მთავარი განსხვავება ქრომატოფოკუსირებასა და იზოელექტრო ფოკუსირებას შორის არის ის, რომ ქრომატოფოკუსირება არის სვეტის ქრომატოგრაფიის მეთოდი, რომელიც იყენებს იონგაცვლის ფისებს, ხოლო იზოელექტრული ფოკუსირება არის ელექტროფორეზის ტექნიკის ტიპი, რომელიც იყენებს იმობილიზაციას pH გრადიენტის გელებს..
ქრომატოფოკუსირება და იზოელექტრული ფოკუსირება არის ორი ტექნიკა, რომელიც გამოყოფს ცილებს მათი იზოელექტრული წერტილების მიხედვით. როგორც ქრომატოფოკუსირებას, ასევე იზოელექტრიკულ ფოკუსირებას აქვს დიდი გადაჭრის ძალა. ქრომატოფოკუსირება არის მაღალი გარჩევადობის სვეტის ქრომატოგრაფიის მეთოდი, ხოლო იზოელექტრული ფოკუსირება არის ელექტროფორეზული გამოყოფის მეთოდი.უფრო მეტიც, ქრომატოფოკუსირება არ იყენებს ელექტრულ ველს, ხოლო იზოელექტრული ფოკუსირება საჭიროებს ელექტრული ველის.
რა არის ქრომატოფოკუსირება?
ქრომატოფოკუსირება არის მაღალი გამოსხივების ქრომატოგრაფიის ტიპი, რომელიც გამოყოფს ცილებს მათი იზოელექტრული წერტილის განსხვავებების მიხედვით. იგი იყენებს იონგაცვლის ფისოვანი სვეტს და შიგნიდან განვითარებულ pH გრადიენტს. იზოელექტრული ფოკუსირებისგან განსხვავებით, ქრომატოფოკუსირება არ მოიცავს ელექტრულ ველს. ქრომატოფოკუსირება არის გამწმენდის მძლავრი ტექნიკა, რომელსაც შეუძლია გადაჭრას ძალიან მსგავსი მოლეკულები, რომლებიც განსხვავდება მხოლოდ 0,02 pH ერთეულით. ამიტომ, ქრომატოფოკუსირება საუკეთესოდ შეეფერება როგორც საბოლოო გაპრიალება, როდესაც საჭიროა მაღალი გარჩევადობა ძალიან მსგავსი კომპონენტების გამოყოფისას.
ქრომატოფოკუსირებისას, ნიმუში გამოიყენება სვეტზე საწყისი ბუფერთან შერევით. პროტეინები, რომლებიც იზოელექტრული წერტილის ზემოთ pH-ზე არიან, უარყოფითად არიან დამუხტული და ისინი რჩებიან სვეტის ზედა ნაწილთან, ხოლო სხვა ცილები, რომლებიც არიან pH-ზე მათი იზოელექტრული წერტილის ქვემოთ, მიგრირებენ სვეტის ქვემოთ.ყველაზე მაღალი იზოელექტრული წერტილის მქონე ცილა პირველ რიგში გამოირეცხება, ხოლო ყველაზე დაბალი იზოელექტრული წერტილის მქონე ცილა ბოლო სვეტიდან. ამ ტექნიკაზე გავლენას ახდენს რამდენიმე ფაქტორი, როგორიცაა ცილის ნალექი და pH გრადიენტის წრფივობა.
რა არის იზოელექტრული ფოკუსირება?
იზოელექტრული ფოკუსირება არის ტექნიკა, რომელიც გამოყოფს სხვადასხვა მოლეკულებს მათი იზოელექტრული წერტილის მიხედვით. იგი ასევე ცნობილია როგორც ელექტროფოკუსირება. ეს ტექნიკა ხშირად გამოიყენება გელში ცილების გამოყოფისთვის. იზოელექტრული ფოკუსირებისას, ნიმუშს ემატება იმობილიზებული pH გრადიენტის (IPG) გელები. IPG გელი არის აკრილამიდის გელის მატრიცა, რომელიც კოპოლიმერიზებულია pH გრადიენტით. ცილები მიგრირებენ კათოდისკენ, სანამ არ იპოვიან თავიანთი იზოელექტრული წერტილების pH-ის ზონას. როდესაც ცილა აღწევს pH-ს, რომელსაც არ აქვს წმინდა მუხტი, მიგრაცია წყდება და ქმნის სტაციონალურ ზოლს. ანალოგიურად, თითოეული ცილა იძლევა ზოლს pH გრადიენტის წერტილში, რომელიც შეესაბამება მის იზოელექტრული წერტილის.
სურათი 01: იზოელექტრული ფოკუსირება
იზოელექტრული ფოკუსირება არის გელის ორგანზომილებიანი ელექტროფორეზის პირველი ნაბიჯი. ამ ტექნიკით, ცილები ჯერ გამოყოფილია მათი იზოელექტრული წერტილების მიხედვით იზოელექტრული ფოკუსირებით და შემდეგ მათი მოლეკულური წონის მიხედვით SDS-PAGE-ის მეშვეობით.
რა მსგავსებაა ქრომატოფოკუსირებასა და იზოელექტრიკულ ფოკუსირებას შორის?
- ქრომატოფოკუსირება და იზოელექტრული ფოკუსირება ორი უაღრესად გადაჭრის მეთოდია.
- ორივე დაფუძნებულია ცილების იზოელექტრიკულ წერტილზე.
- ეს ტექნიკა იყენებს pH გრადიენტს.
- ორივე პროცედურა ინფორმაციულია ადამიანის ჰემოგლობინის ვარიანტების დახასიათებისთვის.
- მათ შეუძლიათ ამოხსნან მოლეკულები, სადაც pI მნიშვნელობები განსხვავდება 0,02 pH ერთეულით.
რა განსხვავებაა ქრომატოფოკუსირებასა და იზოელექტრიკულ ფოკუსირებას შორის?
ქრომატოფოკუსირება არის მაღალი გარჩევადობის სვეტის ქრომატოგრაფიის ტექნიკა, რომელიც გამოყოფს ცილებს მათი იზოელექტრული წერტილის მიხედვით. ამის საპირისპიროდ, იზოელექტრული ფოკუსირება არის ელექტროფორეზული ტექნიკა, რომელიც გამოყოფს ცილებს მათი იზოელექტრული წერტილის მიხედვით ელექტრული ველის გამოყენებით კაპილარში წარმოქმნილი pH გრადიენტის გასწვრივ. ასე რომ, ეს არის მთავარი განსხვავება ქრომატოფოკუსირებასა და იზოელექტრიკულ ფოკუსირებას შორის.
კიდევ ერთი განსხვავება ქრომატოფოკუსირებასა და იზოელექტრული ფოკუსირებას შორის არის ის, რომ ქრომატოფოკუსირება არ მოიცავს ელექტრულ ველს, ხოლო იზოელექტრული ფოკუსირება საჭიროებს ელექტრული ველის.
რეზიუმე – ქრომატოფოკუსირება იზოელექტრული ფოკუსირების წინააღმდეგ
ქრომატოფოკუსირება და იზოელექტრული ფოკუსირება ორი მსგავსი ტექნიკაა, რომლებსაც აქვთ მოლეკულების, განსაკუთრებით ძალიან მსგავსი მოლეკულების მაღალი გადაწყვეტის უნარი. ქრომატოფოკუსირება არის მაღალი გარჩევადობის სვეტის ქრომატოგრაფიის ტექნიკა, ხოლო იზოელექტრული ფოკუსირება ელექტროფორეზის მეთოდია. ქრომატოფოკუსირება არ მოიცავს ელექტრულ ველს, განსხვავებით იზოელექტრული ფოკუსირებისგან. ამრიგად, ეს აჯამებს განსხვავებას ქრომატოფოკუსირებასა და იზოელექტრიკულ ფოკუსირებას შორის.
