ძირითადი განსხვავება Pour Plate-სა და Spread Plate-ს შორის არის ის, რომ ნიმუშის ცნობილი მოცულობა გავრცელებულია აგარის საშუალების ზედაპირზე გაფენილ ფირფიტაში, ხოლო, დასასხმელ ფირფიტაში, ნიმუშის ცნობილი მოცულობა შერეულია. აგარი და შემდეგ დაასხით თეფშში. როდესაც შევადარებთ ამ ორი ტექნიკის სიზუსტეს, ჩამოსხმის ფირფიტას აქვს უფრო მაღალი სიზუსტე, ვიდრე გაშლილი ფირფიტა.
სტანდარტული ფირფიტების დათვლის მეთოდი არის ზრდაზე დაფუძნებული მიდგომა, რომელიც ითვლის ცოცხალ (მზარდი/კულტივირებადი/სიცოცხლისუნარიანი) მიკროორგანიზმების რაოდენობას ნიმუშში. ეს არის მძლავრი მეთოდი, რომელიც გამოიყენება მრავალ მიკრობიოლოგიურ სფეროში ცოცხალი მიკროორგანიზმების რაოდენობის გასაანალიზებლად.ისეთ სფეროებში, როგორიცაა საკვები და რძის პროდუქტები, მედიცინა, გარემო, წყლისა და სოფლის მეურნეობა, მიკრობული გენეტიკა, მოლეკულური მიკრობიოლოგია, ზრდის მედიის განვითარება და ბიოტექნოლოგია (ბიორეაქტორის ტექნოლოგია, დუღილი, ნარჩენების/ჩამდინარე წყლების დამუშავება და ა.შ.) იყენებს ამ ტექნიკას. გარდა ამისა, არსებობს სტანდარტული თეფშების დათვლის ორი ძირითადი გზა: ეს არის გაშლილი ფირფიტის ტექნიკა და დაასხით ფირფიტის ტექნიკა.
რა არის თეფში?
დასხმული ფირფიტის ტექნიკა არის მიკრობული მეთოდი ნიმუშში არსებული ზოგიერთი სიცოცხლისუნარიანი უჯრედის დასათვლელად. ჩასხმის ფირფიტის მეთოდის სპეციალობა ის არის, რომ ნიმუშის ცნობილი მოცულობა ჯერ აგართან არის შერეული და შემდეგ თეფშში შეედინება.
სურათი 01: ჩაასხით ფირფიტა
სხვა ნაბიჯები მსგავსია გაშლილი ფირფიტის ტექნიკის, რომელიც განხილულია შემდეგ ნაწილში.ნიმუშთან შერეული აგარის ჩამოსხმის შემდეგ შემდეგი ნაბიჯი არის მისი გამაგრება და ინკუბაცია. ინკუბაციის შემდეგ, სიცოცხლისუნარიანი კოლონიების რაოდენობის დათვლა აუცილებელია საბოლოო CFU-ის გამოსათვლელად 1 გ ან 1 მლ-ზე.
რა არის Spread Plate?
Spread Plate არის მეთოდი სიცოცხლისუნარიანი უჯრედების აღრიცხვის ნიმუშში. ამ ტექნიკისთვის საჭიროა ნიმუშის სერიული განზავება, რათა უზრუნველყოფილი იყოს, რომ მინიმუმ ერთი წარმოშობს კოლონიების თვლადი რაოდენობას. პროცესი აქ არის აგარის ფირფიტის ზედაპირზე პიპეტირება განზავების განსაზღვრული მოცულობის და სწრაფად და თანაბრად გავრცელება აგარის ზედაპირზე მინის გამავრცელებლით, რომელიც ალკოჰოლის ცეცხლშია და გაცივებული. რეპლიკების შესრულება აუცილებელია საიმედო საშუალო მნიშვნელობის მისაღებად. შემდეგი ნაბიჯი არის ამ ფირფიტების გაშრობა მოკლე პერიოდის განმავლობაში, შემდეგ გადატრიალება და ინკუბატორში მოთავსება შესაფერის ტემპერატურაზე ზრდისთვის და განსაზღვრული ინკუბაციური პერიოდისთვის.
სურათი 02: გაშლილი ფირფიტა
ინკუბაციის შემდეგ, ფირფიტების გამოკვლევა აჩვენებს ზრდას. ერთი ან მეტი განზავებისას, ინოკულანტებში არსებული უჯრედების რაოდენობა (მაგ. 100 ან 200 მკლ) წარმოშობს 30-დან 300-მდე დისკრეტულ კოლონიას აგარის ზედაპირზე. 30-ზე ნაკლები კოლონიის რაოდენობა სტატისტიკურად არასანდოა. 300-ზე მეტი დათვლა რთული დასათვლელია და მიდრეკილია შეცდომისკენ.
რა მსგავსებაა ჩამოსხმის თეფშსა და საფენს შორის?
- Spread Plate და Pour Plate არის ორი ტექნიკა, რათა მივიღოთ ნიმუშში არსებული სიცოცხლისუნარიანი უჯრედების რაოდენობა.
- ორივე პირდაპირი მეთოდია.
- შერჩევის შეცდომები შეიძლება მოხდეს ორივე მეთოდით.
- ზრდის პირობების შეზღუდვა გავლენას ახდენს ორივე მეთოდის შედეგზე.
- ტექნიკურმა შეცდომებმა შეიძლება ხელი შეუშალოს ორივე მეთოდის საბოლოო შედეგს.
- მიუხედავად იმისა, რომ სიცოცხლისუნარიანია, ეს ორი მეთოდი არ გამოიყენება არაკულტურული ბაქტერიების გასაშენებლად.
რა განსხვავებაა დასასხმელ თეფშსა და საფენს შორის?
ჩაასხით ფირფიტა არის მიკრობული ტექნიკა ნიმუშში სიცოცხლისუნარიანი უჯრედების რაოდენობის დასათვლელად. გაშლილი ფირფიტის ტექნიკა არის მედიის ზედაპირზე გაზრდილი ბაქტერიების ჩამოთვლის კიდევ ერთი ტექნიკა. ჩასხმის ფირფიტის ტექნიკაში, პროცესია ნიმუშის დამატება დასასხმელ ფირფიტაზე გამაგრებულ საშუალო ზედაპირზე. მაგრამ, spred plate ტექნიკაში, პროცესია ნიმუშის შერევა გამდნარ აგართან და შემდეგ დაასხით იგი ფირფიტაში.
ამ ორი ტექნიკის სიზუსტესთან დაკავშირებით, დასასხმელ ფირფიტას უფრო მაღალი სიზუსტე აქვს, ვიდრე გაშლილ ფირფიტას. უფრო მეტიც, დასასხმელი ფირფიტისგან განსხვავებით, შუშის გამავრცელებელი გამოიყენება ნიმუშის თანაბრად გასავრცელებლად ზედაპირზე დაფენილ ფირფიტაზე. გარდა ამისა, დასალევი ფირფიტის გამოყენებით შესაძლებელია აერობების, ანაერობების და ფაკულტატური ანაერობების ჩამოთვლა. თუმცა, გავრცელებული ფირფიტის გამოყენებით შესაძლებელია მხოლოდ აერობების ჩამოთვლა.გარდა ამისა, გამყარებული აგარის ფირფიტები აუცილებელია გაშლილი ფირფიტის შესასრულებლად, ხოლო თხევადი გამდნარი აგარის მედია აუცილებელია ჩამოსხმის მეთოდისთვის.
რეზიუმე – დასალევი თეფში vs თეფში
ჩასხმის ფირფიტა და გაშლილი ფირფიტა არის ორი ტექნიკა მიკრობიოლოგიაში, რათა ხელი შეუწყოს მიკრობული უჯრედების დათვლას ნიმუშში. ორივე მეთოდი ეფუძნება ზრდას, ამიტომ გაზომეთ სიცოცხლისუნარიანი უჯრედები. ჩასხმის ფირფიტის დროს ნიმუშის ცნობილი მოცულობა ურევენ გამდნარ აგარს და ასხამენ თეფშში. გაშრობის დროს, ცნობილი მოცულობა ვრცელდება გამაგრებული აგარის ზედაპირზე. ეს არის განსხვავება დასასხმელ თეფშსა და საფენს შორის.
