საკვანძო განსხვავება კონკურენტულ და არაკონკურენტულ ELISA-ს შორის არის ის, რომ კონკურენტული ELISA იყენებს ინჰიბიციურ ანტიგენს, ხოლო არაკონკურენტული ELISA არ იყენებს ინჰიბიციურ ანტიგენს ანალიზისთვის.
ფერმენტთან დაკავშირებული იმუნოსორბენტული ანალიზი (ELISA) არის იმუნოლოგიური ანალიზი, რომელიც აღმოაჩენს სხვადასხვა სამიზნეებს, როგორიცაა ანტისხეულები, ანტიგენები, ცილები და გლიკოპროტეინები. ეს არის სწრაფი და მარტივი შესასრულებელი მეთოდი. აქედან გამომდინარე, ის უფრო ხშირად გამოიყენება კვლევისა და დიაგნოსტიკური მიზნებისთვის. ELISA მოიცავს ფერმენტების გამოყენებას და ანტისხეულებისა და ანტიგენების სპეციფიკურ შეკავშირებას. იმის მიხედვით, თუ როგორ ხდება რეაქციები, არსებობს ELISA-ს ოთხი ტიპი: პირდაპირი ELISA, არაპირდაპირი ELISA, სენდვიჩ ELISA და ინჰიბიციური ELISA.პირდაპირი, არაპირდაპირი და სენდვიჩური ELISA არის არაკონკურენტული ELISA-ს ტიპები, ხოლო ინჰიბიციური ELISA არის სრული ELISA-ს ტიპი. ამ სტატიის მთავარი მიზანია განიხილოს განსხვავება კონკურენტულ და არაკონკურენტულ ELISA-ს შორის.
რა არის კონკურენტული ELISA?
კონკურენტული ELISA ზომავს ანტიგენის კონცენტრაციას ნიმუშში სიგნალის ჩარევის გამოვლენის გზით. აქ ანალიზი იყენებს ინჰიბიტორ ანტიგენს. აქედან გამომდინარე, ეს არის ELISA ინჰიბიციის ტიპი. ამ პროცედურის დროს, ნიმუშში არსებული ანტიგენები კონკურენციას უწევენ შერჩეულ საცნობარო ანტიგენს ეტიკეტირებული ანტისხეულების სპეციფიკურ რაოდენობასთან დასაკავშირებლად. გარდა ამისა, ეს პროცედურა იწყება ნიმუშის ინკუბაციით, ეტიკეტირებული ანტისხეულების ჭარბი რაოდენობით. ასევე, საცნობარო ანტიგენი წინასწარ უნდა იყოს დაფარული მრავალჯერადი ჭაბურღილის საანალიზო ფირფიტაზე. შემდეგ ნიმუშის ნარევი უნდა დაემატოს საანალიზო ფირფიტას, რომელიც შეიცავს საცნობარო ანტიგენს. თავისუფალი ანტისხეულები დაუკავშირდება საცნობარო ანტიგენს ნიმუშში ანტიგენის ოდენობიდან გამომდინარე.აქედან გამომდინარე, თუ მეტი ნიმუში ანტიგენია, ნაკლები საცნობარო ანტიგენი იქნება გამოვლენილი. ამრიგად, ის ქმნის უფრო სუსტ სიგნალს.
სურათი 01: ELISA
საპირისპიროდ, როდესაც ნიმუში შეიცავს ანტიგენის ნაკლებ რაოდენობას, უფრო და უფრო მეტი საცნობარო ანტიგენი დაიკავებს ანტისხეულებს და მისცემს ძლიერ სიგნალს. ვინაიდან კონკურენტული ELISA იძლევა უფრო ძლიერ სიგნალს, როდესაც ნიმუში შეიცავს ანტიგენების დაბალ რაოდენობას, კონკურენტული ELISA არის ძალიან მგრძნობიარე ანალიზი, თუნდაც მცირე რაოდენობის ანტიგენების ნიმუშებისთვის.
ზოგიერთ კონკურენტულ ELISA კომპლექტში, ეტიკეტირებული ანტიგენი გამოიყენება ეტიკეტირებული ანტისხეულების ნაცვლად. აქ, ეტიკეტირებული ანტიგენი და ნიმუშის ანტიგენი კონკურენციას გაუწევენ პირველად ანტისხეულთან შეკავშირებისთვის. ანალოგიურად, როდესაც ნიმუშში ანტიგენის რაოდენობა დაბალია, ეტიკეტირებული ანტიგენის რაოდენობა, რომელიც აკავშირებს ანტისხეულებს, უფრო მაღალი იქნება და უფრო ძლიერ სიგნალს შექმნის.
რა არის არაკონკურენტული ELISA?
ELISA-ს ოთხ ტიპს შორის, სამი ტიპია არაკონკურენტული ELISA. ეს არის პირდაპირი ELISA, არაპირდაპირი ELISA და სენდვიჩ ELISA. სამივე ფორმატი მუშაობს ELISA-ს საერთო პრინციპით, მცირედი განსხვავებებით მათ მეთოდოლოგიაში.
პირდაპირი ELISA იყენებს ფერმენტის ეტიკეტირებულ პირველად ანტისხეულს. ამიტომ, მას არ სჭირდება მეორადი ანტისხეულები. ამრიგად, პირდაპირი ELISA უფრო სწრაფია, ვიდრე სხვა ტიპის ELISA. პირველადი ანტისხეული პირდაპირ დაუკავშირდება იმობილიზებულ სამიზნე ანტიგენს, რომელიც იმყოფება ფირფიტაში. ამრიგად, ფერმენტ-სუბსტრატის რეაქცია მოხდება, რომელიც წარმოქმნის ხილულ სიგნალს.
სურათი 02: სენდვიჩი ELISA
პირდაპირი ELISA-სგან განსხვავებით, არაპირდაპირი ELISA იყენებს არა მარკირებულ პირველად ანტისხეულს და ფერმენტის მარკირებულ მეორად ანტისხეულს.მას შემდეგ, რაც პირველადი ანტისხეული უკავშირდება იმობილიზებულ ანტიგენს, მეორადი ანტისხეული უკავშირდება პირველად ანტისხეულს. მეორადი ანტისხეულის ფერმენტი რეაგირებს ანტიგენთან და წარმოქმნის ხილულ სიგნალს. Sandwich ELISA განსხვავდება როგორც პირდაპირი, ასევე არაპირდაპირი ELISA-სგან. აქ ანტისხეული იმობილირდება საანალიზო ფირფიტის კედელზე.
რა მსგავსებაა კონკურენტულ და არაკონკურენტულ ELISA-ს შორის?
- კონკურენტული და არაკონკურენტული ELISA არის იმუნოსორბენტული ანალიზის ორი ტიპი.
- ეს არის ძალიან მოქნილი და მგრძნობიარე ტექნიკა.
- გარდა ამისა, კონკურენტული და არაკონკურენტული ELISA არის ფერმენტთან დაკავშირებული იმუნოანალიზი.
- ასევე, ორივე მეთოდი ქმნის სიგნალს ფერმენტ-სუბსტრატის რეაქციის გამო.
რა განსხვავებაა კონკურენტულ და არაკონკურენტულ ELISA-ს შორის?
კონკურენტული ELISA არის ELISA-ს ტიპი, რომელიც ეყრდნობა დასრულებას ანალიზურ ანტიგენსა და ეტიკეტირებულ ანტიგენს შორის სპეციფიკური ანტისხეულების შეზღუდული რაოდენობით.მეორეს მხრივ, ასეთი კონკურენცია არ არსებობს ინტერესის ანტიგენსა და საცნობარო ანტიგენს შორის არაკონკურენტულ ELISA-ში. ამრიგად, ეს არის მთავარი განსხვავება კონკურენტულ და არაკონკურენტულ ELISA-ს შორის. ანალოგიურად, კონკურენტული ELISA არის ინჰიბიციური ELISA, ხოლო არაკონკურენტული ELISA არ არის ინჰიბიციური ELISA. ასე რომ, ეს ასევე არის განსხვავება კონკურენტულ და არაკონკურენტულ ELISA-ს შორის.
უფრო მეტიც, კონკურენტული ELISA უფრო შესაფერისია ინტერესის ანტიგენის დაბალი რაოდენობის გასაზომად. მგრძნობიარე მეთოდია. მეორეს მხრივ, არაკონკურენტული ELISA არ არის დამოკიდებული ნიმუშში არსებული ანტიგენების რაოდენობაზე. ამრიგად, ეს ასევე არის განსხვავება კონკურენტულ და არაკონკურენტულ ELISA-ს შორის.
ქვემოთ ინფოგრაფიკა განმარტავს განსხვავებას კონკურენტულ და არაკონკურენტულ ELISA-ს შორის შედარებით.
რეზიუმე – კონკურენტული წინააღმდეგ არაკონკურენტული ELISA
კონკურენტული და არაკონკურენტული ELISA არის ELISA ან ფერმენტთან დაკავშირებული იმუნოსორბენტული ანალიზის ორი ძირითადი ტიპი. კონკურენტულ და არაკონკურენტულ ELISA-ს შორის განსხვავების შეჯამებისას, კონკურენტული ELISA ეყრდნობა კონკურენციას ინტერესის ანტიგენსა და საცნობარო ანტიგენს შორის ანტისხეულების შეზღუდული რაოდენობის მიმართ. ამიტომ, კონკურენტულ ELISA-ს ასევე უწოდებენ ინჰიბიციურ ELISA-ს. მეორეს მხრივ, არაკონკურენტული ELISA არ ეყრდნობა კონკურენციას სამიზნე ანტიგენებსა და საცნობარო ანტიგენებს შორის. იგი იყენებს ეტიკეტირებული სპეციფიკური ანტისხეულების ჭარბი რაოდენობას ინტერესის მქონე ანალიტის მიმართ. ამრიგად, ეს არის მთავარი განსხვავება კონკურენტულ და არაკონკურენტულ ELISA-ს შორის. პირდაპირი ELISA, არაპირდაპირი ELISA და სენდვიჩ ELISA არის არაკონკურენტული ELISA-ს სამი ძირითადი ტიპი.
