ბრედფორდის და დაბალი პროტეინის ანალიზს შორის მთავარი განსხვავებაა ის, რომ ბრედფორდის ცილის ანალიზი ეფუძნება Coomassie ბრწყინვალე ლურჯი G-250 საღებავის შთანთქმის ცვლილებას, ხოლო Lowry ცილის ანალიზი ეფუძნება სპილენძის იონების (Cu+) იონების რეაქციას. წარმოიქმნება პეპტიდური ბმების დაჟანგვის შედეგად Folin-Cioc alteu რეაგენტით.
ანალიზი არის ანალიტიკური ტექნიკა, რომელიც ეხმარება ნიმუშის ძირითადი ფუნქციური კომპონენტების დახასიათებას. აქედან გამომდინარე, ანალიზი შეიძლება იყოს ხარისხობრივი ან რაოდენობრივი ტესტი. მრავალი დარგი, მათ შორის ლაბორატორიული მედიცინა, ფარმაკოლოგია, გარემოს ბიოლოგია, მოლეკულური ბიოლოგია, ბიოქიმია და იმუნოლოგია, რეგულარულად იყენებს ამ სახის ანალიზს.ბრედფორდის და ლოურის პროტეინის ანალიზი არის ორი ბიოქიმიური ანალიზი, რომელიც განსაზღვრავს ცილის კონცენტრაციას ნიმუშის ხსნარში. ორივე ანალიზი იყენებს კოლორიმეტრულ ტექნიკას შედეგების მისაღებად.
რა არის ბრედფორდის პროტეინის ანალიზი?
ბრედფორდის ცილის ანალიზი არის სწრაფი სპექტროსკოპიული ანალიტიკური პროცედურა ცილების ანალიზისთვის. იგი აჩვენებს მაღალ სიზუსტეს ხსნარში ცილის კონცენტრაციის გაზომვისას. მარიონ ბრედფორდმა ეს პროცედურა შემოიტანა 1976 წელს. ამ ანალიზში მთლიანი რეაქცია ეფუძნება გაზომილი ცილების ამინომჟავის შემადგენლობას. სხვა თვალსაზრისით, ბრედფორდის ცილის ანალიზი არის კოლორიმეტრული ანალიზი. იგი იყენებს საღებავს Coomassie ბრწყინვალე ლურჯი. აქედან გამომდინარე, ცილის ეს კოლორიმეტრიული ანალიზი დამოკიდებულია საღებავის შთანთქმის ცვლილებაზე. Coomassie brilliant blue G-250 არსებობს სამ ფორმატში: კატიონური (წითელი), ანიონური (ლურჯი) და ნეიტრალური (მწვანე). მჟავე პირობებში, საღებავის წითელი ფორმა გარდაიქმნება ლურჯად. ის ადასტურებს ცილის შეკავშირებას. თუ ცილა არ არის, ხსნარი შეიძლება დარჩეს ყავისფერ ფერში.
სურათი 01: ბრედფორდის ცილის ანალიზი
ბრედფორდის ცილის ანალიზი განსხვავდება სხვა ცილის ანალიზისგან, რადგან ის ნაკლებად მგრძნობიარეა ცილის ხსნარში არსებული სხვადასხვა ქიმიური ნაერთების ჩარევის მიმართ. ეს ნაერთებია ნატრიუმი, კალიუმი, გლუკოზა და საქაროზა და ა.შ.
რა არის Lowry Protein Assay?
Lowry ცილის ანალიზი არის ბიოქიმიური ანალიზი, რომელიც გამოიყენება ხსნარში ცილის მთლიანი დონის დასადგენად. ოლივერ ჰ. ლოური არის ადამიანი, რომელმაც შექმნა ეს რეაგენტი 1940 წელს. პროცედურა ასახავს ხსნარის ცილის მთლიან კონცენტრაციას ფერის ცვლილებით, რაც პროპორციულია ხსნარში ცილის კონცენტრაციის. აქედან გამომდინარე, ეს ასევე არის ცილის კოლორიმეტრიული ანალიზი.
რეაქცია სპილენძის იონებს (Cu+) შორის, რომლებიც წარმოიქმნება პეპტიდური ბმების დაჟანგვით და ფოლინი-ციოკალტეუს რეაგენტს შორის, ამ პროცედურის საფუძველია.ასევე, ეს რეაგენტი შეიცავს ფოსფომოლიბდის მჟავას და ფოსფორ-ვოლფრას მჟავას. თუმცა, Lowry ცილის ანალიზის რეაქციის მექანიზმი კარგად არ არის გასაგები. მაგრამ ის მოიცავს ცისტეინის, ტრიპტოფანის და ტიროზინის ნარჩენების დაჟანგვას ფოლინი-ციოკალტეუს რეაგენტის შემცირებით.
სურათი 02: Lowry ცილის ანალიზი
ცისტეინის ნარჩენები ხელს უწყობს აბსორბციას, რომელიც დაფიქსირდა Lowry ცილის ანალიზში და რეაქცია იწვევს ბრწყინვალე ცისფერ მოლეკულას; ჰეტეროპოლი მოლიბდენის ლურჯი. ამ მოლეკულის შემცირება იზომება შთანთქმით 660 ნმ. მაშასადამე, ცისტეინისა და ტრიპტოფანის ნარჩენების კონცენტრაცია, რომელიც ამცირებს ფოლინი-ციოკალტეუს რეაგენტს, გამოყოფს ცილის მთლიან კონცენტრაციას ხსნარში.
რა მსგავსებაა ბრედფორდისა და ლოურის პროტეინის ანალიზს შორის?
- ბრედფორდის და ლოურის პროტეინის ანალიზი განსაზღვრავს ცილის კონცენტრაციას ხსნარში.
- ორივე მეთოდი კოლორიმეტრული მეთოდია.
- ასევე, ორივე მეთოდის მგრძნობელობა მაღალია.
რა განსხვავებაა ბრედფორდისა და ლოურის პროტეინის ანალიზს შორის?
Bradford და Lowry ცილის ანალიზი არის ორი ტიპის ანალიზი, რომელიც განსაზღვრავს ცილის კონცენტრაციას ხსნარში. ბრედფორდის ცილის ანალიზი ეყრდნობა Coomassie brilliant blue G-250 საღებავის შთანთქმის ცვლას, ხოლო Lowry ცილის ანალიზი დამოკიდებულია პეპტიდური ბმების დაჟანგვის შედეგად წარმოქმნილი სპილენძის იონების რეაქციაზე Folin-Cioc alteu რეაგენტთან. ასე რომ, ეს არის მთავარი განსხვავება ბრედფორდისა და ლოურის ცილის ანალიზს შორის. ბრედფორდის ცილის ანალიზს 15 წუთი სჭირდება შედეგის მისაღებად, ხოლო Lowery ცილის ანალიზს 40-60 წუთი სჭირდება შედეგის მისაღებად. ამრიგად, ეს არის კიდევ ერთი განსხვავება ბრედფორდისა და ლოურის ცილის ანალიზს შორის. გარდა ამისა, ბრედფორდის ცილის ანალიზი დამოკიდებულია ამინომჟავის შემადგენლობაზე, ხოლო Lowry ცილის ანალიზი ნაწილობრივ დამოკიდებულია ამინომჟავის შემადგენლობაზე.აქედან გამომდინარე, ეს ასევე არის განსხვავება ბრედფორდისა და ლოურის პროტეინის ანალიზს შორის.
ქვემოთ ინფოგრაფიკა გთავაზობთ უფრო მეტ დეტალს ბრედფორდისა და ლოურის ცილის ანალიზს შორის სხვაობის შესახებ.
შეჯამება - ბრედფორდი vs Lowry პროტეინის ანალიზი
ასეი არის ანალიტიკური ტექნიკა, რომელიც გამოიყენება ნიმუშის ძირითადი ფუნქციური კომპონენტის დასახასიათებლად. ბრედფორდის და ლოურის ცილის ანალიზი არის ცილის ანალიზის ორი ტიპი, რომლებიც ფუნქციონირებს კოლორიმეტრული ტექნიკით. ორივე ბრედფორდის და ლოურის ცილის ანალიზი განსაზღვრავს ცილის კონცენტრაციას ხსნარში. ამასთან, ბრედფორდისა და ლოურის პროტეინის ანალიზს შორის მთავარი განსხვავება მდგომარეობს მათ მიერ გამოყენებულ კოლორიმეტრულ ტექნიკაში. ბრედფორდის ცილის ანალიზი იყენებს Coomassie ბრწყინვალე ცისფერ G-250-ს, ხოლო Lowry-ის პროტეინის ანალიზი იყენებს სპილენძის იონებს (Cu+) იონებს და ფოლინი-ციოკალტეუს რეაგენტს.გარდა ამისა, ბრედფორდის მეთოდი იძლევა სწრაფ შედეგებს, ვიდრე Lowry ცილის ანალიზი. თუმცა, ორივე მეთოდი ძალიან მგრძნობიარე მეთოდია და ექვემდებარება სხვადასხვა ნივთიერების ჩარევას.
