ძირითადი განსხვავება კოლორიმეტრულ და ფლუორომეტრულ ანალიზს შორის არის ის, რომ კოლორიმეტრიული ანალიზი განსაზღვრავს ფერადი ნაერთების კონცენტრაციას ხსნარში, ხოლო ფლუორომეტრიული ანალიზი განსაზღვრავს ხსნარის კინეტიკურ მექანიზმს.
ბიოქიმიური ანალიზი არის ტექნიკა, რომელიც აღმოაჩენს ან აფასებს ბიოლოგიური მოლეკულის ან ნივთიერების აქტივობას ანალიტიკურად. ეს არის ინ ვიტრო პროცესი. კოლომეტრიული ანალიზი და ფლუომეტრიული ანალიზი არის ორი ტიპის საერთო ბიოქიმიური ანალიზი, რომელიც ტარდება ლაბორატორიებში. მრავალი ტექნიკა, როგორიცაა ELISA და western blotting, ასევე წარმოადგენს კომპლექსურ ბიოქიმიურ ანალიზს მეტაბოლური აქტივობის რაოდენობრივი განსაზღვრისთვის და ბიომოლეკულების ფუნქციური ქცევის გასაზომად, როგორიცაა ცილები, ფერმენტები და სხვა მცირე მოლეკულები.ამ ტიპის ანალიზები გამოიყენება ცილა-დნმ, პროტეინ-რნმ და ცილა-პროტეინის ურთიერთქმედების იდენტიფიკაციისთვის.
რა არის კოლორიმეტრიული ანალიზი?
კოლორიმეტრიული ანალიზი არის ტექნიკა, რომელიც განსაზღვრავს ფერადი ნაერთების კონცენტრაციას ხსნარში. სხვა სიტყვებით რომ ვთქვათ, კოლორიმეტრული ანალიზი არის რეაქცია, რომელიც იწვევს ფერის ცვლილებას რეაგენტებსა და ანალიზებს შორის ფერმენტული ან ქიმიური რეაქციის გამო. ფერმენტების, სპეციფიკური ნაერთების, ჰორმონების, ანტისხეულების და სხვა ანალიტების შესამოწმებლად გამოიყენება კოლორიმეტრიული ანალიზები ბიოქიმიაში. ისინი იყენებენ კოლორიმეტრებს ან სპექტროფოტომეტრებს. კოლორიმეტრები არის ინსტრუმენტები, რომლებიც ახასიათებენ ფერად ნიმუშებს, რათა უზრუნველყონ ფერის მახასიათებლების ობიექტური საზომი. სპექტროფოტომეტრი არის მოწყობილობა, რომელიც ზომავს სინათლის ინტენსივობას სინათლის ფერის ან ტალღის სიგრძის ფუნქციით.
სურათი 01: კოლორიმეტრული ანალიზი
როგორ მუშაობს კოლომეტრიული ანალიზი?
კოლორიმეტრული ანალიზის დროს, თეფშს ამზადებენ ჭებში შეკრული კონკრეტული ანტისხეულით. შემდეგ ემატება ნიმუში. ამან შეიძლება ნიმუშს ანტისხეულთან შეკავშირების საშუალება მისცეს. შემდეგ ჭაბურღილებს ემატება გამოვლენის ანტისხეული და სუბსტრატი, რათა რეაგირება მოახდინოს აღმოჩენის ზონდზე. წაკითხვის წინ დასასრულს ემატება გაჩერების ხსნარი. ცარიელი ჭა, რომელსაც ბლანკი ეწოდება, ნიმუშის გარეშე რჩება. კოლორიმეტრულ ანალიზში, რაც უფრო მუქია ფერი, მით მეტია ანალიზის კონცენტრაცია. ჩვეულებრივ, წაკითხვისთვის საჭიროა მხოლოდ ერთი ტალღის სიგრძე. მაგრამ თუ არსებობს საცნობარო გაზომვა, გამოიყენება ორი ან მეტი ტალღის სიგრძე.
რა არის ფლუომეტრიული ანალიზი?
ფლუორომეტრიული ანალიზი არის ტექნიკა, რომელიც განსაზღვრავს ფერმენტული რეაქციების კინეტიკურ მექანიზმს. ფლუორომეტრიული ანალიზი ხდება ფლუორესცენტური პროდუქტის წარმოქმნით არაფლუორესცენტური სუბსტრატიდან ან პირიქით.ეს ანალიზი ასევე იყენებს ფლუორესცენციის რეზონანსული ენერგიის გადაცემას (FRET), სადაც ფერმენტული რეაქცია ცვლის ორი ფტორფორის პოზიციას სუბსტრატში, რითაც იცვლება ფლუორესცენციის ინტენსივობა.
სურათი 02: ფლუორომეტრიული ანალიზი
ფლუორომეტრიული ანალიზები ზოგადად ბევრად უფრო მგრძნობიარეა, ვიდრე სხვა ანალიზები. ფერმენტების დიაგნოსტიკური შეფასება პაციენტების ქსოვილებში, უჯრედებში ან სითხის ნიმუშებში იზრდება მისი მაღალი მგრძნობელობის გამო.
როგორ მუშაობს ფლუორომეტრიული ანალიზი?
ფლუორომეტრიული ანალიზის დროს, სუბსტრატს ემატება ნიმუში ფირფიტაში და ფლუორესცენციის პასუხი მიიღება ფირფიტის წამკითხველის გამოყენებით. აქ თითოეული უჯრედი ცალ-ცალკე იზომება. გაუმჭვირვალე ფირფიტები გამოიყენება ფლუორომეტრიულ გამოკვლევებში. ეს ამცირებს სინათლის გაფანტვას.ამ ტიპის ანალიზისთვის საჭიროა ორი ტალღის სიგრძე. ერთი ტალღის სიგრძე არის აგზნების გამოვლენა, ხოლო მეორე ტალღის სიგრძე არის გამოსხივებისთვის.
რა მსგავსებაა კოლორიმეტრულ და ფლუომეტრიულ ანალიზს შორის?
- კოლორიმეტრიული ანალიზი და ფლუომეტრიული ანალიზი ბიოქიმიური ანალიზის ორი ტიპია.
- ორივე ანალიზი ტარდება სამედიცინო დიაგნოსტიკისთვის.
- ეს ანალიზები მოიცავს ფერმენტულ რეაქციას.
- ორივე ანალიზი მოიცავს სუბსტრატს და ანალიტებს.
რა განსხვავებაა კოლორიმეტრულ და ფლუომეტრიულ ანალიზს შორის?
კოლორიმეტრული ანალიზი არის ტექნიკა, რომელიც განსაზღვრავს ფერადი ნაერთების კონცენტრაციას ხსნარში, ხოლო ფლუომეტრიული ანალიზი არის ტექნიკა, რომელიც განსაზღვრავს ფერმენტული რეაქციების კინეტიკურ მექანიზმს. ასე რომ, ეს არის მთავარი განსხვავება კოლორიმეტრულ და ფლუომეტრიულ ანალიზს შორის. უფრო მეტიც, ფლუორომეტრიული გამოკვლევები უფრო მგრძნობიარეა, ვიდრე კოლორიმეტრული გამოკვლევები; ამრიგად, ფლუორომეტრიულ ანალიზებს აქვთ მეტი ანალიზის გამოვლენის უნარი.ამრიგად, ეს არის კიდევ ერთი მნიშვნელოვანი განსხვავება კოლორიმეტრულ და ფლუომეტრიულ ანალიზს შორის. გარდა ამისა, ფლუორომეტრიული ანალიზები საჭიროებს ორ ტალღის სიგრძეს, ხოლო კოლორიმეტრული გამოკვლევები ტარდება ერთი ტალღის სიგრძით.
ქვემოთ მოცემული ინფოგრაფიკა ასახავს მეტ განსხვავებას კოლორიმეტრულ და ფლუორომეტრულ ანალიზს შორის.
შეჯამება – კოლორიმეტრიული და ფლუორომეტრიული ანალიზი
ბიოქიმიური ანალიზი არის ანალიტიკური პროცესი, რომელიც გამოიყენება უჯრედული მეტაბოლური რეაქციების დასადგენად და რაოდენობრივად. კოლორიმეტრიული ანალიზი და ფლუორომეტრიული ანალიზი ბიოქიმიური ანალიზის ორი ტიპია. კოლომეტრიული ანალიზი არის რეაქცია, რომელიც იწვევს ფერის ცვლილებას რეაგენტებსა და ანალიზებს შორის ფერმენტული ან ქიმიური რეაქციის გამო, ხოლო ფლუორომეტრიული ანალიზი არის ტექნიკა, რომელიც გამოიყენება ფერმენტული რეაქციების კინეტიკური მექანიზმის დასადგენად. ორივე ანალიზი დამოკიდებულია ფერმენტულ რეაქციაზე, რომელიც მოიცავს სუბსტრატს და ანალიზს. ფლუორომეტრიული ანალიზები უფრო მგრძნობიარეა ვიდრე კოლორიმეტრული ანალიზი. რაც მთავარია, ფლუორომეტრიული ანალიზები მოითხოვს ორ ტალღის სიგრძეს, ხოლო კოლორიმეტრული ანალიზი შეიძლება განხორციელდეს მხოლოდ ერთი ტალღის სიგრძით.ამრიგად, ეს აჯამებს განსხვავებას კოლორიმეტრულ და ფლუორომეტრულ ანალიზს შორის.