ძირითადი განსხვავება - იმუნოფლუორესცენცია და იმუნოჰისტოქიმია
დაავადების დიაგნოსტიკა, რომელიც იყენებს მოლეკულურ ბიოლოგიურ მეთოდებს, გახდა კლინიკური ლაბორატორიული ტექნოლოგიის განვითარებადი სფერო. იგი მოიცავს ყველა ტესტს და მეთოდს დაავადების იდენტიფიცირებისა და დაავადების მიზეზის გასაგებად ორგანიზმში დნმ-ის, რნმ-ის ან გამოხატული ცილების ანალიზით. მოლეკულური დიაგნოსტიკის სწრაფმა მიღწევებმა საშუალება მისცა საბაზისო კვლევა გადამდები და არაგადამდები დაავადებების შესახებ. ისინი გამოიყენება დაავადების თანმიმდევრობის ან გამოხატვის დონის ცვლილებების დასადგენად გადამწყვეტ გენებში ან პროტეინებში, რომლებიც მონაწილეობენ დაავადებაში. იმუნოფლუორესცენცია (IF) და იმუნოჰისტოქიმია (IHC) არის ორი ასეთი ფართოდ გამოყენებული ტექნიკა კიბოს ბიოლოგიაში. IF არის IHC-ის ტიპი, სადაც ფლუორესცენციის გამოვლენის მეთოდი გამოიყენება მონოკლონური და პოლიკლონური ანტისხეულების გასაანალიზებლად, ხოლო IHC იყენებს ქიმიურ მეთოდებს მონოკლონური და პოლიკლონური ანტისხეულების გამოსავლენად. ეს არის მთავარი განსხვავება IF-სა და IHC-ს შორის.
რა არის იმუნოფლუორესცენცია (IF)?
იმუნოფლუორესცენცია არის გამოვლენის ტექნიკა, სადაც ანალიზში გამოყენებული ანტისხეულები ეტიკეტირებულია ფლუორესცენტური საღებავების ან ფლუორესცენტური ცილების გამოყენებით გამოვლენის მიზნით. ეტიკეტირებული მეორადი ანტისხეულები შეიძლება გამოიწვიოს არასასურველი ფონური სიგნალები; ამიტომ, IF ტექნიკა ეფუძნება ამჟამად პირველადი ანტისხეულის მარკირებას, რათა თავიდან იქნას აცილებული არასასურველი სიგნალები გამოვლენის დროს. ამ ტექნიკის მეშვეობით თავიდან აიცილება პირველადი და მეორადი ანტისხეულების არასპეციფიკური შეკავშირება და ეს უფრო სწრაფია, რადგან მეორადი ინკუბაციის საფეხური არ არის ჩართული. ასევე გაუმჯობესებულია მონაცემთა ხარისხი.
სურათი 01: ორმაგი იმუნოფლუორესცენციული შეღებვა BrdU, NeuN და GFAP
ფტოროქრომები ან ფლუორესცენტური საღებავები არის ნაერთები, რომლებსაც შეუძლიათ შთანთქას რადიაცია, სასურველია ულტრაიისფერი გამოსხივება, რომელიც აღგზნებულია. როდესაც ნაწილაკები აღგზნებული მდგომარეობიდან მიაღწევენ ძირითად მდგომარეობას, ისინი ასხივებენ გამოსხივებას, რომელიც იჭერს და აღმოაჩენს დეტექტორს, რათა შექმნას სპექტრი. ძალიან მნიშვნელოვანია, რომ ფლუორესცენტური ეტიკეტები იყოს თავსებადი და სტაბილური კონკრეტული რეაქციისთვის და ის სათანადოდ უნდა იყოს კონიუგირებული ანტისხეულთან ზუსტი შედეგების მისაღებად. ერთ-ერთი ყველაზე ხშირად გამოყენებული ფტოროქრომია ფლუორესცეინის იზოთიოციანატი (FITC), რომელიც მწვანე ფერისაა, შთანთქმის და ემისიის პიკური ტალღის სიგრძით, შესაბამისად, 490 ნმ და 520 ნმ. როდამინი, სხვა აგენტი, რომელიც გამოიყენება IF-ში, არის წითელი ფერის და აქვს მკაფიო შთანთქმის და ემისიის პიკური ტალღის სიგრძე 553 ნმ და 627 ნმ.
რა არის იმუნოჰისტოქიმია (IHC)?
IHC არის მოლეკულური ტესტირების მეთოდი, რომელიც გამოიყენება სამიზნე უჯრედში ანტიგენის არსებობის იდენტიფიცირებისა და დადასტურების მიზნით. სამიზნე უჯრედი შეიძლება იყოს ინფექციური ნაწილაკი, მიკრობული პათოგენი ან ავთვისებიანი სიმსივნური უჯრედი. IHC იყენებს მონოკლონურ და პოლიკლონურ ანტისხეულებს სამიზნე უჯრედების უჯრედის ზედაპირზე არსებული ანტიგენების არსებობის დასადგენად. ტექნიკა ეფუძნება ანტიგენ-ანტისხეულის შეკავშირებას. გამოვლენის მარკერი კონიუგირებულია ამ ანტისხეულებთან, რათა გამოავლინოს კონკრეტული ანტიგენის არსებობა ან არარსებობა. ეს მარკერები შეიძლება იყოს ქიმიური მარკერები, როგორიცაა ფერმენტები, ფლუორესცენტურად მონიშნული ანტისხეულები ან რადიო მარკირებული ანტისხეულები.
სურათი 02: თაგვი-ტვინის ნაჭერი შეღებილი იმუნოჰისტოქიმიით
IHC-ის ყველაზე პოპულარული გამოყენებაა კიბოს უჯრედების ბიოლოგიაში ავთვისებიანი სიმსივნეების არსებობის დასადგენად, მაგრამ ის ასევე გამოიყენება ინფექციური დაავადებების გამოსავლენად.
რა მსგავსებაა იმუნოფლუორესცენციასა და იმუნოჰისტოქიმიას შორის?
- იმუნოფლუორესცენცია და იმუნოჰისტოქიმია მიმდინარეობს in vitro პირობებში.
- ორივე ტექნიკა დაფუძნებულია ანტიგენ-ანტისხეულზე
- ორივე ძალიან სწრაფი ტექნიკაა.
- ტექნიკის შედეგები რეპროდუცირებადია.
- ორივეს აქვს გაუმჯობესებული მონაცემთა ხარისხი.
- ეს ტექნიკა გამოიყენება კიბოსა და ინფექციური დაავადებების დიაგნოსტიკაში.
რა განსხვავებაა იმუნოფლუორესცენციასა და იმუნოჰისტოქიმიას შორის?
იმუნოფლუორესცენცია vs იმუნოჰისტოქიმია |
|
| IF არის გამოვლენის ტექნიკა, სადაც ანალიზში გამოყენებული ანტისხეულები ეტიკეტირებულია ფლუორესცენტური საღებავების ან ფლუორესცენტური ცილების გამოყენებით. | IHC არის გამოვლენის ტექნიკა, სადაც ანალიზში გამოყენებული ანტისხეულები ეტიკეტირებულია ქიმიკატების ან რადიოაქტიური ელემენტების გამოყენებით გამოსავლენად. |
| სიზუსტე | |
| სიზუსტე უფრო მაღალია IF ტექნიკაში IHC-თან შედარებით. | სიზუსტე უფრო დაბალია IHC-ში. |
| სპეციფიკურობა | |
| თუ უფრო კონკრეტულია. | IHC ნაკლებად სპეციფიკურია. |
რეზიუმე - იმუნოფლუორესცენცია vs იმუნოჰისტოქიმია
მოლეკულურმა მექანიზმებმა მოიტანა მრავალი ცვლილება მედიცინის სფეროში, რამაც გამოიწვია მოლეკულური ტესტირების მოწინავე მეთოდები, რამაც გამოიწვია რევოლუციები დიაგნოსტიკის სფეროში.ამ გამოგონებებმა განაპირობა დაავადების სწრაფი და ზუსტი იდენტიფიკაცია და დადასტურება, რითაც შესაძლებელი გახდა მედიკამენტების წარმატებული ადმინისტრირება და წარმოება. ეს ტექნიკა ასევე გამოიყენება ფარმაკოლოგიაში, რათა აღმოაჩინონ წამლების სამიზნეები და დაადასტურონ პრეპარატის ფარმაკოკინეტიკური თვისებები წამლის მეტაბოლიზმის დროს. IF და IHC არის ორი დიაგნოსტიკური მეთოდი, რომლებიც დაფუძნებულია ანტიგენისა და ანტისხეულების შებოჭვის კონცეფციაზე, თუმცა გამოვლენის რეჟიმი ორივე ტექნიკაში განსხვავდება. IF იყენებს ფლუორესცენციის პრინციპს ანტიგენის გამოსავლენად და IHC იყენებს ქიმიური კონიუგაციის კონცეფციას ანტიგენის გამოსავლენად. ეს არის განსხვავება IF-სა და IHC-ს შორის.
ჩამოტვირთეთ იმუნოფლუორესცენციის PDF ვერსია იმუნოჰისტოქიმიის წინააღმდეგ
შეგიძლიათ ჩამოტვირთოთ ამ სტატიის PDF ვერსია და გამოიყენოთ იგი ოფლაინ მიზნებისთვის ციტირების შენიშვნის მიხედვით. გთხოვთ გადმოწეროთ PDF ვერსია აქ განსხვავება იმუნოფლუორესცენციასა და იმუნოჰისტოქიმიას შორის.
