ძირითადი განსხვავება – ქაღალდი თხელი ფენის წინააღმდეგ სვეტის ქრომატოგრაფიის წინააღმდეგ
ქაღალდის ქრომატოგრაფია, თხელი ფენის ქრომატოგრაფია და სვეტის ქრომატოგრაფია ქრომატოგრაფიული ტექნიკის სამი ტიპია. ძირითადი განსხვავება ქაღალდის ქრომატოგრაფიას, თხელი ფენის ქრომატოგრაფიასა და სვეტის ქრომატოგრაფიას შორის ემყარება ქრომატოგრაფიის ტექნიკაში გამოყენებული სტაციონარული ფაზის ტიპს. ქაღალდის ქრომატოგრაფია იყენებს ცელულოზის ქაღალდს, როგორც მის სტაციონარულ ფაზას, თხელი ფენის ქრომატოგრაფია იყენებს ალუმინის ან სილიკა გელს, როგორც მის სტაციონარულ ფაზას, ხოლო სვეტის ქრომატოგრაფია იყენებს სვეტს, რომელიც შეფუთულია შესაბამისი მატრიცის მასალით, როგორც სტაციონარული ფაზა.
ბიომოლეკულების გამოყოფისა და იდენტიფიკაციის პროცესში, როგორიცაა ცილები და ნახშირწყლები, ქრომატოგრაფია არის მნიშვნელოვანი ბიოფიზიკური ტექნიკა, რომელიც გამოიყენება. ქრომატოგრაფია გამოყოფს ნაერთებს მათი ხსნადობის, ზომისა და მუხტის მიხედვით. გამოყოფის მექანიზმზე დაყრდნობით, ქრომატოგრაფია იყენებს მექანიზმებს, როგორიცაა იონური გაცვლა, შთანთქმა, დაყოფა და ზომის გამორიცხვა და არსებობს სამი ქრომატოგრაფიული ტექნიკა; კერძოდ, ქაღალდი, თხელი ფენა და სვეტის ქრომატოგრაფია. ქაღალდის ქრომატოგრაფია ეფუძნება ნაერთის მყარ-თხევად ადსორბციას და ხსნადობას და ის იყენებს ცელულოზის ქაღალდს, როგორც სტაციონარულ ფაზას. თხელი ფენის ქრომატოგრაფია ეფუძნება მოლეკულების მყარ-თხევად ადსორბციას. მას აქვს სტაციონარული ფაზა, რომელიც, როგორც წესი, დამზადებულია ალუმინის ან სილიკა გელისგან და მობილური ფაზა, რომელიც არის გამხსნელი. სვეტის ქრომატოგრაფია იყენებს მატრიცით შეფუთულ სვეტს, რომელიც გამოიყენება მოლეკულების განცალკევებისთვის, ძირითადად მათი ზომის, აფინურობის ან მუხტის მიხედვით.
რა არის ქაღალდის ქრომატოგრაფია?
ქაღალდის ქრომატოგრაფია არის გამოყენებული ქრომატოგრაფიის უმარტივესი ტიპი და ის არ გამოიყენება ვრცელი კვლევისთვის. იგი ძირითადად გამოიყენება სტუდენტურ ლაბორატორიებში ბიომოლეკულების იდენტიფიცირებისთვის, როგორიცაა ამინომჟავები და ნახშირწყლები ნარევებში. ქაღალდის ქრომატოგრაფია იყენებს სტაციონარულ ფაზას, რომელიც მზადდება ცელულოზის ქაღალდის ან Whatman-ის ფილტრის ქაღალდის გამოყენებით და მობილურ ფაზას, რომელიც ჩვეულებრივ მზადდება ორგანული გამხსნელების გამოყენებით, როგორიცაა n-ბუტანოლი და ა.შ. ამგვარად, როდესაც ნაერთები ლაქადება და ნებადართულია მოძრავი ფაზის თანდასწრებით, ნაერთების ხსნადობიდან გამომდინარე, ისინი გამოიყოფა. ამრიგად, ქრომატოგრამის შემუშავების შემდეგ, შეღებვა შეიძლება მოხდეს თითოეული ნაერთის სიგრძის დასადგენად. ამით შესაძლებელია შეკავების ფაქტორის გამოთვლა.
სურათი 01: ქაღალდის ქრომატოგრაფია
ქაღალდის ქრომატოგრაფია შეიძლება კლასიფიცირდეს როგორც აღმავალი ქაღალდის ქრომატოგრაფია და დაღმავალი ქაღალდის ქრომატოგრაფია, დამოკიდებულია გამხსნელის მიმართულებაზე.
რა არის თხელი ფენის ქრომატოგრაფია?
თხელი ფენის ქრომატოგრაფია ან TLC არის საყოველთაოდ გამოყენებული ტექნიკა ნარევში არსებული სხვადასხვა ამინომჟავების იდენტიფიცირებისთვის ან ცილების იდენტიფიკაციისთვის. გამოყოფის ტექნიკა ეფუძნება მყარ-თხევად ადსორბციას. თხელი ფენის ქრომატოგრაფიის დროს სტაციონარული ფაზის სახით გამოიყენება ალუმინის ან სილიკა გელისგან დამზადებული ფირფიტა. გამხსნელი ნარევი განსხვავდება მოთხოვნილების მიხედვით და შეიძლება გამოიყენოს ორგანული ნაერთების სხვადასხვა კომბინაციები, როგორიცაა n-ბუტანოლი, ძმარმჟავა და წყალი გამხსნელის მოსამზადებლად. გამოსაყოფი ნაერთები ლაქებია ფირფიტაზე და ჩაეფლო გამხსნელ ნარევში. მას შემდეგ, რაც გამხსნელი მიემართება ფირფიტის კაპილარული მოქმედების საფუძველზე, ფირფიტაზე დაფიქსირებული ნაერთები ასევე მოძრაობენ გამხსნელში მათი ხსნადობის მიხედვით.
სურათი 02: თხელი ფენის ქრომატოგრაფია
ლაქების აღმოჩენა ქრომატოგრამის შემდეგ ხდება სხვადასხვა შეღებვის პროცედურებით. ზოგი იყენებს ნინჰიდრინის შეღებვას, რომელიც შეღებვის საკმაოდ ტოქსიკური მეთოდია. თანამედროვე თხელი ფენის ქრომატოგრამები იყენებენ ფლუორესცენციის ტექნიკას ქრომატოგრამის სანახავად გაშვების შემდეგ. მისი განვლილი მანძილების მიხედვით, თითოეული ნაერთის შეკავების დრო შეიძლება გამოითვალოს. ეს შეიძლება გამოყენებულ იქნას გამოყენებული ნარევის მიხედვით გამოყოფილი ნაერთის ტიპის დასადგენად. TLC ძირითადად გამოიყენება პროტეინის ნარევში ამინომჟავების იდენტიფიცირებისთვის და ასევე ნარევში არსებული სხვადასხვა ტიპის მონოსაქარიდების გამოსაყოფად.
რა არის სვეტის ქრომატოგრაფია?
სვეტის ქრომატოგრაფია არის ფართო ტერმინი, რომელიც გამოიყენება მრავალი სახის ქრომატოგრაფიის ტექნიკის აღსაწერად, რომლებიც იყენებენ სვეტებზე დაფუძნებულ გამოყოფის მეთოდს.სვეტის ქრომატოგრაფიაში ფიზიკური სვეტი გამოიყენება შეფუთვის მასალასთან ერთად ნაერთების გამოსაყოფად. გამოყოფა შეიძლება ეფუძნებოდეს ნაერთების მიერ გამოვლენილ სხვადასხვა ფიზიკურ თვისებებს. ეს თვისებები შეიძლება იყოს დამუხტვა, ზომა, 3D კონფორმაცია და შეკვრის უნარი და ა.შ. ამრიგად, მატრიცის მასალით შეფუთული სვეტი მოქმედებს როგორც სტაციონარული ფაზა, ხოლო სარეცხი ბუფერი, რომელიც გამოიყენება სვეტზე, მოქმედებს როგორც მობილური ფაზა.
თუ მოლეკულები განცალკევებულია ზომის მიხედვით, შესაფუთი მასალა შეფუთულია ისე, რომ იგი ტოვებს ფორებს ნაერთებისთვის გადაადგილებისთვის. ამგვარად, უფრო დიდი მოლეკულები, რომლებიც ვერ მიედინება ფორებში, პირველ რიგში გამოირეცხება, ხოლო პატარა მოლეკულებს გაცილებით მეტი დრო სჭირდება გამორეცხვას.
სურათი 03: სვეტის ქრომატოგრაფია
თუ მოლეკულები განცალკევებულია მათი მუხტის მიხედვით, სტაციონარული ფაზა შეიცავს ან ანიონს ან კატიონ გადამცვლელს, რომელთანაც ნაერთები მიიზიდება მათი მუხტის მიხედვით. ამრიგად, სარეცხი ეტაპის დროს, შეუკავშირებელი ნაერთები გამოირეცხება. გამორეცხვის ბუფერის დამატების შემდეგ, შეკრული დამუხტული ნაერთები გამოირეცხება. ამ ელუენტების გამოვლენა ძირითადად ეფუძნება სპექტროფოტომეტრულ ტექნიკას.
რა მსგავსებაა ქაღალდის თხელი ფენისა და სვეტის ქრომატოგრაფიას შორის?
- ყველა ქაღალდის თხელი ფენა და სვეტის ქრომატოგრაფიის სამი ტექნიკა გამოიყენება ბიომოლეკულების გამოყოფისთვის, როგორიცაა ამინომჟავები, ცილები და ნახშირწყლები.
- ქაღალდის თხელი ფენის და სვეტის ქრომატოგრაფიის ტექნიკას აქვს მოძრავი და სტაციონარული ფაზა.
- ქაღალდის თხელი ფენა და სვეტის ქრომატოგრაფიის ტექნიკა იყენებს ბიოფიზიკურ მექანიზმებს გამოყოფისთვის.
რა განსხვავებაა ქაღალდის თხელი ფენისა და სვეტის ქრომატოგრაფიას შორის?
ქაღალდი წვრილი ფენის წინააღმდეგ სვეტის ქრომატოგრაფია |
|
| ქაღალდის ქრომატოგრაფია | ქაღალდის ქრომატოგრაფია არის ქრომატოგრაფიული ტექნიკა, რომელიც გამოიყენება ნაერთების განცალკევებისთვის, რომელიც ეფუძნება სითხე-თხევად ადსორბციას და ნაერთის ხსნადობას. იგი იყენებს ცელულოზის ქაღალდს, როგორც მის სტაციონარულ ფაზას. |
| თხელი ფენის ქრომატოგრაფია | თხელი ფენის ქრომატოგრაფია არის კიდევ ერთი ქრომატოგრაფიული ტექნიკა, რომელიც დაფუძნებულია მოლეკულების მყარ თხევად ადსორბციაზე. მას აქვს ალუმინის ან სილიკა გელისგან დამზადებული სტაციონარული ფაზა და გამხსნელი, როგორც მობილური ფაზა, რომელიც არის გამხსნელი. |
| სვეტის ქრომატოგრაფია | სვეტის ქრომატოგრაფია იყენებს მატრიცით შეფუთულ სვეტს, რომელიც გამოიყენება მოლეკულების განცალკევებისთვის, ძირითადად მათი ზომის, აფინურობის ან მუხტის მიხედვით. |
| სტაციონარული ფაზა | |
| ქაღალდის ქრომატოგრაფია | Whatman-ის ნიტროცელულოზისგან დამზადებული ქაღალდი გამოიყენება როგორც სტაციონარული ფაზა ქაღალდის ქრომატოგრაფიაში. |
| თხელი ფენის ქრომატოგრაფია | ალუმინა ან სილიკა გელი გამოიყენება როგორც თხელი ფენის ქრომატოგრაფიის სტაციონარული ფაზა. |
| სვეტის ქრომატოგრაფია | სვეტი, რომელიც შეფუთულია შესაფერისი შესაფუთი მასალით, გამოიყენება როგორც სტაციონარული ფაზა სვეტის ქრომატოგრაფიაში. |
| მობილური ფაზა | |
| ქაღალდის ქრომატოგრაფია | გამშვები გამხსნელი არის ქაღალდის ქრომატოგრაფიის მობილური ფაზა. |
| თხელი ფენის ქრომატოგრაფია | გამშვები გამხსნელი არის თხელი ფენის ქრომატოგრაფიის მობილური ფაზა. |
| სვეტის ქრომატოგრაფია | სარეცხი ბუფერი არის სვეტის ქრომატოგრაფიის მობილური ფაზა. |
| გამოყოფისთვის გამოყენებული მექანიზმები | |
| ქაღალდის ქრომატოგრაფია | ქაღალდის ქრომატოგრაფია ეფუძნება მყარი სითხის შთანთქმას. |
| თხელი ფენის ქრომატოგრაფია | თხელი ფენის ქრომატოგრაფია ეფუძნება მყარი სითხის შთანთქმას. |
| სვეტის ქრომატოგრაფია | სვეტის ქრომატოგრაფია ეფუძნება ზომის გამორიცხვას, მუხტს და ფორმას. |
| ელუციის ბუფერი | |
| ქაღალდის ქრომატოგრაფია | არ არის საჭირო ქაღალდის ქრომატოგრაფიისთვის. |
| თხელი ფენის ქრომატოგრაფია | არ არის საჭირო თხელი ფენის ქრომატოგრაფიისთვის. |
| სვეტის ქრომატოგრაფია | აუცილებელია სვეტის ქრომატოგრაფიაში. |
| გამოვლენა | |
| ქაღალდის ქრომატოგრაფია | შეღებვა და შეკავების ფაქტორის განსაზღვრით. |
| თხელი ფენის ქრომატოგრაფია | შეღებვა და შეკავების ფაქტორის განსაზღვრით. |
| სვეტის ქრომატოგრაფია | სპექტროფოტომეტრიული განსაზღვრა. |
რეზიუმე – ქაღალდის თხელი ფენა სვეტის ქრომატოგრაფიის წინააღმდეგ
ქაღალდის ქრომატოგრაფია, TLC და სვეტის ქრომატოგრაფია არის გამოყოფის ტექნიკა, რომელიც გამოიყენება ბიომოლეკულების გამოყოფისთვის, როგორიცაა ცილები, ამინომჟავები და ნახშირწყლები (ძირითადად მონოსაქარიდები).ქაღალდის ქრომატოგრაფია იყენებს ცელულოზის ქაღალდს, როგორც სტაციონარულ ფაზას, ხოლო გამოყოფის მექანიზმი ემყარება მყარი თხევადი ადსორბციას. TLC ასევე იყენებს მყარი-თხევადი ადსორბციის მექანიზმებს. მოლეკულები გამოყოფილია სტაციონარულ ფაზაზე, რაც დამოკიდებულია მობილურ ფაზაში მათი ხსნადობის მიხედვით. სვეტის ქრომატოგრაფია იყენებს ფიზიკურ თვისებებს, როგორიცაა ზომა, ფორმა, მუხტი და ნაერთის მოლეკულური წონა განცალკევებისთვის. მატრიცის მასალით შეფუთული სვეტი მოქმედებს როგორც სტაციონარული ფაზა, ხოლო სარეცხი ბუფერი მოქმედებს როგორც გამხსნელის ფაზა. ეს არის განსხვავება ქაღალდის თხელ ფენასა და სვეტის ქრომატოგრაფიას შორის.
