მთავარი განსხვავება გელის ფილტრაციასა და აფინურ ქრომატოგრაფიას შორის არის ის, რომ გელის ფილტრაციის ქრომატოგრაფია დამოკიდებულია ანალიზის ნიმუშის მოლეკულურ წონაში ან ზომაში განსხვავებულობაზე, მაშინ როცა აფინური ქრომატოგრაფია დამოკიდებულია ანალიზის აფინურობაზე იმობილიზებული ლიგანდის მიმართ.
ტერმინი ქრომატოგრაფია ანალიტიკურ ქიმიაში ეხება კომპონენტების გამოყოფის პროცესს ნარევში სხვადასხვა ტექნიკის გამოყენებით. ქრომატოგრაფია არის კოლექტიური სახელი, რომელიც წარმოადგენს გამოყოფის სხვადასხვა მეთოდს.
რა არის გელის ფილტრაციის ქრომატოგრაფია?
გელის ფილტრაციის ქრომატოგრაფია არის ანალიტიკური ტექნიკა, რომლის დროსაც კომპონენტების გამოყოფა დამოკიდებულია მოლეკულურ წონაში ან ზომაში განსხვავებაზე. ეს ტექნიკა ასევე ცნობილია როგორც ზომის გამორიცხვის ქრომატოგრაფია ან მოლეკულური საცრის ქრომატოგრაფია. ამ პროცესში გამოყოფის ტექნიკა დამოკიდებულია ნიმუშში არსებული მოლეკულების განსხვავებულ უნარზე, შევიდნენ გელის ფილტრაციის საშუალების ფორებში.
გელის ფილტრაციის ტექნიკაში, სტაციონარული ფაზა შეიცავს ჰიდრატირებული, ღრუბლისმაგვარი მასალის მძივებს, მოლეკულური ზომების ფორებით, რომლებიც შეიცავს ვიწრო ზომის დიაპაზონს. თუ სხვადასხვა ზომის მოლეკულებისგან შემდგარ წყალხსნარს ამ „მოლეკულური საცერების“შემცველი სვეტის გავლით გავატარებთ, ფილტრაციის საშუალების ფორებზე დიდი მოლეკულები სწრაფად მოძრაობენ სვეტში. ამის საპირისპიროდ, უფრო მცირე მოლეკულები შედიან გელის ფორებში და ნელა მოძრაობენ სვეტში. მოლეკულები გამოდის სვეტიდან მოლეკულური ზომის შემცირების მიზნით.აქ გელის გამორიცხვის ზღვარი არის უმცირესი მოლეკულების მოლეკულური მასა, რომელსაც არ შეუძლია შეაღწიოს მოცემული გელის ფორებში.
არსებობს გელის ფილტრაციის სხვადასხვა ტიპის ტექნიკა, როგორიცაა არაპირდაპირი გელის ფილტრაციის მეთოდი, წონასწორული გელის ფილტრაცია, გელის მარცვლების დიალიზი და ა.შ. არაპირდაპირი გელის ფილტრაციის ქრომატოგრაფია სასარგებლოა ფარისებრი ჯირკვლის თავისუფალი ჰორმონების განსაზღვრაში. წონასწორული გელის ფილტრაციის ქრომატოგრაფია არაპირდაპირი ტექნიკაა, რომელიც ძირითადად გამოიყენება თავისუფალი სტეროიდების გასაზომად, როგორიცაა კორტიზოლი, ტესტოსტერონი და ა.შ.
რა არის აფინური ქრომატოგრაფია?
აფინური ქრომატოგრაფია არის ანალიტიკური ტექნიკა და გამოყოფის მეთოდი, რომელიც დამოკიდებულია იმობილიზებულ ლიგანსა და მის შემაკავშირებელ პარტნიორს შორის სპეციფიკურ დამაკავშირებელ ურთიერთქმედებაზე.ზოგიერთი მაგალითი მოიცავს ანტისხეულ-ანტიგენის შეკავშირებას, ფერმენტ-სუბსტრატის შეკავშირებას და ფერმენტ-ინჰიბიტორთან შეკავშირებას. აქედან გამომდინარე, ამ ტექნიკას აქვს მრავალი მნიშვნელოვანი გამოყენება ნუკლეინის მჟავას გაწმენდაში, ცილების გაწმენდაში უჯრედული ექსტრაქტებიდან და სისხლისგან გაწმენდისთვის.
ამ ტექნიკაში, ყველაზე მნიშვნელოვანი თვისებაა ლიგანდის იმობილიზაცია. ამისთვის შეგვიძლია გამოვიყენოთ სხვადასხვა მასალები, როგორიცაა აკრილატები და სილიკა გელი. მნიშვნელოვანია, რომ თავიდან იქნას აცილებული სამიზნე მოლეკულის სტერული ჩარევა ლიგანდში. უფრო მეტიც, მყარ ფაზას ერთვის ინჰიბიტორი. ჩვენ ამ ინჰიბიტორს სპეისერს ვუწოდებთ. კლასიკურად, სპაისერი შედგება ნახშირწყალბადის ჯაჭვისგან.
აფინური ქრომატოგრაფიის სტაციონარული ფაზა შეიცავს ბირთვს, დისპეჩერს და ლიგანდს.ზოგჯერ მას ასევე აქვს ლითონის იონი, რომელიც დაკავშირებულია ლიგანდთან. ამ ტექნიკის სტაციონარული ფაზის ყველაზე სასურველი მყარი ფაზა არის აგაროზის გელი, რადგან ის ადვილად იშლება სვეტის შესავსებად და შესაფუთად ნებისმიერი ზომის ფისოვანი საწოლებით და საკმარისად დიდია ბიომოლეკულებისთვის თავისუფლად მიედინება მძივებში და მეშვეობით. ლიგანდებს შეუძლიათ კოვალენტურად მიამაგრონ მძივის პოლიმერი სხვადასხვა გზით. ყველაზე გავრცელებული დისპერსიული ნაერთებია ციანოგენის ბრომიდი, ეპოქსიდი, ეპოქსიდი C6 მჟავით და დიამინი. მეორეს მხრივ, ლიგანდი, რომელიც ჩვენ შეგვიძლია გამოვიყენოთ, განსხვავდება მიზნის მიხედვით, მაგ., ანტისხეული-ანტიგენი, რკინის ან ალუმინის იონები-ფოსფოპროტეინები, ავიდინ-ბიოტინი, გლუტათიონი-GST, ქელატორი-His-ზე მონიშნული ცილები და ა.შ.
რა განსხვავებაა გელის ფილტრაციასა და აფინურ ქრომატოგრაფიას შორის?
ქრომატოგრაფია მნიშვნელოვანი ანალიტიკური ტექნიკაა. გელის ფილტრაციის ქრომატოგრაფია და აფინური ქრომატოგრაფია ქრომატოგრაფიის ორი მნიშვნელოვანი ვარიაციაა. გელის ფილტრაციასა და აფინურ ქრომატოგრაფიას შორის მთავარი განსხვავებაა ის, რომ გელის ფილტრაციის ქრომატოგრაფია დამოკიდებულია ანალიზის ნიმუშის მოლეკულურ წონაში ან ზომაში განსხვავებებზე, ხოლო აფინური ქრომატოგრაფია დამოკიდებულია ანალიზის აფინურობაზე იმობილიზებულ ლიგანდთან.
შეჯამება – გელის ფილტრაცია აფინურ ქრომატოგრაფიის წინააღმდეგ
არსებობს სხვადასხვა ტიპის ქრომატოგრაფიული ტექნიკა მათი გამოყენებისა და ანალიზის ნიმუშის ბუნების მიხედვით. გელის ფილტრაცია და აფინური ქრომატოგრაფია ორი ასეთი ტიპის ტექნიკაა. გელის ფილტრაციასა და აფინურ ქრომატოგრაფიას შორის მთავარი განსხვავებაა ის, რომ გელის ფილტრაციის ქრომატოგრაფია დამოკიდებულია ანალიზის ნიმუშის მოლეკულურ წონაში ან ზომაში განსხვავებულობაზე, მაშინ როცა აფინური ქრომატოგრაფია დამოკიდებულია ანალიზის აფინურობაზე იმობილიზებული ლიგანდის მიმართ.
