ძირითადი სხვაობა – ტრანსფორმანტები რეკომბინანტების წინააღმდეგ
რეკომბინაცია და ტრანსფორმაცია არის ორი გადამწყვეტი ნაბიჯი გენური ინჟინერიაში, სადაც ორგანიზმის მახასიათებლები შეგნებულად იცვლება მისი გენეტიკური მასალის მანიპულირებით. რეკომბინაცია არის პროცესი, რომლის დროსაც უცხო დნმ შედის ვექტორულ გენომში და წარმოიქმნება რეკომბინანტული დნმ-ის მოლეკულა. ტრანსფორმაცია არის შემდეგი ნაბიჯი, რომელშიც რეკომბინანტული მოლეკულა შედის მასპინძელ ორგანიზმში. მასპინძელი უჯრედი ან ორგანიზმი ხელს უწყობს რეკომბინანტული მოლეკულის გამოხატვას. ტრანსფორმანტებსა და რეკომბინანტებს შორის მთავარი განსხვავებაა ის, რომ ტრანსფორმანტები არის უჯრედები ან ორგანიზმები, რომლებიც იღებენ რეკომბინანტულ მოლეკულას შიგნით და ხელს უწყობენ გამოხატვას, ხოლო რეკომბინანტები არის ვექტორები, რომლებიც საშუალებას აძლევს უცხო დნმ-ის შეყვანას მის გენომში და ტრანსპორტირებას მასპინძელ ტრანსფორმატორებში გამოხატვისთვის.
რა არის ტრანსფორმანტები?
ტრანსფორმანტები არის უჯრედები ან ორგანიზმები, რომლებშიც რეკომბინანტული დნმ მიიღება გამოხატვისთვის. ბაქტერიები ჩვეულებრივ გამოიყენება როგორც მასპინძელი ორგანიზმები გენური ინჟინერიაში, რადგან ისინი ადვილად იზრდებიან, მრავლდებიან და ამუშავებენ ლაბორატორიულ პირობებში და ტრანსფორმაციის პროცესი მარტივია სხვა ორგანიზმებთან შედარებით. გენური ინჟინერიაში გამოყენებული ყველაზე პოპულარული მასპინძელი ბაქტერია არის ბაქტერია E coli.
ტრანსფორმაციის პროცესის დროს მასპინძელი უჯრედები იწვევენ რეკომბინანტების მიღებას. თუმცა, ზოგიერთი მასპინძელი უჯრედი არ იღებს რეკომბინანტულ მოლეკულებს. ისინი ცნობილია როგორც არატრანსფორმანტები და უჯრედები, რომლებიც შეიცავს რეკომბინანტულ დნმ-ის მოლეკულებს, ცნობილია როგორც ტრანსფორმანტები. ტრანსფორმანტების შერჩევა არატრანსფორმანტებიდან ხდება მოლეკულურ ბიოლოგიაში შესარჩევი მარკერების გამოყენებით. არჩევადი მარკერები ჩასმულია ვექტორულ გენომში დნმ-ის ჩანართთან ერთად. ყველაზე ხშირად გამოყენებული შერჩევითი მარკერები არის ანტიბიოტიკებისადმი რეზისტენტული გენები.მარკერის გენები ხელს უწყობს ტრანსფორმანტების დიფერენციაციას და აგრძელებს პროცესს. ტრანსფორმაციის პროცესის შემდეგ ბაქტერია იზრდება ანტიბიოტიკის შემცველ გარემოში. მხოლოდ ტრანსფორმანტებს შეუძლიათ ამ გარემოზე ზრდა, რადგან მათ აქვთ რეკომბინანტები შიგნით.
როდესაც რეკომბინანტული დნმ-ის მოლეკულა გარდაიქმნება მასპინძელ ორგანიზმში, უცხო დნმ შეიძლება ან ინტეგრირებული იყოს მასპინძელი უჯრედის გენომში ან დარჩეს არაინტეგრირებული ციტოპლაზმაში. თუმცა, უცხო დნმ-ის ექსპრესია და რეპლიკაცია ხდება მასპინძელ ორგანიზმში და წარმოშობს პროცესის სასურველ შედეგს.
რა არის რეკომბინანტები?
რეკომბინანტი არის ორგანიზმი ან უჯრედი, რომელსაც გააჩნია უცხო დნმ-ის შემცველი რეკომბინირებული გენომი. რეკომბინანტები გენეტიკური ინჟინერიის პროცესის შედეგია.ისინი ხელოვნურად აგებულია in vitro ინტერესის გენების ჩასმით და გენომის მოდიფიცირებით. ხშირად ბაქტერიული პლაზმიდები და ბაქტერიოფაგები მოქმედებენ როგორც რეკომბინანტები გენური ინჟინერიაში. მას აქვს სხვადასხვა დნმ-ის ქიმერა. რეკომბინანტული დნმ-ის მოლეკულა ატარებს უცხო დნმ-ს მასპინძელ ორგანიზმში და აიძულებს მას გამოხატოს და შექმნას სასურველი პროდუქტი.
რეკომბინანტული მოლეკულები აგებულია შეზღუდვის ენდონუკლეაზებისა და დნმ ლიგაზების გამოყენებით. სასურველი დნმ-ის ფრაგმენტი გამოყოფილია თავდაპირველი ორგანიზმიდან და ჩასმულია ვექტორში, რათა მოხდეს რეკომბინანტი ტრანსფორმაციისთვის. ინტერესის გენის მოჭრა და ვექტორული ორგანიზმის გახსნა უნდა მოხდეს იმავე შეზღუდვის ფერმენტის გამოყენებით, რათა შეიქმნას თავსებადი წებოვანი ბოლოები, რათა მათ ერთმანეთთან შეუერთდეს. მას შემდეგ, რაც უცხო დნმ შედის ვექტორულ გენომში, იგი ცნობილია როგორც რეკომბინანტული ან რეკომბინანტული დნმ-ის მოლეკულა.
სურათი 02: რეკომბინანტული დნმ
რა განსხვავებაა ტრანსფორმანტებსა და რეკომბინანტებს შორის?
ტრანსფორმანტები რეკომბინანტების წინააღმდეგ |
|
| ტრანსფორმანტები არის უჯრედები, რომლებსაც შიგნით აქვთ რეკომბინანტული დნმ-ის მოლეკულა. | რეკომბინანტები არის მატარებელი მოლეკულები, რომლებსაც აქვთ უცხო დნმ ჩასმული საკუთარ გენომში. |
| უცხო დნმ-ის გამოხატვა | |
| ეს არის მასპინძელი უჯრედები, რომლებსაც შეუძლიათ რეკომბინანტული დნმ-ის გამოხატვა. | მათ უნდა შეეძლოთ თვითგამრავლება მასპინძელ ორგანიზმში. |
| არჩევა | |
| უჯრედები, რომლებიც შეიძლება ადვილად გაიზარდოს და გამრავლდეს, შეირჩევა მასპინძელ უჯრედებად. | ისინი უნდა იყოს ადვილად ამოღებული და უნდა შეიცავდეს არჩევად მარკერებს. |
რეზიუმე – ტრანსფორმანტები რეკომბინანტების წინააღმდეგ
ტრანსფორმანტები არის უჯრედები ან ორგანიზმები, რომლებსაც აქვთ რეკომბინანტული დნმ-ის მოლეკულები მათ შიგნით. რეკომბინანტები არის ორგანიზმები ან უჯრედები, რომლებმაც გაიარეს გენეტიკური რეკომბინაცია და აქვთ უცხო დნმ მათ გენომებში. ბაქტერიული უჯრედები ხშირად გამოიყენება, როგორც მასპინძელი უჯრედები ტრანსფორმაციისთვის, ხოლო პლაზმიდები და ბაქტერიოფაგები ხშირად იყენებენ ვექტორებად რეკომბინანტულ დნმ ტექნოლოგიაში. ეს არის განსხვავება ტრანსფორმანტებსა და რეკომბინანტებს შორის.
