ტრანსფორმაცია vs ტრანსფექცია
ტრანსფორმაცია და ტრანსფექცია არის ორი მარტივი ტექნიკა, რომელიც გამოიყენება უცხო გენის მასპინძელ უჯრედში შესაყვანად. თუმცა, ეს ტექნიკა დამოკიდებულია მასპინძლის ან ვექტორული სისტემების ტიპზე.
რა არის უჯრედის ტრანსფორმაცია?
ტრანსფორმაცია არის ტექნიკა, რომელიც გამოიყენება გენების საფუარის და ბაქტერიულ უჯრედებში შესაყვანად. ეს ტექნიკა ჩვეულებრივ იწვევს გენებში მემკვიდრეობით ცვლილებებს და, შესაბამისად, გენის გამოხატულება მუდმივია. ბაქტერიული ტრანსფორმაცია პირველად 1928 წელს შემოიღო ფრედერიკ გრიფიტმა. შემდეგ 1970-იანი წლების დასაწყისში ეს ტექნიკა გამოიყენეს ე.coli. E. coli-ს ტრანსფორმაციის პროცესში უჯრედები გაჟღენთილია CaCl-ის ყინულის ხსნარში2 ეს ნაბიჯი ხდის E.coli უჯრედებს კომპეტენტურს. ამის შემდეგ კომპეტენტური უჯრედები ურევენ პლაზმიდურ დნმ-ს და ათავსებენ ყინულზე 20-30 წუთის განმავლობაში. შემდეგ ხდება მოკლე სითბური შოკი, რათა მოხდეს დნმ-ის უჯრედში გადატანა. საბოლოოდ, უჯრედები მოთავსებულია მკვებავ ბულიონში და ინკუბირებულია 37 °C ტემპერატურაზე 60-90 წუთის განმავლობაში პლაზმიდების დასამკვიდრებლად. ამ ნაბიჯების წარმატებით დასრულების შემდეგ, ტრანსფორმირებული უჯრედები შეიძლება განთავსდეს უჯრედების გამრავლებისთვის შესაფერის მედიაზე. ვინაიდან ტრანსფორმაცია განიხილება არაეფექტურ ტექნიკად, ის არ შეიძლება გამოყენებულ იქნას კლონური ბანკების მოსამზადებლად.
რა არის უჯრედის ტრანსფექცია?
ტრანსფექცია არის უცხო გენის, ჩვეულებრივ, ძუძუმწოვრების უჯრედებში შეყვანის მეთოდი. არსებობს ტრანსფექციის ორი მეთოდი; კერძოდ, გარდამავალი ტრანსფექცია და სტაბილური ტრანსფექცია. გარდამავალი ტრანსფექციის დროს გენის ექსპრესია ხელმისაწვდომია შეზღუდული დროით; ამრიგად, გენის ცვლილება იწვევს დროებით ექსპრესიას.ტრანსფექციის ეს მეთოდი მარტივი და სწრაფია; ამიტომ მისი გამოყენება შესაძლებელია რუტინულად. გარდამავალი ტრანსფექციის ერთი ნაკლი არის პროტეინის სინთეზის ფართომასშტაბიანი სისტემებისთვის გამოყენების სირთულე.
სტაბილური ტრანსფექციის დროს, სამიზნე გენი ინტეგრირებულია მასპინძელი უჯრედის გენომში და, შესაბამისად, გენის ექსპრესია მუდმივია, გარდამავალი ტრანსფექციისგან განსხვავებით.
რა განსხვავებაა ტრანსფორმაციასა და ტრანსფექციას შორის?
• ტრანსფორმაცია არის გენის შეყვანა პროკარიოტულ უჯრედში (ბაქტერიული და საფუარი), ხოლო ტრანსფექციას ჩვეულებრივ უწოდებენ გენის შეყვანას ძუძუმწოვრების უჯრედში.
• ტრანსფორმაცია იწვევს გენებში მემკვიდრეობით ცვლილებას, მაშინ როდესაც ტრანსფექციამ შეიძლება გამოიწვიოს გენების დროებითი ექსპრესია ან მუდმივი ცვლილებები.
