მიკრონუკლეუსსა და კომეტის ანალიზს შორის მთავარი განსხვავებაა ის, რომ მიკრობირთვული ანალიზი მნიშვნელოვანია ქრომოსომული დაზიანების შესამოწმებლად მუტაგენის ზემოქმედების შედეგად, ხოლო კომეტის ანალიზი მნიშვნელოვანია ცალკეულ უჯრედებში დნმ-ის პირველადი დაზიანების გამოსავლენად.
გენოტოქსიკურობის ანალიზები ხელს უწყობს მუტაციებისა და ქრომოსომული პათოლოგიების შესაძლებლობის შეფასებას. გენოტოქსინები მოიცავს ქიმიურ ნივთიერებებს და რადიაციას. კანცეროგენები, მუტაგენები და ტერატოგენები გენოტოქსინების ძირითადი კატეგორიებია. ისინი იწვევენ სხვადასხვა დაზიანებებს, როგორიცაა წერტილოვანი მუტაციები, წაშლა, ერთი და ორჯაჭვიანი რღვევები, ქრომოსომული აბერაციები, მიკრობირთვების წარმოქმნა, დნმ-ის შეკეთება და უჯრედული ციკლის ურთიერთქმედება.ასეთმა პირობებმა შეიძლება გამოიწვიოს მრავალფეროვანი დაავადებები და გენოტოქსიურობის ანალიზი ხელს უშლის ამ პირობების პოტენციურ ზიანს. მიკრობირთვული ანალიზი და კომეტის ანალიზი არის ორი ტექნიკა გენოტოქსიურობის ანალიზში.
რა არის მიკრობირთვული ანალიზი?
მიკრონუკლეუსის ანალიზი არის ანალიზი ქრომოსომული დაზიანების შესაფასებლად მუტაგენის ზემოქმედების შედეგად. ეს მნიშვნელოვანია ქიმიკატების სკრინინგისთვის, რომლებიც იწვევენ ღეროების წარმოქმნას და მიკრობირთვებს. მიკრობირთვული ანალიზი გვაწვდის ინფორმაციას ქიმიკატების სტაბილურობის შესახებ ქრომოსომის სტრუქტურასა და ფუნქციაში ჩარევისას. ბევრი კანცეროგენი მიკრობირთვულ ანალიზში დადებითია. ანალიზის პროცესი მოიცავს ქიმიურ მკურნალობას და მიკრობირთვული უჯრედების სიხშირის გაზომვას. თუ არსებობს მიკრობირთვული უჯრედების რაოდენობის არანორმალური ზრდა, ის ასკვნის, რომ ქიმიური ნივთიერება იწვევს ქრომოსომულ დაზიანებას.
მიკრობირთვული ანალიზი ჩვეულებრივ ტარდება აქტიურად გამყოფ უჯრედებზე. ამიტომ, ერითროციტები და ძვლის ტვინის ღეროვანი უჯრედები, რომლებიც წარმოიქმნება უჯრედების დაყოფით, იდეალური კანდიდატებია ასეთი ანალიზისთვის.ისინი განიცდიან მუდმივ და სწრაფ ბრუნვას. ვინაიდან ერითროციტებს არ აქვთ ნამდვილი ბირთვები, ეს მიკრობირთვიან უჯრედებს უფრო ხილულს ხდის ანალიზის ბოლოს.
სურათი 01: მიკრობირთვული ანალიზის დაკვირვება
მიკრობირთვული ანალიზი არის ეკონომიური, უფრო სწრაფი, მოსახერხებელი და მოითხოვს ნაკლებ უნარებს. ისინი ასახავს ქრომოსომულ აბერაციებს სწრაფად საიმედოდ და ძალზე სასარგებლოა ქრომოსომული დაზიანების სწრაფად შესაფასებლად. მიკრობირთვული ანალიზის სპეციალური და მრავალმხრივი ტიპი არის ციტოკინეზის ბლოკის მიკრონუკლეუს ციტომის ანალიზი (CBMNcyt). ეს არის სასურველი ანალიზი უჯრედებში ქრომოსომული დაზიანებისა და არასტაბილურობის გასაზომად. თუმცა, მიკრობირთვული ანალიზის გამოყენების მთავარი პრობლემა ის არის, რომ მას არ შეუძლია განსაზღვროს სხვადასხვა ტიპის ქრომოსომული აბერაციები, და ანალიზი გავლენას ახდენს მიტოზურ სიჩქარეზე და უჯრედების სიკვდილის პროპორციაზე, რაც იწვევს შედეგების შეცვლას.
რა არის Comet Assay?
კომეტის ანალიზი, რომელიც ასევე ცნობილია როგორც ერთჯერადი გელის ელექტროფორეზის ანალიზი, არის მარტივი და მგრძნობიარე ტექნიკა დნმ-ის დაზიანების გამოსავლენად. ის ზომავს დნმ-ის რღვევებს ევკარიოტულ უჯრედებში და წარმოადგენს სტანდარტულ ტექნიკას ბიომონიტორინგისა და გენოტოქსიკურობის ტესტირებისთვის.
კომეტის ანალიზი ჩართულია უჯრედების ინკაფსულაციაში დაბალი დნობის წერტილის აგაროზის სუსპენზიებში, უჯრედების ლიზისში ნეიტრალურ ან ტუტე პირობებში და შეჩერებული ლიზირებული უჯრედების ელექტროფორეზის პროცესში. ინკაფსულაციის პროცესის დროს უჯრედები შეჩერებულია გამდნარი დაბალი დნობის წერტილის მქონე აგაროზაში და აგაროზა ქმნის ნახშირწყლების ბოჭკოების მატრიცას მათ ადგილზე დასამაგრებლად. აგაროზა ოსმოსურად ნეიტრალურია; შესაბამისად, ის საშუალებას აძლევს ხსნარებს შეაღწიონ გელის მეშვეობით და იმოქმედონ უჯრედებზე მათი დარღვევისა და გადაადგილების გარეშე. ლიზისის ხსნარი არის უაღრესად კონცენტრირებული მარილის წყალხსნარი და სარეცხი საშუალება. ეს მარილი არღვევს ცილებს და უჯრედში შემაკავშირებელ შაბლონებს და არღვევს უჯრედის რნმ-ის შემცველობას.უჯრედები ანადგურებენ და ყველა ცილა, რნმ, ციტოპლაზმური და ნუკლეოპლაზმური კომპონენტები იშლება და დიფუზირდება აგაროზის მატრიქსში, ტოვებს დნმ-ს.
სურათი 02: კომეტის ანალიზი
ელექტროფორეზის ხსნარი არის ტუტე ხსნარი, სადაც დნმ-ის ორმაგი სპირალი დენატურდება და ნუკლეოიდი ხდება ერთჯაჭვიანი. ამ პროცესის დროს, ელექტრული ველი გამოიყენება სურათების გასაანალიზებლად. გამოსახულების ანალიზი ზომავს ფლუორესცენციის საერთო ინტენსივობას დნმ-სა და ნუკლეოიდისთვის და ადარებს ორივეს. მთლიანი სტრუქტურა წააგავს კომეტას წრიული თავით, რომელიც შეესაბამება დარჩენილ დაუზიანებელ დნმ-ს და კუდი დაზიანებული დნმ-ისთვის. რაც უფრო ნათელი და გრძელია კუდი უფრო ძლიერი სიგნალების გამო, მით უფრო მაღალია დაზიანების დონე.
რა მსგავსებაა მიკრონუკლეუსსა და კომეტას ანალიზს შორის?
- მიკრობირთვი და კომეტის ანალიზი არის ეკონომიური, უფრო სწრაფი, მოსახერხებელი და მოითხოვს ნაკლებ უნარებს.
- ისინი ძირითადად ტარდება დნმ-ზე.
- ორივე ანალიზი გვეხმარება მუტაციებისა და ქრომოსომული ანომალიების შეფასებაში.
- უფრო მეტიც, ორივე ტექნიკა იყენებს ქიმიურ საშუალებებს პროცედურის ჩასატარებლად.
რა განსხვავებაა მიკრობირთვსა და კომეტას ანალიზს შორის?
მიკრონუკლეუსის ანალიზი მნიშვნელოვანია მუტაგენის ზემოქმედების შედეგად ქრომოსომული დაზიანების შესამოწმებლად, ხოლო კომეტის ანალიზი მნიშვნელოვანია ცალკეულ უჯრედებში დნმ-ის პირველადი დაზიანების გამოსავლენად. ამრიგად, ეს არის მთავარი განსხვავება მიკრონუკლეუსსა და კომეტის ანალიზს შორის. ასევე, მიკრობირთვული ანალიზი კარგად არის დადგენილი კლასტოგენურობისა და ანევგენურობის გამოსავლენად. კომეტის ანალიზი გამოიყენება როგორც გენოტოქსიურობის ტესტი უჯრედებში დნმ-ის პირველადი დაზიანების გამოსავლენად. გარდა ამისა, მიკრობირთვული ანალიზი იძლევა ინფორმაციას ქიმიკატების სტაბილურობის შესახებ, ხოლო კომეტის ანალიზი არის ერთუჯრედიანი გელის ელექტროფორეზი.
ქვემოთ მოცემული ინფოგრაფიკა წარმოგიდგენთ განსხვავებებს მიკრობირთვსა და კომეტას ანალიზს შორის ცხრილის სახით გვერდიგვერდ შედარებისთვის.
რეზიუმე - მიკრობირთვი წინააღმდეგ კომეტას ანალიზი
გენოტოქსიკურობის ანალიზები ხელს უწყობს მუტაციებისა და ქრომოსომული პათოლოგიების შესაძლებლობის შეფასებას. მიკრონუკლეუსის ანალიზი და კომეტის ანალიზი არის ორი ტექნიკა გენოტოქსიურობის ანალიზში. მიკრონუკლეუსის ანალიზი აფასებს ქრომოსომულ დაზიანებას მუტაგენის ზემოქმედების შედეგად. Comet Assay არის მარტივი და მგრძნობიარე ტექნიკა დნმ-ის დაზიანების გამოსავლენად. ასე რომ, ეს არის მთავარი განსხვავება მიკრონუკლეუსსა და კომეტის ანალიზს შორის. მიკრობირთვული ანალიზი მნიშვნელოვანია ქიმიკატების სკრინინგისთვის, რომლებიც იწვევენ შუბლის წარმოქმნას და მიკრონუკლეუსებს. კომეტის ანალიზი ჩართულია უჯრედების ინკაფსულაციაში დაბალი დნობის წერტილის აგაროზის სუსპენზიებში, უჯრედების ლიზში ნეიტრალურ ან ტუტე პირობებში და შეჩერებული ლიზირებული უჯრედების ელექტროფორეზის პროცესში.
