივთიერებების განცალკევებისთვის, ხოლო აფინურ ქრომატოგრაფიას შეუძლია გამოყოს როგორც დამუხტული, ისე დაუმუხტი ნაწილაკები. მუშაობის პრინციპის განხილვისას, განსხვავება აფინურობასა და იონგაცვლის ქრომატოგრაფიას შორის არის ის, რომ აფინური ქრომატოგრაფია მიმდინარეობს იმის გამო, რომ სამიზნე მოლეკულებს აქვთ მაღალი მიდრეკილება სტაციონარული ფაზის მიმართ. თუმცა, იონგაცვლის ქრომატოგრაფიისთვის სამიზნე მოლეკულებს აქვთ სტაციონარული ფაზის ზედაპირის საპირისპირო მუხტი.
ქვემოთ მოცემული ინფოგრაფიკა წარმოგიდგენთ განსხვავებას აფინურობასა და იონგაცვლის ქრომატოგრაფიას შორის, როგორც გვერდიგვერდ შედარება.
შეჯამება – აფინურობა იონის გაცვლის ქრომატოგრაფია
შეჯამებით, აფინურობა და იონგაცვლის ქრომატოგრაფია თხევადი ქრომატოგრაფიული ტექნიკის ორი ფორმაა. აფინურობასა და იონგაცვლის ქრომატოგრაფიას შორის მთავარი განსხვავება ისაა, რომ ჩვენ შეგვიძლია გამოვიყენოთ აფინურობის ქრომატოგრაფია ნარევში დამუხტული ან დაუხტვილი კომპონენტების გამოსაყოფად, მაშინ როდესაც შეგვიძლია გამოვიყენოთ იონგაცვლის ქრომატოგრაფია ნარევში დამუხტული კომპონენტების გამოსაყოფად.
