ძირითადი განსხვავება BCA და ბრედფორდის ანალიზს შორის არის ის, რომ BCA ანალიზი შრომატევადი და ნაკლებად ზუსტია, მაშინ როდესაც ბრედფორდის ანალიზი სწრაფი და ზუსტია.
BCA და ბრედფორდის ანალიზი არის ცილის კონცენტრაციის განსაზღვრის ორი საანალიზო მეთოდი. ამ ორ ანალიზს აქვს შეფასების განსხვავებული პრინციპები და განსხვავებები მათ სიზუსტეში.
რა არის BCA ანალიზი?
BCA ანალიზი ან ბიკინქონინის მჟავას ანალიზი არის ბიოქიმიური ანალიზი, რომელიც სასარგებლოა ხსნარში ცილის მთლიანი კონცენტრაციის დასადგენად. ამ მეთოდს ასევე უწოდებენ სმიტის ანალიზს მისი გამომგონებლის, პოლ კ. სმიტის მიხედვით. ეს ანალიტიკური მეთოდი აჩვენებს მსგავსებას Lowry ცილის ანალიზთან, ბრედფორდის ცილის ანალიზთან ან ბიურეტის რეაგენტთან.ჩვენ შეგვიძლია დავაკვირდეთ ცილის მთლიან კონცენტრაციას მოცემულ ნიმუშში ნიმუშის ხსნარის ფერის ცვლილების გზით, რომელიც მწვანედან მეწამულში გადადის. ეს ფერის ცვლილება ხდება პროტეინის შემცველობის პროპორციულად. ამის შემდეგ ჩვენ შეგვიძლია გამოვიყენოთ კოლორიმეტრიული ტექნიკა ნიმუშის ფერის ინტენსივობისა და ცილის შემცველობის გასაანალიზებლად.
BCA ცილის შეფასების მეთოდი
BCA ანალიზის მექანიზმის განხილვისას, ტიპიური BCA ხსნარი შეიცავს უაღრესად ტუტე ხსნარს pH დაახლოებით 11,25 და ამ ხსნარის ინგრედიენტები მოიცავს ბიკინქონინის მჟავას, ნატრიუმის კარბონატს, ნატრიუმის ბიკარბონატს, ნატრიუმის ტარტრატს და სპილენძის (II) სულფატის პენტაჰიდრატი. ეს ანალიზი უპირველეს ყოვლისა დამოკიდებულია ორ ქიმიურ რეაქციაზე: სპილენძის (II) სპილენძამდე (I) შემცირება ცილაში პეპტიდური ობლიგაციებით და ბიკინქონინის მჟავას ორი მოლეკულის ქელაცია სპილენძის (I) იონთან, რის შედეგადაც წარმოიქმნება მეწამული ფერის კომპლექსი. შთანთქავს სინათლეს 562 ნმ ტალღის სიგრძეზე. პირველ რეაქციაში, სპილენძის (II) რაოდენობა, რომელიც შემცირებულია პეპტიდური ბმებით, პროპორციულია ნიმუშის ცილის ოდენობისა.
რა არის ბრედფორდის ანალიზი?
ბრედფორდის ანალიზი არის სპექტროსკოპიული ანალიტიკური მეთოდი, რომელიც სასარგებლოა ხსნარში ცილის კონცენტრაციის გასაზომად. ეს მეთოდი შეიმუშავა მარიონ მ. ბრედფორდმა 1976 წელს და ის შედარებით სწრაფი და ზუსტი მეთოდია.
პროტეინის და ბრედფორდის რეაგენტის ფერადი რეაქცია
ჩვენ შეგვიძლია გამოვიყენოთ ეს მეთოდი სინჯში ცილის რაოდენობის კონცენტრაციის დასადგენად. ქიმიური რეაქცია, რომელიც ხდება ნიმუშში ამ ანალიზის დროს, მხოლოდ ნიმუშში არსებული ცილის ამინომჟავის შემადგენლობაზეა დამოკიდებული.
ბრედფორდის ცილის შეფასების მეთოდი
ამ ანალიზის მეთოდის განხილვისას, ეს არის კოლორიმეტრიული ცილის ანალიზი, რომელიც ეფუძნება Coomassie Brilliant Blue G-250 საღებავის შთანთქმის ცვლილებას. ზოგადად, ეს საღებავი არსებობს სამი ფორმით, როგორც ანიონური (ლურჯი), ნეიტრალური (მწვანე) და კატიონური (წითელი) ფორმა. ამიტომ, მჟავე პირობებში, საღებავი იცვლის ფერს წითელიდან ლურჯამდე. ეს გამოწვეულია ცილის საღებავთან შეკავშირების გამო. ამის საპირისპიროდ, თუ არ არის ცილა საღებავთან დასაკავშირებლად, ფერის ცვლილება არ ჩანს, ხსნარი იღებს წითელ-ყავისფერ ფერს. ამ საღებავს შეუძლია შექმნას ძლიერი, არაკოვალენტური კომპლექსი ცილის კარბოქსილის ჯგუფთან ვან დერ ვაალის ძალებითა და ელექტროსტატიკური მიზიდულობით.
რა განსხვავებაა BCA-სა და ბრედფორდის ანალიზს შორის?
BCA და ბრედფორდის ანალიზი არის ცილის კონცენტრაციის განსაზღვრის ორი საანალიზო მეთოდი. ამ ორ ანალიზს აქვს შეფასების განსხვავებული პრინციპები და განსხვავებები მათ სიზუსტეში. მთავარი განსხვავება BCA და ბრედფორდის ანალიზს შორის არის ის, რომ BCA ანალიზი არის შრომატევადი და ნაკლებად ზუსტი, ხოლო ბრედფორდის ანალიზი არის სწრაფი და ზუსტი.
შემდეგი ინფოგრაფიკა აჯამებს განსხვავებებს BCA-სა და ბრედფორდის ანალიზს შორის ცხრილის სახით.
შეჯამება – BCA vs ბრედფორდის ანალიზი
BCA ანალიზი ან ბიკინქონინის მჟავას ანალიზი არის ბიოქიმიური ანალიზი, რომელიც სასარგებლოა ხსნარში ცილის მთლიანი კონცენტრაციის დასადგენად. ბრედფორდის ანალიზი არის სპექტროსკოპიული ანალიტიკური მეთოდი, რომელიც სასარგებლოა ხსნარში ცილის კონცენტრაციის გასაზომად. მთავარი განსხვავება BCA და ბრედფორდის ანალიზს შორის არის ის, რომ BCA არის შრომატევადი და ნაკლებად ზუსტი, ხოლო ბრედფორდის ანალიზი არის სწრაფი და ზუსტი.
