ძირითადი განსხვავება – გარდამავალი და სტაბილური ტრანსფექცია
ტრანსფექცია არის პროცესი, რომელიც ჩართულია ევკარიოტული უჯრედების გენის გადაცემაში ქიმიური ან ფიზიკური მეთოდების გამოყენებით. ტრანსფექცია შეიძლება დაიყოს ორ ძირითად ტიპად, სახელად გარდამავალი ტრანსფექცია და სტაბილური ტრანსფექცია. გარდამავალი ტრანსფექციის დროს, ინტერესის გენი ვერ ინტეგრირდება მასპინძლის გენომთან და დროებით გამოხატულია მასპინძლის შიგნით მოკლე ვადით, მაშინ როდესაც, სტაბილური ტრანსფექციისას, ინტერესის გენი ინტეგრირდება მასპინძლის გენომთან და შენარჩუნებულია დიდი ხნის განმავლობაში რამდენიმე თაობაში.. ეს არის მთავარი განსხვავება გარდამავალ და სტაბილურ ტრანსფექციას შორის.ორივე შემთხვევაში ტრანსფექცია წარმატებულია და გენები გამოხატულია.
რა არის გარდამავალი ტრანსფექცია?
ტრანსფექცია არის მნიშვნელოვანი ინსტრუმენტი ევკარიოტულ უჯრედებში გენების ჩასართავად. ტრანსფექციის ორ ტიპს შორის, გარდამავალი ტრანსფექცია არის გენის გადაცემის საერთო გზა. ვექტორის მეშვეობით უცხო გენები გარდაიქმნება მასპინძელ უჯრედებში. მას შემდეგ რაც უცხო დნმ შედის მასპინძელ უჯრედში, მას ორი ვარიანტი აქვს. მას შეუძლია ან ინტეგრირდეს მასპინძლის გენომთან და გამრავლდეს, ან დარჩეს შიგნით გენომში ინტეგრაციის გარეშე. გარდამავალი ტრანსფექცია ავლენს ჩასმული გენების დროებით ექსპრესიას მასპინძლის გენომში ინტეგრაციის გარეშე. გენები გამოხატავს და აწარმოებს კოდირებულ ცილას უჯრედის დაყოფამდე. თუმცა, ინტეგრაციის შეუძლებლობის გამო, მას არ შეუძლია გამრავლება და მომავალ თაობებში შესვლა. ამ ტიპის ტრანსფექცია წარმატებულია მოკლე დროში. უჯრედის გაყოფის დროს ან სხვა ფაქტორების გამო, უცხო დნმ ექვემდებარება დეგრადაციას. გარდამავალი ტრანსფექცია ნაჩვენებია, როდესაც უცხო დნმ არის ძლიერ დახვეული დნმ-ის სახით.
სურათი 01: გარდამავალი ტრანსფექცია
რა არის სტაბილური ტრანსფექცია?
სტაბილური ტრანსფექცია აჩვენებს უცხო გენის წარმატებულ ინტეგრაციას მასპინძლის გენომში. მას შემდეგ, რაც უცხო დნმ შედის მასპინძელ უჯრედში, უცხო დნმ-ის ნაწილი ინტეგრირდება მასპინძელ გენომთან და ხდება მისი ნაწილი. მაშასადამე, უცხო დნმ ასევე იმეორებს და გადადის მომავალ თაობებში, როდესაც მასპინძელი გენომი რეპლიკაცია ხდება. ამ ტიპის ტრანსფექცია რთული და იშვიათია. თუმცა, გენომში სტაბილური ტრანსფექციის გამო, ეს თვისება შენარჩუნებულია რამდენიმე თაობის უფრო ხანგრძლივი პერიოდის განმავლობაში.
სტაბილური ტრანსფექცია რთული პროცესია და მოითხოვს დნმ-ის ეფექტურ მიწოდებას და გენომში უცხო დნმ-ის უჯრედების შეძენას. ამრიგად, ხაზოვანი დნმ ხელს უწყობს სტაბილურ ტრანსფექციას, ვიდრე წრიული დნმ.თუმცა, ტრანსფექციის სტაბილური მაჩვენებელი დაახლოებით ერთია 104 ტრანსფორმირებულ უჯრედში. სტაბილური ტრანსფექცია შეიძლება შეინიშნოს სელექციური მარკერის კოტრანსფორმაციით და ხელოვნური გადარჩევის ჩატარებით გარემოზე.
სურათი 02: სტაბილური ტრანსფექცია
რა განსხვავებაა გარდამავალ და სტაბილურ ტრანსფექციას შორის?
გარდამავალი vs სტაბილური ტრანსფექცია |
|
| უცხო დნმ არ ინტეგრირდება მასპინძლის გენომში. | უცხო დნმ ინტეგრირდება მასპინძლის გენომთან და ხდება მისი ნაწილი. |
| რეპლიკაცია ჰოსტში | |
| გარდამავალად გადაცემული გენები არ მრავლდება მასპინძელში. ამიტომ გენები არ გადაეცემა შემდეგ თაობებს. | გენები მრავლდება მასპინძელში და გადაეცემა მომავალ თაობებს. |
| გენის გამოხატვის დროის ხანგრძლივობა | |
| გენები გამოხატულია სასრული დროის განმავლობაში და ამის შემდეგ ისინი ნადგურდებიან. | გენები ხდება გენომის ნაწილი და გამოხატულია თაობაში დიდი ხნის განმავლობაში. |
| გამოიყენე | |
| ეს სასარგებლოა გენების ან გენის პროდუქტების მოკლევადიანი ექსპრესიის ეფექტის შესასწავლად. | ეს სასარგებლოა გენის გამოხატვის ეფექტის გრძელვადიანი შესასწავლად. |
| ტრანსფექციის გამოვლენა | |
| გენები გამოხატულია და მათი აღმოჩენა ადვილად შესაძლებელია რეპორტიორი გენის ჩასმით. | სტაბილური ტრანსფექცია შეიძლება ადვილად გამოვლინდეს არჩევადი მარკერის ჩასმით და მედიაზე ხელოვნური შერჩევით. |
| შემთხვევა და პროცესი | |
| გარდამავალი ტრანსფექცია ხშირია და არ არის რთული შესასრულებელი. | სტაბილური ტრანსფექცია იშვიათია და რთული შესასრულებელი. |
| დნმ-ის ბუნება | |
| უაღრესად გადახვეული დნმ შესაფერისია გარდამავალი ტრანსფექციისთვის. | წრფივი დნმ შესაფერისია სტაბილური ტრანსფექციისთვის. |
| აპლიკაციები | |
| გამოიყენება გენების დათრგუნვის ან ინჰიბიტორული რნმ-ებით გაჩუმების კვლევებისთვის, ცილების წარმოების მცირე მასშტაბით | ეს გამოიყენება ცილების წარმოებისთვის ფართომასშტაბიანი, გრძელვადიანი ფარმაკოლოგიური კვლევებისთვის, გენური თერაპიისთვის, გრძელვადიანი გენეტიკური რეგულირების მექანიზმების კვლევისთვის |
შეჯამება – გარდამავალი vs სტაბილური ტრანსფექცია
გარდამავალი და სტაბილური ტრანსფექციები არის ტრანსფექციების ორი ტიპი, რომელიც ნაჩვენებია ევკარიოტულ უჯრედებში გენის გადაცემის დროს არავირუსული სისტემებით. ტრანსფორმირებული უცხო დნმ არ არის ინტეგრირებული მასპინძლის გენომთან გარდამავალი ტრანსფექციისას, ხოლო ის ინტეგრირდება მასპინძლის გენომთან სტაბილურ ტრანსფექციაში. წრიული დახვეული დნმ ნაჩვენებია გარდამავალი ტრანსფექცია, ხოლო ხაზოვანი დნმ უპირატესობას ანიჭებს სტაბილურ ტრანსფექციას. ეს არის განსხვავება გარდამავალ და სტაბილურ ტრანსფექციას შორის. თუმცა გარდამავალი ტრანსფექცია უფრო ხშირი და მარტივია სტაბილურ ტრანსფექციასთან შედარებით. მაგრამ ორიდან ერთის შერჩევა დამოკიდებულია გენის გადაცემის მიზანსა და კვლევითი პროექტის ხანგრძლივობაზე.
