ძირითადი განსხვავება დნმ-სა და რნმ-ის იზოლაციას შორის არის ის, რომ დნმ-ის იზოლაცია არის პროცედურა, სადაც ნუკლეინის მჟავის ტიპი, რომელსაც დნმ ეწოდება, ამოღებულია ბიოლოგიური უჯრედიდან, ხოლო რნმ-ის იზოლაცია არის პროცედურა, სადაც ნუკლეინის მჟავის ტიპი, რომელსაც რნმ ეწოდება. ამოღებულია ბიოლოგიური უჯრედიდან.
ნუკლეინის მჟავას იზოლაცია არის საწყისი წერტილი ქვედა დინების აპლიკაციების ფართო სპექტრში. ნუკლეინის მჟავების მაღალი ხარისხი საწყის ნიმუშებში არის საკვანძო ფაქტორი შემდგომი ქვედა დინების გამოყენებისთვის. ნუკლეინის მჟავას იზოლაცია შეიძლება განისაზღვროს, როგორც საფეხურების სერია ნუკლეინის მჟავის მისაღებად სისუფთავის ნიმუშში, რომელიც შეიძლება გამოყენებულ იქნას ქვემო დინების გამოყენების სხვადასხვა საფეხურებისთვის.ნუკლეინის მჟავის ექსტრაქციის მიზანია უჯრედის მემბრანის დაშლა და ლიპიდების და ცილების მაქსიმალური ელიმინაციის მიღწევა სუფთა ნუკლეინის მჟავების მისაღებად, როგორიცაა დნმ ან რნმ.
რა არის დნმ-ის იზოლაცია?
დნმ-ის იზოლაცია არის რუტინული პროცედურა, სადაც ნუკლეინის მჟავის ტიპი, რომელსაც დნმ ეწოდება, გამოიყოფა ბიოლოგიური უჯრედიდან. დნმ-ის იზოლაცია ხორციელდება დნმ-ის ამოღებით სისხლიდან, გაყინული ქსოვილის ნიმუშებიდან და პარაფინის ქსოვილის ბლოკებიდან. დნმ-ის იზოლაციაში სამი ძირითადი ეტაპია, მათ შორის უჯრედების ლიზისი, დნმ-ის მოპოვება და ნალექი. უჯრედის ლიზისის დროს, ნიმუშის უჯრედები ერთმანეთისგან ხშირად გამოიყოფა ფიზიკური საშუალებებით, როგორიცაა დაფქვა ან მორევა და ათავსებენ მარილის შემცველ ხსნარში. ჩვეულებრივ, დადებითად დამუხტული ნატრიუმის იონები მარილში ხელს უწყობს უარყოფითად დამუხტული ფოსფატის ჯგუფების დაცვას, რომლებიც გადიან დნმ-ის ხერხემლის გასწვრივ. მოგვიანებით, სარეცხი საშუალება ემატება უჯრედის მემბრანისა და ბირთვების ლიპიდების დასაშლელად, რომლებიც ათავისუფლებენ დნმ-ს ამ მემბრანების მოშლისას.
სურათი 01: დნმ-ის იზოლაცია
დნმ-ის ექსტრაქცია ხორციელდება დნმ-ის სუფთა ნიმუშის მისაღებად. ხშირად, პროტეაზას ფერმენტს ემატება დნმ-თან ასოცირებული ცილების და სხვა ფიჭური ცილების დეგრადაცია. უფრო მეტიც, ზოგიერთი ფიჭური ნარჩენების ამოღება შესაძლებელია ნიმუშის გაფილტვრით. საბოლოოდ, დნმ-ის დალექვა ხდება ალკოჰოლის გამოყენებით. გარდა ამისა, თუ არსებობს ბევრი დნმ, პროცედურის ბოლოს შეიძლება შეინიშნოს ძუნწი თეთრი ნალექი.
რა არის რნმ-ის იზოლაცია?
რნმ-ის იზოლაცია არის პროცედურა, სადაც ნუკლეინის მჟავის ტიპი, რომელსაც ეწოდება რნმ, გამოიყოფა ბიოლოგიური უჯრედიდან. ეს პროცედურა ხშირად რთულდება უჯრედებსა და ქსოვილებში რიბონუკლეაზას ფერმენტების არსებობით, რომლებიც ანადგურებენ რნმ-ს. მოლეკულურ ბიოლოგიაში გამოიყენება რამდენიმე მეთოდი ნიმუშებიდან რნმ-ის იზოლირებისთვის, როგორიცაა გუანიდინიუმ-თიოციანატი-ფენოლ-ქლოროფორმის ექსტრაქცია.
სურათი 02: რნმ იზოლაცია
რნმ-ის იზოლაცია ჩვეულებრივ შედგება რამდენიმე ეტაპისგან, მათ შორის უჯრედების ლიზისა და ჰომოგენიზაცია, ბიოქიმიური პროცესების ჩაქრობა, ნუკლეინის მჟავის დაყოფა, რნმ-ის მიღება, უხეში გაწმენდა და რნმ-ის ხარისხის შეფასება. ფილტრის ქაღალდზე დაფუძნებული ლიზისა და გამორეცხვის მეთოდს აქვს მაღალი გამტარუნარიანობა რნმ-ის ექსტრაქციაში. გარდა ამისა, რნმ-ის მოპოვება თხევად აზოტში ნაღმტყორცნებისა და ღვეზელის გამოყენებით ასევე ძალიან სასარგებლო მეთოდია, რადგან ის ხელს უშლის რიბონუკლეაზას აქტივობას.
რა მსგავსებაა დნმ-ისა და რნმ-ის იზოლაციას შორის?
- დნმ-ისა და რნმ-ის იზოლაცია არის ნუკლეინის მჟავის იზოლაციის ორი ტიპი.
- ორივე პროცედურას აქვს მსგავსი ძირითადი საფეხურები, როგორიცაა უჯრედების ლიზი, ექსტრაქცია და გაწმენდა.
- ეს პროცედურები იზოლირებს ნუკლეინის მჟავების მნიშვნელოვან ტიპებს, რომლებსაც აქვთ რამდენიმე გამოყენება ქვემოთ.
- ისინი ტარდება ლაბორატორიულ მოწყობილობებში.
- მათი შეიძლება შესრულდეს წარმოებული კომპლექტების გამოყენებით.
რა განსხვავებაა დნმ-სა და რნმ-ის იზოლაციას შორის?
დნმ-ის იზოლაციაში, ნუკლეინის მჟავის ტიპი, რომელსაც ეწოდება დნმ, ამოღებულია ბიოლოგიური უჯრედიდან, ხოლო რნმ-ის იზოლაციაში, ნუკლეინის მჟავის ტიპი, რომელსაც ეწოდება რნმ, გამოიყოფა ბიოლოგიური უჯრედიდან. ამრიგად, ეს არის მთავარი განსხვავება დნმ-ისა და რნმ-ის იზოლაციას შორის. გარდა ამისა, დნმ-ის იზოლაცია ჩვეულებრივ ხორციელდება pH 7-დან 8-მდე, ხოლო რნმ-ის იზოლაცია ჩვეულებრივ ხორციელდება pH 4.5-ზე.
ქვემოთ მოცემული ინფოგრაფიკა წარმოგიდგენთ განსხვავებებს დნმ-ისა და რნმ-ის იზოლაციას შორის ცხრილის სახით გვერდიგვერდ შედარებისთვის.
შეჯამება - დნმ-ის წინააღმდეგ რნმ-ის იზოლაცია
დნმ და რნმ იზოლაცია არის ნუკლეინის მჟავის იზოლაციის ორი სახის პროცედურა.დნმ-ის იზოლაცია არის პროცედურა, რომლის დროსაც დნმ ამოღებულია ბიოლოგიური უჯრედიდან. რნმ-ის იზოლაცია არის პროცედურა, რომლის დროსაც რნმ გამოიყოფა ბიოლოგიური უჯრედიდან. ასე რომ, ეს არის მთავარი განსხვავება დნმ-ისა და რნმ-ის იზოლაციას შორის.
